基于納米材料的新型熒光傳感體系的構筑
本文關鍵詞: 熒光 量子點 金納米簇 傳感器 出處:《江南大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文
【摘要】:隨著相關學科和新技術的迅猛發(fā)展,熒光分析法在靈敏度、選擇性、準確度等方面都得到了很大程度的提升,其應用范圍也遍布各個領域。因為具有優(yōu)良的光學特性,納米材料為構建新型靈敏的熒光傳感器提供了優(yōu)秀的敏感材料。本文研究了納米材料(量子點、金納米簇)在熒光檢測生物分子如葡萄糖、凝血酶、堿性磷酸酶和小鼠Ig G方面的應用。量子點是一種發(fā)展成熟、應用廣泛的熒光納米材料,具有好的光穩(wěn)定性,窄的發(fā)射光譜,高的發(fā)光強度,是目前研究的一個熱點。金納米簇是比量子點尺寸更小的一種熒光納米材料,直徑通常小于2 nm,是繼量子點之后的又一種新型熒光納米材料,由于其具有超小的尺寸,優(yōu)異的生物相容性,良好的水溶性,大的斯托克斯位移,低的毒性,高的量子產率和易于合成等優(yōu)點,使其在生物檢測方面?zhèn)涫懿毮。本論文以量子點(Cd S、Cd Te量子點)和金納米簇為研究對象,主要研究內容如下:1、基于量子點熒光猝滅的葡萄糖傳感器構建了一種新型靈敏的量子點-雙酶(葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根過氧化物酶(HRP))復合體系用于葡萄糖直接檢測。HRP的兩種底物,鄰苯二胺(OPD)和3,3’-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)的氧化產物(ox OPD和ox DAB)能夠有效地猝滅巰基乙酸修飾的Cd S量子點的熒光。最佳實驗條件下,量子點猝滅效果與葡萄糖濃度之間存在良好的線性關系。當使用OPD(或DAB)作為HRP的底物時,檢測限可達0.1μmol/L(或20 nmol/L)。本方法還成功地應用于人血清中葡萄糖含量的檢測,檢測過程中不需要對血清樣本進行預處理,檢測結果令人滿意。2、基于光誘導電子轉移與模擬酶信號放大作用的高靈敏凝血酶熒光傳感器利用光誘導電子轉移(PET)引起Cd Te量子點熒光猝滅的原理建立了一個新型靈敏檢測凝血酶的適體傳感器。具有模擬酶作用的二次配體Pt NPs/G-四面體/hemin和G-四面體/hemin在H2O2存在下催化對苯二酚(HQ)生成大量的2-羥基-對苯醌(HPB),HPB與Cd Te量子點之間存在PET作用,引起量子點熒光猝滅。另外,Cd Te量子點和與其相連的G-四面體/hemin中的hemin之間也有PET作用;诙闻潴w和G-四面體/hemin引導的雙重PET過程對熒光信號的輸出起到一個放大作用,由此提高檢測的靈敏度。最佳實驗條件下,凝血酶在0.05 pmol/L到10 nmol/L范圍內具有良好的線性響應,最低檢測限可達0.015 pmol/L。該方法思路新穎、靈敏度高、選擇性好。3、基于金納米簇的熒光增強型高靈敏堿性磷酸酶檢測及免疫分析應用牛血清白蛋白(BSA)修飾的金納米簇中,簇與修飾模板BSA之間通過Au-S鍵相連,Au-S鍵對金納米簇的結構及熒光起到穩(wěn)定和保護的作用。KMn O4能夠氧化金納米簇中的Au0及修飾模板BSA,破壞表面結構進而導致金納米簇熒光發(fā)生猝滅?箟难(AA)則能夠還原被KMn O4氧化的Au3+及BSA,使表面結構恢復從而使金納米簇熒光得到恢復。另外,堿性磷酸酶(ALP)能夠催化其底物抗壞血酸磷酸三鈉鹽(AAP)分解生成AA;诖宋覀兘⒘艘环N靈敏檢測ALP的增強型熒光傳感器,檢測限可達0.003 U/L。另外,我們還拓展了該方法在小鼠Ig G免疫分析方面的應用,檢測限可達1.5 pg/m L。本實驗具有便捷、靈敏度高與選擇性好等優(yōu)點,為構建基于貴金屬納米簇的增強型熒光傳感器在生物檢測方面的應用提供了借鑒。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:江南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:O657.3;TB383.1
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,本文編號:1466353
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