力竭運動及鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MuRF1、MAFbx及Pax7的變化及其機制研究
發(fā)布時間:2022-12-03 19:06
實驗?zāi)康?本文擬通過一次性力竭運動和鈍挫傷模型誘導(dǎo)Wistar大鼠骨骼肌損傷,通過檢測NF-κB、MuRF1、MAFbx、Pax7在力竭運動和鈍挫傷后即刻、24和48小時不同時相的變化,探討NF-κB、MuRF1、MAFbx、Pax7在骨骼肌損傷修復(fù)再生中的變化及其機制。研究方法:實驗選用Wistar純系清潔級6-8周齡雄性大鼠42只,隨機分為7組,每組各6只:安靜對照組(C)、力竭運動即刻組(E0)、力竭運動后24H組(E24)、力竭運動后48H組(E48)、鈍挫傷即刻組(DO)、鈍挫傷后24H組(D24)、鈍挫傷后48H組(D48)。安靜對照組取材:將大鼠腹腔注射麻醉,取下左側(cè)腓腸肌,分為三份,一份待測酶聯(lián)免疫ELISA,一份待測Western blot,另一份待測實時熒光定量PCR。運動組和鈍挫傷組取材:Wistar大鼠分別在力竭運動和鈍挫傷后即刻、24和48小時取材,取材步驟同上。研究結(jié)果:(1)MuRF1的實驗結(jié)果:與C組相比,E0組、E24組大鼠骨骼肌MuRF1蛋白表達顯著升高(p<0.05),E0組大鼠骨骼肌MuRF1mRNA表達水平顯著升高(p<0.05),E48組大鼠...
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號說明
前言
第一部分 文獻綜述
1 骨骼肌的損傷與修復(fù)
1.1 骨骼肌概述
1.2 骨骼肌的組織機構(gòu)及功能
1.3 骨骼肌損傷
1.3.1 骨骼肌損傷分類
1.3.2 骨骼肌損傷機制
1.4 骨骼肌損傷動物模型
1.4.1 骨骼肌損傷動物模型的建立
1.5 骨骼肌損傷的再修復(fù)
1.5.1 骨骼肌損傷的炎性反應(yīng)
1.5.2 骨骼肌損傷再修復(fù)的內(nèi)源周期
1.5.3 骨骼肌損傷再修復(fù)的分類
2 MuRF1、MAFbx在骨骼肌中的表達機制
2.1 骨骼肌萎縮分子的生物學機制
2.2 骨骼肌泛素蛋白酶解系統(tǒng)(Ups)
2.2.1 泛素蛋白酶解系統(tǒng)(Ups)與泛素連接酶E3
2.2.2 MuRF1與MAFbx的生物特性
2.3 NF-κB/MuRF1信號通路與骨骼肌損傷
2.3.1 NF-κB/MuRF1信號通路
2.3.2 NF-κB/MuRF1信號通路與骨骼肌損傷
3 肌衛(wèi)星細胞與骨骼肌損傷修復(fù)
3.1 肌衛(wèi)星細胞的發(fā)現(xiàn)與自我更新
3.2 衛(wèi)星細胞在肌肉損傷修復(fù)中的作用
3.3 骨骼肌衛(wèi)星細胞的特異性標記與鑒定--Pax7
3.4 骨骼肌衛(wèi)星細胞Pax7與骨骼肌損傷修復(fù)
第二部分 實驗部分
1 材料與方法
1.1 實驗主要儀器設(shè)備
1.2 主要實驗試劑
1.3 動物模型的建立
1.3.1 實驗動物和喂養(yǎng)
1.3.2 實驗動物分組
1.3.3 骨骼肌損傷方案
1.4 樣本取材與處理
1.4.1 樣本取材
1.4.2 組織樣本制備
1.5 指標測定與方法
1.5.1 骨骼肌組織總RNA的提取
1.5.2 RNA反轉(zhuǎn)錄
1.5.3 實時熒光定量(Real-Time PCR)
1.5.4 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Bloting,WB)
1.5.5 酶聯(lián)免疫法
1.6 統(tǒng)計學處理
2 實驗結(jié)果
2.1 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MuRF1mRNA的表達變化
2.2 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MAFbxmRNA的表達變化
2.3 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌Pax7mRNA的表達變化
2.4 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MuRF1蛋白含量的比較
2.5 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌NF-κB含量的比較
2.6 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌Pax7含量的比較
3 討論與分析
3.1 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌NF-κB/ MuRF1通路的影響
3.2 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌MuRF1和MAFbx的影響
3.3 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌Pax7的影響
4 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同抗萎縮運動模式對泛素蛋白酶體亞基及基因表達的影響[J]. 徐帥,李世昌,方幸. 南京體育學院學報(自然科學版). 2016(05)
[2]骨骼肌衛(wèi)星細胞的增殖分化及其影響因素[J]. 邢華醫(yī),周謀望. 中國康復(fù)醫(yī)學雜志. 2016(01)
[3]骨骼肌衛(wèi)星細胞的研究進展[J]. 張萍,馬月輝,焦淑清,關(guān)偉軍. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2015(13)
[4]運動對肌衛(wèi)星細胞的影響及其機制研究進展[J]. 邱烈峰. 信陽師范學院學報(自然科學版). 2015(03)
[5]肌肉萎縮盒F蛋白和肌肉特異性環(huán)指蛋白1對慢性腎臟病患者骨骼肌萎縮的調(diào)控機制[J]. 張月月,袁偉杰. 腎臟病與透析腎移植雜志. 2015(03)
[6]TWEAK/Fn14信號通路在骨骼肌代謝相關(guān)基因表達及能量代謝中作用研究進展[J]. 李慧閣,傅力. 中國運動醫(yī)學雜志. 2015(06)
[7]運動和制動大鼠腓腸肌內(nèi)p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表達變化[J]. 蘇艷紅,宿哲,張凱,袁乾坤,劉強,呂申,王昭輝,鄒偉. 生理學報. 2014(05)
[8]骨骼肌衛(wèi)星細胞自我更新的分子調(diào)節(jié)[J]. 熊慧,浦亞斌,馬月輝,扈清云,關(guān)偉軍,李向臣. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2014(05)
[9]不同運動方式對小鼠骨骼肌肌萎縮相關(guān)因子表達的影響[J]. 陳彩珍,盧健,季瀏. 沈陽體育學院學報. 2014(05)
[10]力竭運動及鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞及相關(guān)調(diào)節(jié)因子的影響[J]. 潘同斌,左偉,夏素文,張樂,朱超,焦寒凝. 中國運動醫(yī)學雜志. 2014(07)
博士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子NF-kB信號通路在胰腺炎發(fā)生中的機制研究[D]. 黃浩杰.第二軍醫(yī)大學 2012
[2]骨骼肌損傷與修復(fù)過程中炎癥反應(yīng)與肌衛(wèi)星細胞再生關(guān)系的研究[D]. 孫茹.東北師范大學 2009
碩士論文
[1]冬眠不同時期達烏爾黃鼠骨骼肌中NF-κB信號通路的變化及其作用的研究[D]. 龔令琛.西北大學 2016
[2]不同模式的低氧訓練引起的骨骼肌蛋白質(zhì)降解與NF-κB/MuRF1的關(guān)系研究[D]. 胡要娟.揚州大學 2016
[3]力竭運動與鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞體外增殖及Hes1/Jagged1/Pax7含量的影響[D]. 李娜.揚州大學 2016
[4]不同訓練模式對大鼠腓腸肌p-Akt和MuRF1表達的影響[D]. 宿哲.遼寧師范大學 2013
[5]失肌皮神經(jīng)損傷胸大肌部分移位重建屈肘術(shù)后供受肌內(nèi)MuRF1和MAFbx的表達變化[D]. 岳寧.遵義醫(yī)學院 2013
本文編號:3706802
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號說明
前言
第一部分 文獻綜述
1 骨骼肌的損傷與修復(fù)
1.1 骨骼肌概述
1.2 骨骼肌的組織機構(gòu)及功能
1.3 骨骼肌損傷
1.3.1 骨骼肌損傷分類
1.3.2 骨骼肌損傷機制
1.4 骨骼肌損傷動物模型
1.4.1 骨骼肌損傷動物模型的建立
1.5 骨骼肌損傷的再修復(fù)
1.5.1 骨骼肌損傷的炎性反應(yīng)
1.5.2 骨骼肌損傷再修復(fù)的內(nèi)源周期
1.5.3 骨骼肌損傷再修復(fù)的分類
2 MuRF1、MAFbx在骨骼肌中的表達機制
2.1 骨骼肌萎縮分子的生物學機制
2.2 骨骼肌泛素蛋白酶解系統(tǒng)(Ups)
2.2.1 泛素蛋白酶解系統(tǒng)(Ups)與泛素連接酶E3
2.2.2 MuRF1與MAFbx的生物特性
2.3 NF-κB/MuRF1信號通路與骨骼肌損傷
2.3.1 NF-κB/MuRF1信號通路
2.3.2 NF-κB/MuRF1信號通路與骨骼肌損傷
3 肌衛(wèi)星細胞與骨骼肌損傷修復(fù)
3.1 肌衛(wèi)星細胞的發(fā)現(xiàn)與自我更新
3.2 衛(wèi)星細胞在肌肉損傷修復(fù)中的作用
3.3 骨骼肌衛(wèi)星細胞的特異性標記與鑒定--Pax7
3.4 骨骼肌衛(wèi)星細胞Pax7與骨骼肌損傷修復(fù)
第二部分 實驗部分
1 材料與方法
1.1 實驗主要儀器設(shè)備
1.2 主要實驗試劑
1.3 動物模型的建立
1.3.1 實驗動物和喂養(yǎng)
1.3.2 實驗動物分組
1.3.3 骨骼肌損傷方案
1.4 樣本取材與處理
1.4.1 樣本取材
1.4.2 組織樣本制備
1.5 指標測定與方法
1.5.1 骨骼肌組織總RNA的提取
1.5.2 RNA反轉(zhuǎn)錄
1.5.3 實時熒光定量(Real-Time PCR)
1.5.4 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Bloting,WB)
1.5.5 酶聯(lián)免疫法
1.6 統(tǒng)計學處理
2 實驗結(jié)果
2.1 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MuRF1mRNA的表達變化
2.2 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MAFbxmRNA的表達變化
2.3 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌Pax7mRNA的表達變化
2.4 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌MuRF1蛋白含量的比較
2.5 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌NF-κB含量的比較
2.6 力竭運動和鈍挫傷各時相大鼠骨骼肌Pax7含量的比較
3 討論與分析
3.1 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌NF-κB/ MuRF1通路的影響
3.2 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌MuRF1和MAFbx的影響
3.3 力竭運動和鈍挫傷對各時相大鼠骨骼肌Pax7的影響
4 結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]不同抗萎縮運動模式對泛素蛋白酶體亞基及基因表達的影響[J]. 徐帥,李世昌,方幸. 南京體育學院學報(自然科學版). 2016(05)
[2]骨骼肌衛(wèi)星細胞的增殖分化及其影響因素[J]. 邢華醫(yī),周謀望. 中國康復(fù)醫(yī)學雜志. 2016(01)
[3]骨骼肌衛(wèi)星細胞的研究進展[J]. 張萍,馬月輝,焦淑清,關(guān)偉軍. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2015(13)
[4]運動對肌衛(wèi)星細胞的影響及其機制研究進展[J]. 邱烈峰. 信陽師范學院學報(自然科學版). 2015(03)
[5]肌肉萎縮盒F蛋白和肌肉特異性環(huán)指蛋白1對慢性腎臟病患者骨骼肌萎縮的調(diào)控機制[J]. 張月月,袁偉杰. 腎臟病與透析腎移植雜志. 2015(03)
[6]TWEAK/Fn14信號通路在骨骼肌代謝相關(guān)基因表達及能量代謝中作用研究進展[J]. 李慧閣,傅力. 中國運動醫(yī)學雜志. 2015(06)
[7]運動和制動大鼠腓腸肌內(nèi)p-Akt/MuRF1/FoxO1的蛋白表達變化[J]. 蘇艷紅,宿哲,張凱,袁乾坤,劉強,呂申,王昭輝,鄒偉. 生理學報. 2014(05)
[8]骨骼肌衛(wèi)星細胞自我更新的分子調(diào)節(jié)[J]. 熊慧,浦亞斌,馬月輝,扈清云,關(guān)偉軍,李向臣. 生物醫(yī)學工程學雜志. 2014(05)
[9]不同運動方式對小鼠骨骼肌肌萎縮相關(guān)因子表達的影響[J]. 陳彩珍,盧健,季瀏. 沈陽體育學院學報. 2014(05)
[10]力竭運動及鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞及相關(guān)調(diào)節(jié)因子的影響[J]. 潘同斌,左偉,夏素文,張樂,朱超,焦寒凝. 中國運動醫(yī)學雜志. 2014(07)
博士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子NF-kB信號通路在胰腺炎發(fā)生中的機制研究[D]. 黃浩杰.第二軍醫(yī)大學 2012
[2]骨骼肌損傷與修復(fù)過程中炎癥反應(yīng)與肌衛(wèi)星細胞再生關(guān)系的研究[D]. 孫茹.東北師范大學 2009
碩士論文
[1]冬眠不同時期達烏爾黃鼠骨骼肌中NF-κB信號通路的變化及其作用的研究[D]. 龔令琛.西北大學 2016
[2]不同模式的低氧訓練引起的骨骼肌蛋白質(zhì)降解與NF-κB/MuRF1的關(guān)系研究[D]. 胡要娟.揚州大學 2016
[3]力竭運動與鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞體外增殖及Hes1/Jagged1/Pax7含量的影響[D]. 李娜.揚州大學 2016
[4]不同訓練模式對大鼠腓腸肌p-Akt和MuRF1表達的影響[D]. 宿哲.遼寧師范大學 2013
[5]失肌皮神經(jīng)損傷胸大肌部分移位重建屈肘術(shù)后供受肌內(nèi)MuRF1和MAFbx的表達變化[D]. 岳寧.遵義醫(yī)學院 2013
本文編號:3706802
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