目的:探討4周有氧運(yùn)動(dòng)介導(dǎo)apelin對(duì)小鼠骨骼肌UCP3的影響,以明確運(yùn)動(dòng)影響骨骼肌生理作用的分子機(jī)制。方法:C57BL/6J野生小鼠40只,隨機(jī)分為生理鹽水安靜組（SC）、生理鹽水運(yùn)動(dòng)組（SE）、F13A安靜組（FC）和F13A運(yùn)動(dòng)組（FE）,每組10只。小鼠連續(xù)4周腹腔注射F13A（0.2μmol/kg/day）或生理鹽水（15μl/kg/day）。有氧運(yùn)動(dòng)組采取坡度5o、速度15m/min的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),60min/天,6天/周;2周后測(cè)定最大攝氧量,調(diào)整跑速為20m/min,有氧運(yùn)動(dòng)共持續(xù)4周。干預(yù)期間監(jiān)控小鼠攝食量和體重,并在運(yùn)動(dòng)的第4周對(duì)小鼠24h靜息代謝的指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。最后一次運(yùn)動(dòng)后48h取小鼠血漿、小腿三頭肌,酶聯(lián)免疫法測(cè)定血漿apelin含量,Western Blot測(cè)定骨骼肌apelin、APJ、AMPKα、p-AMPKα(Thr¹⁷²)、PGC-1α和UCP3蛋白表達(dá)。結(jié)果:1)與SC組相比,FC和SE組小鼠骨骼肌apelin蛋白表達(dá)顯著性增加（P<0.05）;2)FE組與FC組相比,骨骼肌apelin（P<0.01）、APJ（P&... 

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Apelin試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線

36圖2 蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線3. 配樣蛋白樣品以 20μg 蛋白含量為一次上樣量，根據(jù)測(cè)得的蛋白樣品濃度計(jì)算樣品配置體積(見(jiàn)表 4)。使用美國(guó) life technology 的產(chǎn)品進(jìn)行樣品配置后震蕩混勻，放入 70℃橫溫水箱中孵育 10min，晾干后轉(zhuǎn)入 4℃冰箱保存待用。表4 Western blot樣品配置試劑 體積 (μl)蛋白樣品 20μg/蛋白濃度=XBoltTM LSD Sample Buffer (4×) 2.5BoltTM ReducingAgent (10×) 1超純水 6.5-X總體積 104.

APJ、AMPKα、p-AMPKα(Thr172)、PGC-1α及 UCP3 蛋白的表達(dá)量。通過(guò)對(duì)上述指標(biāo)的整合分析，討論 4 周有氧運(yùn)動(dòng)是否能介導(dǎo) apelin 對(duì)小鼠骨骼肌 UCP3 表達(dá)及其生理作用產(chǎn)生影響。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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