通過胰酶消化作用對(duì)貼壁型細(xì)胞進(jìn)行收獲一直以來(lái)都是主要的細(xì)胞收獲方式,但是胰蛋白酶會(huì)破壞細(xì)胞外基質(zhì)蛋白,從而導(dǎo)致細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完整性遭到破壞。而通過在溫敏材料上進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),然后利用降低溫度使細(xì)胞自動(dòng)脫附下來(lái),能使細(xì)胞外基質(zhì)得以完整保存,具有優(yōu)越性。聚N-異丙基丙烯酰胺（Poly（N-isopropyl acrylamide）, PNIPAAm）作為一種應(yīng)用廣泛的溫敏高分子材料,具備接近人體體溫的最低臨界溶解溫度（lower critical solution temperature, LCST）細(xì)胞的正常培養(yǎng)溫度高于LCST, PNIPAAm表現(xiàn)出疏水性,適合細(xì)胞的粘附和生長(zhǎng),當(dāng)降溫到LCST以下后,PNIPAAm又呈現(xiàn)親水性,不再適合細(xì)胞的粘附,細(xì)胞能自動(dòng)脫落下來(lái)。聚偏氟乙烯（Polyvinylidene fluoride, PVDF）是一種良好的基底材料,將PNIPAAm接枝到其分子鏈上,可以對(duì)PNIPAAm的機(jī)械性、可紡性等起到一定的改善作用。納米纖維結(jié)構(gòu)可模擬細(xì)胞外基質(zhì),利于細(xì)胞的粘附生長(zhǎng)。利用靜電紡絲技術(shù)將溫敏聚合物制成納米纖維結(jié)構(gòu),細(xì)胞在其表面培養(yǎng),可以達(dá)到良好的粘附生長(zhǎng)... 

【文章來(lái)源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 聚N-異丙基丙烯酰胺及其在細(xì)胞培養(yǎng)與收獲方面研究進(jìn)展
        1.1.1 智能材料和溫度敏感材料概述
        1.1.2 基于PNIPAAm的溫敏聚合物
        1.1.3 基于PNIPAAm的溫敏材料在細(xì)胞培養(yǎng)與收獲上的研究進(jìn)展
    1.2 聚偏氟乙烯及其溫敏改性
        1.2.1 聚偏氟乙烯的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)
        1.2.2 聚偏氟乙烯溫敏膜的制備
    1.3 靜電紡絲技術(shù)構(gòu)建納米纖維及其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.1 靜電紡絲制備納米纖維材料裝置及原理
        1.3.2 電紡纖維在生物醫(yī)用材料領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.3 溫敏電紡纖維
    1.4 本課題選題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容
2 PVDF-g-PNIPAAm溫敏共聚物的合成與表征
    2.1 概述
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 樣品與試劑預(yù)處理
        2.3.2 堿處理法改性PVDF粉末
        2.3.3 PVDF-g-PNIPAAm共聚物的制備
    2.4 PVDF-g-PNIPAAm聚合物的表征
        2.4.1 傅里葉變換紅外光譜
        2.4.2 核磁共振氫譜分析
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.5.1 PVDF-g-PNIPAAm聚合物的溫敏性
        2.5.2 PVDF-g-PNIPAAm聚合物中PNIPAAm的接枝率
    2.6 本章小結(jié)
3 靜電紡絲制備PVDF-g-PNIPAAm溫敏納米纖維及其表征
    3.1 概述
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 純PVDF電紡的適宜紡絲參數(shù)確定
        3.3.1 確定適宜電紡參數(shù)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.3.2 PVDF紡絲液的配制
        3.3.3 靜電紡絲制備純PVDF納米纖維操作過程
        3.3.4 不同纖維材料表觀形貌及直徑分布
    3.4 PVDF-g-PNIPAAm納米纖維制備及表征
        3.4.1 靜電紡絲制備PVDF-g-PNIPAAm納米纖維
        3.4.2 PVDF-g-PNIPAAm納米纖維的表征
    3.5 結(jié)果分析與討論
        3.5.1 純PVDF電紡的適宜紡絲參數(shù)
        3.5.2 不同接枝率的PVDF-g-PNIPAAm納米纖維的形態(tài)表征
        3.5.3 PVDF-g-PNIPAAm納米纖維的化學(xué)組成表征
        3.5.4 PVDF及PVDF-g-PNIPAAm納米纖維膜表面的接觸角
    3.6 本章小結(jié)
4 細(xì)胞在PVDF-g-PNIPAAm納米纖維上的培養(yǎng)與收獲
    4.1 概述
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 細(xì)胞試驗(yàn)所需溶液的配制
        4.3.2 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.3.3 PC12細(xì)胞在PVDF及PVDF-g-PNIPAAm納米纖維上的粘附生長(zhǎng)
        4.3.4 材料表面細(xì)胞Calcein/PI/Hoechst熒光染色
        4.3.5 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性
        4.3.6 PC12細(xì)胞在PVDF-g-PNIPAAm納米纖維膜表面的降溫脫附
        4.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
工作展望
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄A 英文縮略詞
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]PLGA/MWNTs復(fù)合電紡支架在肌肉組織工程中的研究[D]. 謝婭.華東理工大學(xué) 2014
[2]ATRP法制備溫敏性聚合物膜及其初步藥物釋放研究[D]. 陶振.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[3]高低臨界溶解溫度可同時(shí)調(diào)節(jié)的熱響應(yīng)性高分子聚合物的合成[D]. 田海英.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2011
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