本文關(guān)鍵詞：酶解酪蛋白生產(chǎn)ACE抑制肽，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 酪蛋白是乳中含量最豐富的蛋白質(zhì)，含有人體生長發(fā)育所必需的氨基酸。近年來的研究結(jié)果表明，酪蛋白除具有營養(yǎng)功能之外，還具有非常重要的生理功能，是生物活性肽的重要來源，其中乳源ACE抑制肽以安全性高、無副作用等優(yōu)點(diǎn)在高血壓的防治中具有十分重要的研究價(jià)值和實(shí)用價(jià)值，成為國內(nèi)外科學(xué)家們研究的熱點(diǎn)。在我國，有關(guān)乳源ACE抑制肽的研究還是空白，進(jìn)行乳源ACE抑制肽的工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)的研究具有重要的學(xué)術(shù)意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。本課題即以牛乳酪蛋白為原料，采用蛋白酶進(jìn)行水解，研究水解的最佳工藝參數(shù)，并對(duì)水解液進(jìn)行了超濾分離及脫鹽精制工藝的研究，初步建立了ACE抑制肽的工業(yè)化生產(chǎn)工藝技術(shù)，并得到了以下一些結(jié)論。 改進(jìn)并建立了可靠的ACE抑制肽的體外抑制活性檢測方法，該方法具有良好的精確性和重現(xiàn)性，可用于各種樣品的ACE的抑制活性的檢測。 通過對(duì)來源豐富的五種蛋白酶進(jìn)行比較篩選，最終確定蛋白酶C為水解用酶，以生產(chǎn)乳源ACE抑制肽。 采用四因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以ACE抑制活性為指標(biāo)，對(duì)蛋白酶C水解酪蛋白的條件進(jìn)行優(yōu)化，獲得ACE抑制肽水解的最佳反應(yīng)條件為：pH=7.5、溫度=45℃、底物濃度=5％、[E]／[S]=5％，確定最適水解時(shí)間為12小時(shí)。在本實(shí)驗(yàn)條件下所得水解物的IC_(50)值為0.68mg／mL。 對(duì)酪蛋白水解液進(jìn)行超濾研究表明，采用截留分子量為10kDa和3kDa的超濾膜能不同程度地提高水解物的抑制活性，但3kDa的膜能更有效地提高水解物的ACE抑制活性，濾過液得IC_(50)值為0.46mg／mL。對(duì)于3kDa的膜，最佳的超濾工藝條件為：溫度為35℃，操作壓力為0.09Mpa。 采用離子交換樹脂對(duì)水解樣品進(jìn)行脫鹽研究，結(jié)果表明以10倍柱體積／小時(shí)流速，經(jīng)陰陽離子交換樹脂后脫鹽率達(dá)80％左右，氮回收率為83％，脫鹽處理前后樣品的抑制活性基本不變。 初步建立了ACE抑制肽生產(chǎn)的最佳工藝路線：新鮮牛乳→酪蛋白的制備→蛋白酶水解→水解液→離心→上清液→離子交換樹脂脫鹽→冷凍干燥→產(chǎn)品。該工藝采用水解物直接進(jìn)行脫鹽處理生產(chǎn)ACE抑制肽，，原料的蛋白質(zhì)損失較低，產(chǎn)品的ACE抑制活性較高，工藝操作簡潔合理，符合工業(yè)化大生產(chǎn)的要求。 經(jīng)凝膠過濾層析技術(shù)測定，ACE抑制肽產(chǎn)品的分子量小于1500。進(jìn)一步對(duì)酪蛋白、水解物、分離物、精制物的氨基酸分析表明，水解液經(jīng)超濾分離及脫鹽處理后對(duì)氨基酸組成影響不大，其中產(chǎn)品的Val、Asp、Leu、Lys、Pro、Glu等氨基酸占總量的62.04％。
【關(guān)鍵詞】：酪蛋白 ACE ACE抑制肽 水解 超濾 脫鹽
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：TQ28
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-21
• 1.1 研究目的和意義11
• 1.2 高血壓11-12
• 1.2.1 高血壓的分類12
• 1.2.2 高血壓的危害12
• 1.3 ACE與高血壓12-13
• 1.3.1 ACE12-13
• 1.3.2 ACE對(duì)血壓調(diào)節(jié)作用13
• 1.4 ACE抑制肽13-20
• 1.4.1 抗高血壓機(jī)理14
• 1.4.2 評(píng)價(jià)方法14-15
• 1.4.3 結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系15-16
• 1.4.4 乳蛋白來源的ACE抑制肽16-18
• 1.4.5 其它食物來源的ACE抑制肽18-19
• 1.4.6 體內(nèi)吸收和臨床試驗(yàn)19-20
• 1.4.7 獲得方法20
• 1.4.8 分離提取20
• 1.5 研究內(nèi)容20-21
• 2 材料與方法21-31
• 2.1 材料21-22
• 2.1.1 原料與主要試劑21
• 2.1.2 儀器設(shè)備21-22
• 2.2 方法22-31
• 2.2.1 檢測方法22-27
• 2.2.2 酶法生產(chǎn)ACE抑制肽反應(yīng)條件優(yōu)化27-28
• 2.2.3 分離提取28-29
• 2.2.4 脫鹽處理29-30
• 2.2.5 產(chǎn)品的理化性質(zhì)研究30
• 2.2.6 數(shù)據(jù)處理30-31
• 3 結(jié)果與分析31-50
• 3.1 體外抑制活性檢測方法可靠性的研究31-33
• 3.2 酪蛋白的制備33-34
• 3.2.1 酪蛋白的提取33
• 3.2.2 一般成分分析33
• 3.2.3 酪蛋白抑制活性檢測33-34
• 3.3 酶法生產(chǎn)ACE抑制肽水解條件的優(yōu)化34-40
• 3.3.1 蛋白酶活力的測定34-35
• 3.3.2 水解用酶的選擇35-36
• 3.3.3 蛋白酶C水解酪蛋白條件優(yōu)化36-37
• 3.3.4 水解時(shí)間的優(yōu)化37-38
• 3.3.5 水解過程中水解度、游離氨基酸含量的變化38-39
• 3.3.6 水解物IC_(50)的測定39-40
• 3.3.7 營養(yǎng)成分分析40
• 3.4 ACE抑制肽的提取工藝40-44
• 3.4.1 不同截留分子量超濾膜的研究40-42
• 3.4.2 溫度對(duì)超濾通量的影響42
• 3.4.3 壓力對(duì)超濾通量的影響42-43
• 3.4.4 通量與時(shí)間變化關(guān)系43-44
• 3.4.5 超濾液IC_(50)的測定44
• 3.5 ACE抑制肽的脫鹽處理44-47
• 3.5.1 流速的選擇45-46
• 3.5.2 脫鹽處理對(duì)抑制活性的影響46-47
• 3.6 ACE抑制肽產(chǎn)品47-50
• 3.6.1 工藝流程47
• 3.6.2 一般成分分析47-48
• 3.6.3 氨基酸分析48
• 3.6.4 分子量測定48-50
• 4 討論50-53
• 4.1 ACE抑制活性檢測方法的研究50
• 4.2 ACE抑制肽的水解作用條件的優(yōu)化50-51
• 4.3 超濾技術(shù)分離ACE抑制肽51
• 4.4 ACE抑制肽的脫鹽處理51-53
• 5 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 附錄59-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文60-61
• 致謝61

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜瞻梅;遲濤;吳剛;劉麗波;霍貴成;;酪蛋白源ACE抑制肽干燥工藝的探討[J];中國乳品工業(yè);2007年07期

2 姜瞻梅;田波;霍貴成;;超濾法分離酪蛋白酶解物中的ACE抑制肽[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2006年10期

3 張賽賽;李恒星;沙莎;馮鳳琴;;酶膜反應(yīng)器水解酪蛋白連續(xù)制備ACE抑制肽的研究[J];中國食品學(xué)報(bào);2009年06期

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5 蔣小友;;酪蛋白標(biāo)簽?zāi)z研制[J];化學(xué)與粘合;2006年02期

6 楊波;楊光;吳曉溢;;牛奶發(fā)酵過程中酪蛋白分子量變化情況的研究[J];食品工業(yè)科技;2007年10期

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8 劉t�，费秀鲁，姜亦�

本文編號(hào)：252982