研究目的:骨血管分布密集且廣泛,在骨的生長發(fā)育中,骨血管不僅提供必需的氧和營養(yǎng)物質(zhì),而且通過調(diào)節(jié)各種骨細(xì)胞和血管細(xì)胞間的相互作用,為骨形成提供必要的刺激信號。局部血管的變化也與許多骨疾病的發(fā)展密切相關(guān),如骨質(zhì)疏松、骨壞死、骨關(guān)節(jié)炎、佝僂病、缺血性壞死、骨腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移等。骨血管與骨形成相伴發(fā)生,骨細(xì)胞可分泌促血管生成因子來觸發(fā)信號引起不同細(xì)胞（包括形成血管的內(nèi)皮細(xì)胞以及軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞等）釋放相關(guān)細(xì)胞因子進(jìn)一步促進(jìn)血管生成。與此同時,骨血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放的因子對軟骨細(xì)胞及成骨細(xì)胞也起到一定的作用。近年來有研究報道,腎連蛋白（nephronectin,NPNT）是由成骨細(xì)胞分泌的重要的血管生成因子,并且在調(diào)節(jié)骨代謝過程中也有著重要的作用。因此,本研究探究機(jī)械牽張成骨細(xì)胞對NPNT的調(diào)控作用,為進(jìn)一步探究運動是否可以通過成骨細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子調(diào)控骨微環(huán)境血管生成提供理論基礎(chǔ),也為骨質(zhì)疏松等相關(guān)骨疾病的治療提供新思路。研究方法:1.將培養(yǎng)的MC3T3-E1成骨細(xì)胞分為4組（C組,S1組,S2組和S3組）,以1×10⁵/ml接種到BioFlex 6孔板,細(xì)胞長至... 

【文章來源】：上海體育學(xué)院上海市

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

機(jī)械牽張應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細(xì)胞NPNT蛋白表達(dá)情況的影響

2h4h01234S**NPNTmRNA相對表達(dá)量圖 3 機(jī)械牽張應(yīng)力刺激對原代成骨細(xì)胞 ALP、RUNX2、Osterix 和 NPNT mRNA表達(dá)的影響（*：P<0.05，**：P<0.01）5.2.2ALP 染色結(jié)果本研究檢測了 3%牽張幅度，4h，連續(xù) 7 天隔天干預(yù)的機(jī)械牽張應(yīng)力刺激對成骨細(xì)胞 ALP 分泌情況的影響。如圖 4 所示，ALP 陽性細(xì)胞呈藍(lán)紫色，并且顏色越深面積大代表 ALP 分泌越多，由圖 4 所知，機(jī)械牽張應(yīng)力刺激組相對對照組的藍(lán)色細(xì)胞顏色深、面積大，ALP 分泌多，說明 3%牽張幅度，4h，連續(xù) 7 天隔天干預(yù)的機(jī)械牽張應(yīng)力刺激可以促進(jìn)成骨細(xì)胞 ALP 的分泌。

圖 5 機(jī)械牽張應(yīng)力刺激對原代成骨細(xì)胞 NPNT 蛋白表達(dá)情況的影響（a.Westernblot 代表性圖；b.NPNT 蛋白表達(dá)量統(tǒng)計分析）5.2.4 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果本研究了對原代成骨細(xì)胞進(jìn)行 3%牽張幅度，4h，連續(xù) 7 天隔天干預(yù)的機(jī)械牽張應(yīng)力刺激后，采用免疫組織化學(xué)染色檢測了成骨細(xì)胞 NPNT 的表達(dá)情況。如圖6所示，機(jī)械牽張應(yīng)力刺激組的染色結(jié)果較對照組棕紅色顏色深，說明NPNT表達(dá)的量多。提示，3%牽張幅度，4h，連續(xù) 7 天隔天干預(yù)的機(jī)械牽張應(yīng)力刺激可促進(jìn) NPNT 的表達(dá)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3034531