發(fā)布時(shí)間：2017-04-10 18:39

  本文關(guān)鍵詞：性別決定技術(shù)在銀狐養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：狐貍屬于哺乳綱,食肉目,犬科動(dòng)物。我國(guó)的狐貍養(yǎng)殖業(yè)主要分布在北方較寒冷的地區(qū),如：河北、山東、內(nèi)蒙古、東北等地。銀狐又叫銀黑狐,是赤狐的一種基因突變種,被毛呈黑白相間,且有一層霧狀形的針毛,是人們飼養(yǎng)的珍貴毛皮動(dòng)物主要品種之一。安徽省皖北有多家狐貍養(yǎng)殖企業(yè),這些企業(yè)在狐貍養(yǎng)殖過(guò)程中,一般采用的是自然繁殖的方式,狐貍發(fā)情期短,一年只有兩個(gè)個(gè)月左右的發(fā)情期,并且繁殖率低,每胎只能產(chǎn)2-3只后代,自然繁殖方式難以滿(mǎn)足狐貍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)高速擴(kuò)大再生產(chǎn)的需要。隨著人工授精技術(shù)的發(fā)展,授精技術(shù)越來(lái)越成熟,雖然繁殖率得到了大大的提高,但相比貉子等皮毛動(dòng)物產(chǎn)率仍然低很多,加之保胎也困難很多,怎樣提高養(yǎng)狐業(yè)的繁殖率,這是最受人們關(guān)注的。養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中母狐的需求量往往不能被滿(mǎn)足,提高母狐的產(chǎn)量是養(yǎng)殖廠擴(kuò)大再生產(chǎn)的關(guān)鍵。如果能在受精前做好性別分離,將會(huì)大大節(jié)約資源和時(shí)間,提高性別控制與鑒定和胚胎移植的效率。本文以皖北銀狐為研究對(duì)象,探究皖北銀狐精子發(fā)生的過(guò)程與季節(jié)影響、皖北銀狐的精液品質(zhì)、提高精子常溫液態(tài)保存效果、輸精前對(duì)X精子進(jìn)行篩選,從這幾環(huán)節(jié)來(lái)提高狐貍的繁殖率,最終通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將性別決定技術(shù)應(yīng)用在銀狐養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。為銀狐人工繁殖受精率奠定基礎(chǔ),進(jìn)而滿(mǎn)足狐貍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)擴(kuò)大再生產(chǎn)的需要。通過(guò)研究得出的結(jié)論主要有以下幾個(gè)方面：1.分析了季節(jié)對(duì)皖北地區(qū)銀狐精子發(fā)生的影響,表明精子發(fā)生呈現(xiàn)典型的季節(jié)性,從而確定了采集公狐精液的最佳時(shí)間段。以9月、11月、次年1月份的銀狐睪丸為研究對(duì)象,測(cè)量睪丸的重量、體積等基礎(chǔ)形態(tài)參數(shù)以及采用酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)睪丸中睪酮的含量。利用組織切片技術(shù)分析曲細(xì)精管中各類(lèi)生精細(xì)胞的組成及比例。結(jié)果：9月、11月、次年1月銀狐睪丸的重量分別為0.896±0.002g、3.365±0.081 g、5.241±0.100 g,體積分別為1.215±0.036 cm3、5.558±0.794cm3、14.112±2.8543 cm3,睪酮含量分別為1.215±0.036μg、5.558±0.794μg、14.112±2.8543μg。結(jié)果表明,不同月份銀狐睪丸的體積、重量以及睪酮含量有顯著差異(P0.05),并且睪丸中睪酮的含量與重量的變化呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.991。切片上曲細(xì)精管中生精細(xì)胞的組成、數(shù)量隨著季節(jié)變化也呈現(xiàn)不同,差異性顯著(P0.05)。2.從分析皖北銀狐精液品質(zhì)入手,配制了一種安全、高效、經(jīng)濟(jì)的銀狐精子稀釋液,延長(zhǎng)了精子在體外的存活時(shí)間,提高了人工授精時(shí)母狐的受孕率和單胎產(chǎn)胎數(shù)。結(jié)果顯示,皖北銀狐的射精量在0.5-1.5 m1/次,精子密度在5億/ml左右。母狐子宮的精子容納量為0.5 m1左右。實(shí)驗(yàn)證明將精液進(jìn)行稀釋,稀釋5倍左右并不會(huì)對(duì)受孕率以及受孕胎數(shù)造成影響,而稀釋液質(zhì)量的好壞則直接影響精子的活率和活力,進(jìn)而影響銀狐繁殖率。本研究配制了一種優(yōu)質(zhì)銀狐常溫保存的精子稀釋液。以貂、人等其他動(dòng)物精子稀釋液成分為基礎(chǔ),配制出三種液態(tài)保存精子稀釋液,在細(xì)胞水平上觀測(cè)稀釋液的保存效果,確定了最優(yōu)的配方配制方法：配制100 m1稀釋液,稱(chēng)量三羥甲基氨基甲烷2.13 g、檸檬酸1.24 g、D果糖0.71g、雙蒸水80 ml、卵黃液10 ml、Ham's F-10 10ml和青霉素7萬(wàn)IU,混合均勻。實(shí)驗(yàn)組15只母狐用本稀釋液稀釋精液受孕,平均產(chǎn)下的小仔數(shù)為6.5±1.5只；對(duì)照組使用養(yǎng)殖場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的稀釋液,185只母狐平均產(chǎn)仔數(shù)為4.5±1.5只,差異顯著。結(jié)果表明用本精液稀釋液來(lái)稀釋精液,銀狐可以產(chǎn)出更多的后代。3.建立起一種優(yōu)選的X精子分離技術(shù),取得了一定成效,提高了雌雄比例,為提高狐貍的繁殖率提供了依據(jù)。以銀狐為研究對(duì)象,利用優(yōu)化的梯度離心沉積法分離X精子,再在細(xì)胞水平上鑒定X精子的比率,最后進(jìn)行人工授精使母狐受孕。通過(guò)產(chǎn)下的狐貍小仔數(shù)以及性別比例與常規(guī)人工授精方法做比較。利用本性別決定技術(shù)分離出的X精子,給10只母狐人工授精后,產(chǎn)出72只后代,其中雌性后代61只,占總后代數(shù)的84.7%,對(duì)照組雌性后代占51.6%。
【關(guān)鍵詞】：銀狐 精子發(fā)生 睪丸 稀釋液 性別決定
【學(xué)位授予單位】：安徽大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S865.23
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-18
• 1 狐貍10-12
• 1.1 銀狐的起源10
• 1.2 銀狐的生物學(xué)特性10-12
• 2 性別決定技術(shù)概述12-14
• 2.1 性別決定在銀狐養(yǎng)殖業(yè)的意義12-13
• 2.2 性別決定技術(shù)的發(fā)展13-14
• 3 研究的目的、意義和方法14-16
• 3.1 研究的目的和意義14-16
• 4 研究?jī)?nèi)容16-18
• 4.1 實(shí)驗(yàn)基地16
• 4.2 研究?jī)?nèi)容16-17
• 4.3 研究特點(diǎn)17-18
• 第一章：季節(jié)對(duì)銀狐精子發(fā)生的影響18-31
• 1 材料與方法19-22
• 1.1 材料19
• 1.2 試劑及儀器設(shè)備19
• 1.3 睪丸獲取19-21
• 1.4 睪酮的測(cè)定21
• 1.5 石蠟組織切片21-22
• 1.6 數(shù)理統(tǒng)計(jì)22
• 2 結(jié)果22-29
• 2.1 睪丸體積及重量22-24
• 2.2 睪丸中睪酮的含量24-25
• 2.3 曲細(xì)精管中生精細(xì)胞的分布25-26
• 2.4 附睪中精子數(shù)量26-29
• 3 討論29-31
• 第二章：銀狐精液參數(shù)測(cè)定及精子稀釋液配制31-42
• 1 材料與方法32-35
• 1.1 材料32
• 1.2 方法32-35
• 2 結(jié)果35-39
• 2.1 銀狐精液參數(shù)35-37
• 2.2 不同精液稀釋液體外對(duì)精子活率的影響37-38
• 2.3 精液稀釋液的人工授精效果檢測(cè)38-39
• 3 討論39-42
• 第三章：銀狐X精子分離及在產(chǎn)業(yè)化中的基礎(chǔ)應(yīng)用研究42-50
• 1 材料與方法42-45
• 1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)42-43
• 1.2 精液采集43
• 1.3 實(shí)驗(yàn)材料與配制方法43
• 1.4 精液參數(shù)的常規(guī)分析43
• 1.5 流式細(xì)胞術(shù)分離X精子43-44
• 1.6 密度梯度離心分離X精子44
• 1.7 X精子占比分析44-45
• 1.8 人工授精45
• 1.9 數(shù)理統(tǒng)計(jì)45
• 2 結(jié)果45-48
• 2.1 流式細(xì)胞術(shù)分離X精子45-46
• 2.2 密度梯度離心分離出X精子的占比46
• 2.3 人工授精46-48
• 3 討論48-50
• 結(jié)論與展望50-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 致謝58-60
• 附錄60

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