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有氧運(yùn)動對抑郁模型大鼠腦學(xué)習(xí)記憶能力及海馬GAP-43的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-08-07 08:09
【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)觀察有氧運(yùn)動影響SD大鼠抑郁模型空間學(xué)習(xí)記憶能力和海馬GAP-43基因表達(dá)的情況,研究有氧運(yùn)動影響抑郁大鼠腦的機(jī)理。方法:選用成年3月齡雄性SPF級SD大鼠共54只,大鼠購進(jìn)適應(yīng)性喂養(yǎng)(1周)后,隨機(jī)分成6組(n=9):對對照組(對應(yīng)C組)、運(yùn)動預(yù)處理組(對應(yīng)EC組)、模型1組(對應(yīng)M1組)、抑郁中運(yùn)動組(對應(yīng)ce組)、抑郁后運(yùn)動組(對應(yīng)CE組)和模型2組(M2組)。除C組外,其余組均采用慢性輕度不可預(yù)見性的應(yīng)激抑郁(CUMS)動物模型。EC組于CUMS抑郁造模前進(jìn)行4周有氧運(yùn)動干預(yù),ce組于CUMS抑郁造模過程中進(jìn)行4周有氧運(yùn)動干預(yù),CE組于CUMS(慢性輕度不可預(yù)見性的應(yīng)激抑郁)抑郁造模后展開4周有氧運(yùn)動干預(yù),M2組進(jìn)行CUMS抑郁造模后無需運(yùn)動干預(yù),正常喂養(yǎng)4周,M1組4周正常喂養(yǎng)之后展開4周CUMS抑郁造模。本研究使用Morris水迷宮系統(tǒng)訓(xùn)練,同時(shí)對各組大鼠定位航行與空間探索能力進(jìn)行檢測。動物建模實(shí)驗(yàn)?zāi)┪蔡幩来笫?此處使用斷頭法,然后將大鼠海馬剝離,轉(zhuǎn)移到液氮進(jìn)行保存,使用石蠟包埋。動物建模時(shí)對大鼠一般狀態(tài)進(jìn)行仔細(xì)記錄;依托尼氏染色對大鼠海馬神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行觀察,同時(shí)進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)確定造模成功與否;對海馬GAP-43基因m RNA和蛋白的表達(dá)檢測方面本研究主要使用了免疫熒光、Real time PCR以及Westren-Blotting技術(shù)。應(yīng)用SPSS19.0軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)果:(1)大鼠一般狀態(tài):C組大鼠在實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)為正常狀態(tài);M1組大鼠在實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)為顯著抑郁體征,有著較大的精神波動,容易刺激,食欲不好,無法快速行動,有著更少的活動,毛色變得枯黃,同時(shí)出現(xiàn)鼠毛脫落等情況;對比C組,ce組大鼠與C組狀態(tài)較為相似;對比M1組,M2組大鼠比M1組有著更高的狀態(tài);CE狀態(tài)、EC組狀態(tài)和ce組相似;CE、EC、ce組相比,ce組狀態(tài)較好。(2)糖水消耗實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:M1、EC、M2、CE組與C組相比,對糖水消耗量的顯著下降、白水消耗量顯著增加(P0.05)。ce組的糖水消耗量、糖水消耗比值上顯著高于M1和M2組(P0.05)、白水消耗量顯著低于M1和M2組(P0.05),與C組相比均無顯著性差異(P0.05);(3)全腦5-HT結(jié)果:M1、M2和EC組的全腦5-HT表達(dá)量無顯著性差異(P0.05),但顯著低于C組(P0.01);ce和CE組的全腦5-HT表達(dá)顯著高于M1、M2和EC組(P0.05),與C組無顯著性差異(P0.05);(4)Morris水迷宮結(jié)果:逃避潛伏期用時(shí),第1天和第2天各組大鼠無顯著性差異(P0.05);第3天M1與M2組相比,其用時(shí)無顯著性差異(P0.05),但M1、M2均顯著多于C、CE、ce組(P0.01),EC組顯著多于C和CE組(P0.05);第4天M1、M2組的逃避潛伏期用時(shí)上顯著多于C、CE、ce組大鼠(P0.05),EC組用時(shí)顯著高于CE組(P0.05);第5天M1、M2組在逃避潛伏期用時(shí)上顯著多于C、CE、ce組大鼠(P0.05),EC組用時(shí)顯著高于C組(P0.05);第6天結(jié)果顯示,M1、M2組在逃避潛伏期用時(shí)時(shí)間上明顯多于C、CE、ce組(P0.05),EC組用時(shí)顯著多于C、CE、ce組(P0.05)。穿越平臺次數(shù)結(jié)果:第7天大鼠定位航行實(shí)驗(yàn)在次數(shù)上存在明顯差異(P0.05)。M1、M2組在穿越平臺次數(shù)上顯著低于C、CE、ce組大鼠(P0.01),EC組穿越次數(shù)顯著少于C、CE、ce組(P0.01);以上結(jié)果表明在經(jīng)過4周CUMS刺激后,M1、M2組大鼠在第3至6天表現(xiàn)出學(xué)習(xí)能力的下降,在第7天的空間探索實(shí)驗(yàn)中,M1、M2組大鼠表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶能力的下降,同時(shí)M1、M2組在逃避潛伏期用時(shí)多于ce、CE組,穿越平臺次數(shù)低于ce、CE組,表明在抑郁癥的發(fā)病中、后期進(jìn)行運(yùn)動干預(yù)能夠改善抑郁模型大鼠的空間學(xué)習(xí)能力。(5)尼氏染色:進(jìn)行尼氏染色相應(yīng)結(jié)果如下:C組大鼠有著正常的神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)。而EC組大鼠海馬神經(jīng)元的排布與組織形態(tài)結(jié)構(gòu)都發(fā)生了變化,神經(jīng)元排布散亂,數(shù)量出現(xiàn)明顯變化。與C組相比,CE組大鼠海馬神經(jīng)元的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)與C組相似,但神經(jīng)元排布散亂,數(shù)量明顯減少,同時(shí)出現(xiàn)部分細(xì)胞固縮;與C組相比,ce組神經(jīng)元排列緊致,神經(jīng)元數(shù)量與C組相似;與C組相比,M1組神經(jīng)元排布與組織形態(tài)結(jié)構(gòu)都發(fā)生了變化,表現(xiàn)在神經(jīng)元排布更為散亂,且出現(xiàn)數(shù)量減少,部分細(xì)胞固縮的情況,數(shù)量少,有著較大的細(xì)胞間距,一些細(xì)胞核出現(xiàn)了固縮的情況,較為模糊,胞體和樹突中尼氏體有著較淺的顏色,表現(xiàn)出明顯的抑郁特征變化。(6)大鼠海馬GAP-43蛋白及m RNA表達(dá):大鼠海馬GAP-43蛋白及m RNA表達(dá)ce組表達(dá)最高,M1組次之,M2組最低,且低于M1、ce組(P0.05)。結(jié)論:結(jié)論:(1)抑郁可導(dǎo)致大鼠海馬組織結(jié)構(gòu)損傷、空間學(xué)習(xí)記憶能力減弱,從而造成學(xué)習(xí)記憶能力受損,運(yùn)動干預(yù)是修復(fù)抑郁模型大鼠學(xué)習(xí)能力的有效途徑;(2)有氧運(yùn)動促進(jìn)了抑郁模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的形成和保持,這種作用很可能與GAP-43的表達(dá)上升有關(guān);(3)在抑郁發(fā)生的前、中、后三個(gè)階段進(jìn)行有氧運(yùn)動干預(yù),均能夠改善抑郁情況的發(fā)生,且在中、后階段進(jìn)行有氧運(yùn)動干預(yù)效果更為明顯。
【學(xué)位授予單位】:成都體育學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:G804.2
【圖文】:

糖水,大鼠,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,試驗(yàn)檢測


偏好試驗(yàn)檢測結(jié)果實(shí)驗(yàn)后,對各組大鼠進(jìn)行糖水實(shí)驗(yàn),以驗(yàn)證造模試驗(yàn)成。表 10 各組大鼠糖水實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別 糖水偏好值C 0.79±0.13M1 0.52±0.13●●◆◆EC 0.59±0.10●ce 0.73±0.13★◆M2 0.50±0.16 ◆◆CE 0.49±0.19 相比,P<0.01,用●●表示,P < 0.05,用●表示;與 EC 組相比,P<0.01,用★★ 組相比,P<0.01,用▲▲表示,P < 0.05,用▲表示;與 ce 組相比,P<0.01,用1 組相比,P<0.01,用■■表示,P < 0.05,用■表示。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果,大鼠,濃度


測試 5-HT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行取材后,對各組大鼠全腦進(jìn)行 ELISA 測試,見表表 11 ELISA 測試 5-HT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別 濃度C 197.58±8.10M1 140.32±6.95●●◆◆EC 143.15±9.27●●ce 191.72±6.33★★M2 141.37±4.41 CE 187.41±9.24★★相比,P<0.01,用●●表示,P < 0.05,用●表示;與 EC 組相比,P<0.01,用★組相比,P<0.01,用▲▲表示,P < 0.05,用▲表示;與 ce 組相比,P<0.01, 組相比,P<0.01,用■■表示,P < 0.05,用■表示。

第四,第三,單位


表 12 定位航行平均潛伏期(單位:秒)( x±SD)C M1 EC ce M2 CE第 1 天 70.10±9.48 81.36±7.60 78.64±15.52 70.40±15.57 82.87±7.25 70.58±18.第 2 天 66.26±8.86●●74.57±7.03 70.27±12.17 66.62±11.30 75.60±6.42 65.27±8.1第 3 天 32.72±4.87●●★★52.86±6.12 45.48±11.63 36.43±7.50 51.36±8.88 34.13±10.第 4 天 26.29±4.32●●★★41.38±7.31 36.93±13.67 26.33±8.11 40.87±13.40 27.22±4.2第 5 天 18.58±4.56●●★★▲▲◆31.04±7.71 27.70±9.41 21.00±12.31 33.43±5.46 22.40±7.8第 6 天 10.28±3.03●●★★▲▲◆◆■17.67±3.55 6.82±2.87 9.91±4.03* 17.19±8.82 11.28±3.6注:與第一天相比,P<0.01,用●●表示,P < 0.05,用●表示;與第二天相比,P<0.01,用★★表示,P < 0用★表示;與第三天相比,P<0.01,用▲▲表示,P < 0.05,用▲表示;與第四天相比,P<0.01,用◆◆表示,P < 用◆表示;與第五天相比,P<0.01,用■■表示,P < 0.05,用■表示。

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