本文選題：延后植入 + 妊娠結(jié)局　； 參考：《黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報告,不孕不育將發(fā)展成為續(xù)腫瘤和心腦血管疾病之后的第三大疾病。目前,盡管輔助生殖技術(shù)已經(jīng)成為治療不孕不育的重要手段,但它的成功率仍然僅維持在40%~50%左右的水平上,在動物中的體細(xì)胞核移植技術(shù)方面也是同樣的,該技術(shù)的最終產(chǎn)仔率僅僅只有1%~5%。限制這些技術(shù)應(yīng)用的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是胚泡植入失敗(Implantation Failure)。胚泡植入既需要胚泡由休眠狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ顮顟B(tài),也需要子宮從非接受態(tài)變?yōu)槭苋轄顟B(tài),且二者必須同步進(jìn)行方能完成胚泡在子宮內(nèi)膜的定位、粘附、侵入、發(fā)育及分化的生理過程即成功植入。成功植入是決定胚胎繼續(xù)發(fā)育和妊娠結(jié)局的關(guān)鍵步驟。在哺乳動物中也包括人類,植入失敗是造成妊娠率低的一個主要因素。醫(yī)學(xué)臨床研究表明正常育齡女性在一個月經(jīng)周期內(nèi)平均妊娠成功率大約為30%,在成功排卵受孕的婦女中僅有50%~60%的早期妊娠胚胎能夠發(fā)育到20周以后,而其中妊娠失敗的70%左右是由于植入失敗所導(dǎo)致的。此外,植入失敗也是造成動物屢配不孕的主要原因之一。因此,本試驗聚焦于胚胎延后植入對妊娠結(jié)局的影響,探尋決定胚胎植入時間分子基礎(chǔ)和妊娠維持的生理調(diào)控機(jī)制,為解決胚胎移植后高流產(chǎn)率、低產(chǎn)仔率提供理論基礎(chǔ),為提高動物的繁殖效率、增加經(jīng)濟(jì)效益以及瀕危動物的保護(hù)提供技術(shù)支撐。本研究利用胚胎移植技術(shù)將妊娠第4天(d 4)的胚泡分別移植入受體鼠d 4、d 5、d 6的子宮內(nèi),觀察其妊娠狀況并統(tǒng)計其妊娠期長、窩產(chǎn)仔數(shù)。在移植后的24 h、48 h、72 h和8 d分別檢查其植入位點數(shù)、胚胎吸收數(shù)以及其胎盤發(fā)育情況。此外,用人工誘導(dǎo)蛻膜化檢查其蛻膜狀況。采用Microarray和real-time RT-PCR方法篩選并驗證d 4和d 5子宮基因。結(jié)果顯示,小鼠的胚胎在延后1天(即d 5)也能著床并能誘導(dǎo)蛻膜化的發(fā)生,而延后2天則不能發(fā)生植入。與正常組(d 4移植)相比,延后著床組的胚胎吸收率明顯增加、窩產(chǎn)仔數(shù)明顯減少且妊娠期延長。Microarray篩選出了284個差異表達(dá)的子宮基因。研究結(jié)果表明了小鼠胚胎在超出傳統(tǒng)認(rèn)為的子宮植入窗口期亦可著床,但會導(dǎo)致植入位點間隙不均和胎盤發(fā)育異常進(jìn)而產(chǎn)生妊娠不良的結(jié)局。子宮方面的調(diào)控可能是造成間隙不均和胎盤異常的主要因素。此外,本研究成功地創(chuàng)建了一個可靠的接受期與非接受期的子宮基因數(shù)據(jù)庫。
[Abstract]:Infertility will develop into the third largest disease after cancer and cardiovascular and cerebrovascular diseases, according to the World Health Organization. At present, although assisted reproductive technology has become an important method for the treatment of infertility, its success rate is still only about 40%, and the same is true of somatic cell nuclear transfer in animals. The final birth rate of this technique is only 1 / 5. The key to limiting the application of these technologies is implantation failure. The implantation of blastocyst requires that the blastocyst change from dormancy state to active state, and that the uterus changes from non-accepted state to capacitive state. Both of them must be simultaneously carried out to complete the location, adhesion and invasion of the blastocyst in the endometrium. The physiological process of development and differentiation was successfully implanted. Successful implantation is a crucial step in determining the continued development of the embryo and the outcome of the pregnancy. Failure to implant is a major factor in low pregnancy rates in mammals, as well as in humans. Medical clinical studies have shown that the average pregnancy success rate for normal women of childbearing age is about 30 percent in one menstrual cycle, and that only 50 percent of the women who successfully ovulate and conceive have the ability to develop their early pregnancy embryos after 20 weeks. About 70% of pregnancy failure is due to implantation failure. In addition, the failure of implantation is also one of the main reasons for repeated infertility. Therefore, this study focused on the effect of delayed implantation on the outcome of pregnancy, explored the molecular basis of embryo implantation time and physiological regulation mechanism of pregnancy maintenance, and provided the theoretical basis for solving the problem of high abortion rate and low birth rate after embryo transfer. It provides technical support for improving animal reproduction efficiency, increasing economic benefit and protecting endangered animals. In this study, the blastocysts of the 4th day of pregnancy (d 4) were transplanted into the uterus of the recipient mouse d 4 d 5 d 6 by embryo transfer technique. The pregnancy status was observed and the gestational period was long and litter size was counted. The implantation sites, embryo resorption and placenta development were examined at 24 h, 48 h, 72 h and 8 d after transplantation, respectively. In addition, the decidua status was examined by artificial induced decidualization. D 4 and d 5 genes were screened and verified by microarray and real-time RT-PCR. The results showed that mouse embryos could also implant and induce decidualization 1 day later (i.e. d 5), but delayed 2 days could not induce implantation. Compared with the normal group (d 4 transplantation), the embryo absorption rate of the delayed implantation group was significantly increased, the litter size was significantly decreased and the gestational period prolonged. Microarray screened 284 differentially expressed uterine genes. The results showed that mouse embryos could also be implanted during the implantation window beyond the conventional belief, but it would lead to uneven implantation sites and abnormal placental development, which would lead to the adverse outcome of pregnancy. Uterine regulation may be a major cause of uneven gaps and placental abnormalities. In addition, we successfully created a reliable uterine gene database for both receptive and non-receptive periods.
【學(xué)位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R714.8

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本文編號：2092411