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基于氧化鋁納米通道陣列的酶/細(xì)胞的納米組裝與應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-01 12:55
  酶催化反應(yīng)是生物體內(nèi)外源性和內(nèi)源性物質(zhì)代謝的重要途徑,利用納米材料模擬生物體內(nèi)酶的組裝,研究合成化學(xué)品或環(huán)境毒物的生物轉(zhuǎn)化和代謝機(jī)制,對(duì)于生命科學(xué)的發(fā)展、新藥開(kāi)發(fā)、毒理學(xué)研究與評(píng)價(jià)等具有重要的理論與實(shí)踐意義。同時(shí),對(duì)酶與納米材料之間的相互作用機(jī)制以及酶代謝反應(yīng)化學(xué)本質(zhì)的研究亦為環(huán)境化學(xué)物質(zhì)的毒性評(píng)估、氣體參與催化反應(yīng)效率提高以及氣體污染物致病機(jī)制研究等提供了技術(shù)支撐。本論文圍繞酶/細(xì)胞納米組裝,構(gòu)建了基于氧化鋁納米通道陣列的氣-固-液三相界面,用于葡萄糖氧化酶和肺上皮細(xì)胞的組裝,利用電化學(xué)、光譜、質(zhì)譜等多種分析技術(shù),研究了氧氣直接從氣相參與葡萄糖氧化的酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)機(jī)制,和呼吸毒物直接從氣相進(jìn)入細(xì)胞的染毒機(jī)理。具體內(nèi)容如下:1.氣-固-液三相界面構(gòu)建及其酶?jìng)鞲衅鞯膽?yīng)用:氣體在溶液中的低溶解度是涉及氣體的反應(yīng)的主要?jiǎng)恿W(xué)限制。為了提高酶對(duì)氣體參與反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)速率,本工作利用氧化鋁納米通道陣列構(gòu)建了一種浸潤(rùn)性可調(diào)的氣-固-液三相界面并用于組裝葡萄糖氧化酶(GOx),組裝的GOx一側(cè)與葡萄糖水溶液接觸,另一側(cè)與氣相直接接觸,空氣中的O2可以通過(guò)納米通道直接參與酶反應(yīng),并且... 

【文章來(lái)源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

基于氧化鋁納米通道陣列的酶/細(xì)胞的納米組裝與應(yīng)用研究


基因突變的葡萄糖氧化酶與金納米顆粒的共價(jià)鍵合示意圖

示意圖,金基底,金納米顆粒,光照


將銀離子還原成銀納米顆粒(AgNPs),構(gòu)建出一個(gè)新型超先利用共價(jià)方法將一抗抗體固定到殼聚糖修飾的絲網(wǎng)印刷反應(yīng)以后,ALP-Ab/Au NPs 被捕獲到電極表面,然后進(jìn)時(shí)將 Ag+還原為銀納米顆粒。在不同濃度的 ALP-Ab/AuN鉀電解液中采用陽(yáng)極溶出伏安法測(cè)出,這種多功能的免疫量級(jí),檢測(cè)限為 4.8-6.1 pg/ml,同時(shí)還可以用于實(shí)際樣品了串?dāng)_和電化學(xué)免疫測(cè)定的脫氧需求,因此在臨床應(yīng)用中ing 等報(bào)道了利用 DNA-AuNPs 的滾環(huán)擴(kuò)增方法來(lái)檢測(cè)沙門(mén)極表面能夠被探針捕獲,然后加入環(huán)化混合物形成一個(gè)典 phi29 DNA 聚合酶之后,RCA 形成大約 1 m 長(zhǎng)的單鏈別 RCA 產(chǎn)物酶化產(chǎn)生的電化學(xué)信號(hào),檢測(cè)線性范圍從 16 aM (S/N = 3)。這種方法成功應(yīng)用于實(shí)際牛奶中含量約 6可以應(yīng)用到慢性疾病診斷、食品安全和環(huán)境檢測(cè)中。

示意圖,氧化鋁模板,催化反應(yīng),通道


-3 酶固定在氧化鋁模板通道口進(jìn)行催化反應(yīng)示)主要通過(guò)高純度的鋁基底進(jìn)行電化學(xué)內(nèi)含有大量的羥基?梢岳眠@些羥基、陣列規(guī)整、物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、表面-25(突觸小體)固定到氧化鋁模板內(nèi)壁阻抗變化來(lái)檢測(cè)酶的催化活性[45]。Xia 到孔道內(nèi)壁以研究酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。在氧測(cè)酶反應(yīng)的產(chǎn)物。由于質(zhì)子被限制在一的提高。若采用較低的流速,酶反應(yīng)動(dòng)應(yīng)動(dòng)力學(xué)將會(huì)變成速控步[40]。Hinds 等構(gòu)圖 1-3,首先將糖苷酶通過(guò) His6-tag 鍵合應(yīng),第一步生成糖苷酸,第二步是將糖液中酶的活性,固定在納米通道的酶使


本文編號(hào):2951326

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