藍藻毒素合成蛋白McyF和家蠶保幼激素環(huán)氧水解酶的結(jié)構研究
本文關鍵詞:農(nóng)業(yè)利用外資對江蘇省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長貢獻的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】由藍藻大量爆發(fā)引起的水華和赤潮是一個世界性的難題,其對環(huán)境的污染主要是通過制造并向水體中釋放各種毒素。微囊藻毒素是藍藻合成的眾多毒素中最常見也是危害最大的一類,主要由微囊藻屬、項圈藻屬、念珠藻屬和顫藻屬的藍細菌制造。微囊藻毒素的生物合成由位于同一個基因簇的一系列的毒素合成蛋白循序完成。我們解析了其中的一個重要蛋白,天冬氨酸消旋酶McyF與其底物L-型天冬氨酸、D-型天冬氨酸和抑制劑檸檬酸各自的復合物晶體結(jié)構。結(jié)構分析和同源蛋白比對揭示了其底物結(jié)合口袋的一些結(jié)構細節(jié)。這些發(fā)現(xiàn)增加了我們對于McyF的底物結(jié)合和催化機制的理解,并可能對生物方法抑制毒素合成有所幫助。保幼激素是調(diào)節(jié)昆蟲變態(tài)發(fā)育的一種重要激素,保幼激素環(huán)氧水解酶(JHEH)是保幼激素降解通路上的一個關鍵蛋白。我們解析了家蠶保幼激素環(huán)氧水解酶的2.30A的晶體結(jié)構。其整體結(jié)構由一個N端片段,一個水解酶區(qū)域和一個插入水解酶區(qū)域中的lid區(qū)構成。結(jié)構分析和分子模擬顯示其底物結(jié)合口袋有一些保守并且獨有的特征。這些發(fā)現(xiàn)增加了我們對微粒體環(huán)氧水解酶的底物識別和催化機制的理解,并且為以后保幼激素衍生的殺蟲劑的設計提供了結(jié)構依據(jù)。蠶絲是自然界最引人注目的生物材料之一。蠶絲主要由絲心蛋白和絲膠蛋白組成,這兩類蛋白都由家蠶的絲腺合成和分泌,在絲腺腔中混合裝配后,從蠶的吐絲口噴出形成蠶絲。關于蠶絲的裝配機制一直是蠶學家們研究的熱點和難點。絲心蛋白由3種蛋白組成:絲心蛋白重鏈、絲心蛋白輕鏈和糖蛋白P25。我們通過串聯(lián)表達的方法獲得了絲心蛋白輕鏈與重鏈C端復合體蛋白,并使用圓二色譜和動態(tài)光散射檢測其理化狀態(tài)。絲心蛋白輕鏈與重鏈C端復合體在溶液中的狀態(tài)與重鏈N端不同,它以二體形式存在,且其二級結(jié)構不隨pH變化而改變。這些研究成果為我們進一步研究蠶絲的結(jié)構和裝配機制提供了基礎。
【作者】周康;
【導師】周叢照;陳宇星;
【作者基本信息】中國科學技術大學,生物化學與分子生物學,2014,,博士
【關鍵詞】藍細菌;微囊藻毒素;天冬氨酸消旋酶;家蠶;保幼激素環(huán)氧水解酶;蠶絲;絲心蛋白輕鏈;絲心蛋白重鏈;晶體結(jié)構;
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本文編號:114611
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