【摘要】：生物巰基化合物主要包括半胱氨酸、谷胱甘肽和同型半胱氨酸,它們的含量與許多疾病相關(guān),在病理診斷過程中起著重要的作用。而重金屬離子作為污染物,廣泛存在于水、土壤或者食物中,一旦含量超出正常范圍,就會對人體造成危害。因此發(fā)展簡單、可靠、選擇性好、靈敏度高的生物巰基化合物和重金屬離子的檢測方法對人類健康、環(huán)境檢測、食品安全以及臨床診斷都具有重要的現(xiàn)實意義。本論文主要圍繞發(fā)展簡單、快速、高靈敏度的比色法,并研究這些方法在半胱氨酸、谷胱甘肽、同型半胱氨酸及銀離子檢測中的應(yīng)用。要點如下:1.發(fā)展了一種基于I~--H_2O_2-TMB體系的比色法用于生物巰基化合物的檢測。I~-在H_2O_2的存在下可以氧化TMB,得到溶液為藍(lán)色的ox-TMB且在652 nm處有較強(qiáng)的紫外-可見吸收峰;加入生物巰基化合物后,I~-氧化TMB的過程被抑制,溶液顏色變淺,在652 nm處的紫外-可見吸收峰降低。在最佳條件下,該方法檢測半胱氨酸、谷胱甘肽、同型半胱氨酸的檢出限分別為0.1、0.5和5μM。通過生物巰基化合物加入前后溶液的變化可以進(jìn)行定性分析,而紫外-可見吸收峰強(qiáng)度的變化可以完成定量測定。同時,該體系不受其他氨基酸的影響,所以我們的方法選擇性較好,靈敏度較高。且與其他報道對比,我們的研究更為簡單、省時、環(huán)保、無需制備復(fù)雜的材料和依賴昂貴的設(shè)備。最后,該方法為人血漿中生物巰基化合物的成功檢測提供了一個極好的平臺,展現(xiàn)了其在生物醫(yī)學(xué)傳感器方面的潛力,為生物巰基化合物的檢測提供了新的思路。2.建立了一種基于半胱氨酸修飾的金納米粒子來檢測銀離子的比色法。首先對可能影響檢測效果的因素進(jìn)行了優(yōu)化,并在得到的最佳實驗條件下,研究了當(dāng)存在不同濃度的銀離子時對Au NPs聚合程度的影響。向體系中引入半胱氨酸時,半胱氨酸和Au NPs由于生成Au-S鍵,使Au NPs發(fā)生聚集,溶液變?yōu)樗{(lán)色,且紫外-可見吸收峰在640 nm處出現(xiàn);而引入銀離子后,銀離子和半胱氨酸之間有強(qiáng)的親和力,使半胱氨酸從Au NPs表面脫離,Au NPs重新分散,溶液變回紅色,且紫外-可見吸收峰回到520 nm處。通過銀離子加入前后溶液的變化可以進(jìn)行定性分析,兩處峰強(qiáng)度比值的變化可以完成定量測定�；谝陨犀F(xiàn)象,成功實現(xiàn)了對銀離子的檢測。我們所提出的方法不需要精密細(xì)致的儀器、反應(yīng)時間快、成本低。此外,該方法選擇性好,其他離子對體系都沒有明顯的干擾。本方法可以通過修飾各種特定的配體到Au NPs上,選擇性的結(jié)合目標(biāo)金屬離子來檢測其他金屬離子,也為其他離子的檢測提供了新的思路。
【圖文】：

吉林師范大學(xué)碩士學(xué)位論文了銀納米粒子（AgNPs）的突出性能和比色法的簡單性來檢測 GSH 和 Cyste（圖 1-1）。當(dāng)存在 Cyste 時，會使 AgNPs 快速聚集，溶液變?yōu)榧t色；當(dāng)存在 GSH 時，GSH 與 AgNPs相互作用，使黃色的 AgNPs 變?yōu)闊o色溶液，以此實現(xiàn)了對含巰基化合物的檢測。該傳感器展示了好的靈敏度，GSH 和 Cyste 的檢出限分別為 1.80×10-8M 和 3.68×10-7M。與其他方法相比，本實驗在簡單快速的同時，不需要使用復(fù)雜的儀器且成本較低。此外，所提出的比色方法成功的應(yīng)用于人造血清中 GSH 和 Cyste 的檢測，為其在生物樣品的測定中提供了平臺[54]。鑒于以上現(xiàn)象，比色傳感器被廣泛應(yīng)用于生物巰基化合物的檢測中，對此我們將在下一部分詳細(xì)介紹。

圖 1-2 基于巰基改性的氧化石墨烯（GO-SH）檢測鈷、鎳、銅、砷、鎘和鉛離子的示意.2.4 電化學(xué)分析法在電化學(xué)方法中，伏安法是最常使用的，部分原因是它可以探測所研究體系的伏安法包括循環(huán)伏安法、方波伏安法、差分脈沖伏安法、溶出伏安法和線性掃等。通常，伏安法測定是以三個電極（工作電極、對電極和參比電極）構(gòu)成的置中的電壓-電流參量的變化來進(jìn)行分析的。如 Han 等人采用具有介孔結(jié)構(gòu)的MnFe2O4納米晶簇（MnFe2O4NC）通過方波陽極溶出伏安法對 Pb2+進(jìn)行選擇性分MnFe2O4NC 修飾的玻碳電極對 Pb2+有很好的選擇性，不受 Cd2+、Hg2+、Cu2+和響，得到較低的檢出限為 0.054 μM。此外，，通過電化學(xué)測試證明了該方法有好及潛在的實際應(yīng)用性，說明本實驗方法可以為電化學(xué)檢測重金屬離子領(lǐng)域提供感材料[60]。.2.5 比色法
【學(xué)位授予單位】：吉林師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：O657.3;TB383.1

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6 郭旭東;胡睿;楊國強(qiáng);;一種檢測巰基化合物的新型熒光探針及其在生物成像中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第29屆學(xué)術(shù)年會摘要集——第21分會：光化學(xué)[C];2014年

7 王雅蘭;馮鈺

本文編號：2609593