研究目的:本研究采用鐵皮石斛多糖對小鼠進(jìn)行藥物干預(yù),通過研究小鼠在遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)下T-bet和GATA-3、IFN-γ和IL-4的含量來探究鐵皮石斛多糖對機(jī)體免疫功能的影響,同時(shí)觀察T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4的變化,研究Th1/Th2的平衡以及鐵皮石斛多糖對免疫平衡的影響,為運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練提供參考依據(jù)。研究方法:本實(shí)驗(yàn)選用山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的8周齡雄性健康小鼠96只,體重36.21±4.21克。隨機(jī)分為4組:生理鹽水組（NS組）、鐵皮石斛多糖組（DOP組）、生理鹽水+運(yùn)動(dòng)組（NS+運(yùn)動(dòng)組）、鐵皮石斛多糖+運(yùn)動(dòng)組（DOP+運(yùn)動(dòng)組）。其中每組24只,在此基礎(chǔ)上每組再分為:二周組、四周組、六周組,每組8只。采用嚙齒類專用飼料喂養(yǎng),自由飲食、飲水。持室溫在22±2℃,相對濕度40%-60%,自然光照,每日換墊料一次。正式訓(xùn)練時(shí)每周游泳6天,休息一天,每天游1次。第一周時(shí)從10分鐘開始,周末遞增至30分鐘。第二至第六周每周遞增30分鐘。運(yùn)動(dòng)條件:水深約小鼠體長3倍,水溫30℃±2℃。NS組、DOP組,每天同一時(shí)間分別給予同一劑量的生理鹽水、鐵皮石斛多糖灌胃,自由飲食。N... 

【文章來源】：山東師范大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

-bet擴(kuò)增曲線和熔解曲線

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位323.2.2.3組織取材結(jié)果脾臟3.2.2.4QPCR熔解曲線及擴(kuò)增曲線圖2T-bet擴(kuò)增曲線和熔解曲線圖3GATA-3擴(kuò)增曲線和熔解曲線3.2.3ELISA檢測步驟參照試劑盒，按每個(gè)指標(biāo)對應(yīng)試劑盒說明書操作。檢測之前請將所有的試劑、樣本平衡至室溫。一、準(zhǔn)備好所有需要的試劑及工作濃度標(biāo)準(zhǔn)品。二、浸泡酶標(biāo)板：加入300μl1×洗液靜置浸泡30秒。棄掉洗液之后，在吸水紙上將微孔板拍干。洗板完成之后，請立即使用微孔板，不要讓微孔板干燥。

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位353.2.4.2IFN-γELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖4IFN-γELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線3.2.4.3IL-4ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖5IL-4ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線3.3數(shù)據(jù)處理3.3.1T-bet和GATA-3表達(dá)量的分析一、將各個(gè)樣本中的目標(biāo)基因即T-bet和GATA-3與內(nèi)參基因即β-actin相減，得出△Ct。二、將樣品中目標(biāo)基因的△Ct與對照樣品的△Ct相減，得出差值為△△Ct。三、利用公式：相對含量=2-△△Ct，求出各個(gè)樣本中目標(biāo)基因的相對含量。四、將上面求出的目標(biāo)基因的相對含量在Excel表格中進(jìn)行整理，并畫出各組的相應(yīng)柱形圖。使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，對脾臟中T-bet和GATA-3mRNA表達(dá)的相對含量，即2-△△Ct的值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其中不同組之間的兩兩比較采用單因素方差分析，若P＜0.05，為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3054044