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有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合牡蠣肽對小鼠Lewis肺癌生長的抑制作用

發(fā)布時(shí)間:2020-07-20 09:34
【摘要】:目的:(1)探討有氧運(yùn)動(dòng)和牡蠣肽(OP)補(bǔ)充對荷瘤小鼠肺癌生長的抑制作用與交互作用。(2)通過分析細(xì)胞免疫功能及腫瘤組織中MicroRNAs的變化,探討OP補(bǔ)充和有氧運(yùn)動(dòng)對荷瘤小鼠肺癌生長抑制的可能原因。方法:選用清潔級雄性C57BL/6J小鼠48只,培養(yǎng)小鼠LL/2細(xì)胞株,調(diào)整細(xì)胞濃度至6× 106/ml,接種于小鼠右前肢腋窩皮下,每只0.2ml,全程嚴(yán)格無菌操作,全過程于40min內(nèi)完成。同時(shí)建立小鼠Lewis肺癌模型,并隨機(jī)分為荷瘤對照組(C)、荷瘤牡蠣肽干預(yù)組(OP)、荷瘤有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)組(E)和荷瘤牡蠣肽+有氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)組(OPE)共計(jì)4組,每組12只。C組不運(yùn)動(dòng)(依照標(biāo)準(zhǔn)飼料規(guī)則飼養(yǎng));E組每周6次60min無負(fù)重的游泳運(yùn)動(dòng);OP組在每次訓(xùn)練結(jié)束30min后灌服OP(劑量為1.8g/Kg),每周6次;每周進(jìn)行一次荷瘤小鼠體重和腫瘤體積的測量。5周后進(jìn)行取材,并檢測各組荷瘤小鼠的腫瘤重量,血液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞、CD4+CD25+CD127-Treg細(xì)胞數(shù)量的百分比,腫瘤組織的凋亡率、壞死率及其miR-21、miR-218的表達(dá)量,同時(shí)觀察肺表面結(jié)節(jié)數(shù)和腫瘤組織的結(jié)構(gòu)。結(jié)果:(1)各組荷瘤小鼠皮下腫瘤抑制率為:OP組26%、E組16%、OPE組24%;各組荷瘤小鼠轉(zhuǎn)移抑制率為:OP組60%、E組46%、OPE組54%。C、OP、E和OPE組進(jìn)行雙因素方差分析后發(fā)現(xiàn),有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充對腫瘤重量及肺表面結(jié)節(jié)數(shù)的下降交互作用均不顯著(P0.05);OP補(bǔ)充使腫瘤重量極顯著下降(P0.01),使肺表面結(jié)節(jié)數(shù)顯著下降(P0.05);有氧運(yùn)動(dòng)使腫瘤重量及肺表面結(jié)節(jié)數(shù)下降,但差異不具有顯著性(P0.05)。(2)C、OP、E和OPE組進(jìn)行雙因素方差分析后發(fā)現(xiàn),有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充對肺癌細(xì)胞壞死率及凋亡率的升高交互作用均不顯著(P0.05);OP補(bǔ)充使肺癌細(xì)胞壞死率及凋亡率顯著升高(P0.05),有氧運(yùn)動(dòng)使肺癌細(xì)胞壞死率升高,但差異不具有顯著性(P0.05),但有氧運(yùn)動(dòng)可使肺癌細(xì)胞凋亡率極顯著性的升高(P0.01)。(3)C、OP、E和OPE組進(jìn)過雙因素方差分析后發(fā)現(xiàn),OP補(bǔ)充和有氧運(yùn)動(dòng)對荷瘤小鼠血液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CD8+比值的升高無顯著性的交互作用(P0.05),OP補(bǔ)充可使荷瘤小鼠血液中CD3+、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞數(shù)量、CD4+/CD8+比值顯著性長高(P0.05)及CD4+細(xì)胞數(shù)量極顯著性升高(P0.01),有氧運(yùn)動(dòng)可使荷瘤小鼠血液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CD8+比值升高,但無顯著性差異(P0.05)。OP補(bǔ)充和有氧運(yùn)動(dòng)對荷瘤小鼠血液中CD4+CD25+CD127-Treg細(xì)胞數(shù)量的下降無顯著性的交互作用(P0.05),OP補(bǔ)充可使荷瘤小鼠血液中CD4+CD25+CD127-Treg細(xì)胞極數(shù)量顯著性下降(P0.01),有氧運(yùn)動(dòng)可使荷瘤小鼠血液中CD4+CD25+CD127-Treg細(xì)胞數(shù)量下降,但無顯著性差異(P0.05)。(4)C、OP、E和OPE組進(jìn)行雙因素方差分析后發(fā)現(xiàn),有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充對荷瘤小鼠肺癌組織中miR-218表達(dá)量的升高具有顯著的交互作用(P0.05),進(jìn)行簡單效應(yīng)分析后發(fā)現(xiàn):與C組相比,OP組的miR-218表達(dá)量具有極顯著性升高(P=0.002,P0.01),與E組相比,OPE組的miR-218表達(dá)量無顯著性差異(P=0.808,P0.05);與C組相比,E組的miR-218表達(dá)量無顯著性差異(P=0.058,P0.05),與OP組相比,OPE組的miR-218表達(dá)量無顯著性差異(P=0.335,P0.05)。有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充對荷瘤小鼠肺癌組織中miR-21表達(dá)量的下降無顯著的交互作用(P0.05),有氧運(yùn)動(dòng)可使荷瘤小鼠肺癌組織中miR-21表達(dá)量顯著性下降(P0.005),OP補(bǔ)充可使荷瘤小鼠肺癌組織中miR-21表達(dá)量下降,但無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:(1)本研究所復(fù)制的小鼠Lewis肺癌模型是成功的,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充在一定程度上抑制了荷瘤小鼠肺癌的生長,OP補(bǔ)充對荷瘤小鼠肺癌的生長產(chǎn)生顯著的抑制作用,有氧運(yùn)動(dòng)也在一定程度上抑制荷瘤小鼠肺癌的生長。(2)有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合OP補(bǔ)充在一定程度上提高了荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫功能,提高肺癌細(xì)胞的凋亡率,OP補(bǔ)充顯著提高了荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫功能,誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡,有氧運(yùn)動(dòng)顯著提高了肺癌細(xì)胞的凋亡率,對肺癌產(chǎn)生抑制作用。(3)OP補(bǔ)充使荷瘤小鼠腫瘤組織中miR-218的表達(dá)量顯著上調(diào),有氧運(yùn)動(dòng)使miR-21的表達(dá)量顯著下調(diào),從而加速肺癌細(xì)胞凋亡,有效抑制腫瘤的生長。
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:G804.2
【圖文】:

體重變化,起始體,雙因素方差分析,體重


邐表9各組小鼠每周的體重(g)邐逡逑組別邐起始體重邐第1周邐第2周邐第3周邐第4周邐第5周逡逑C邐21.2邋土2.0邐22.1±2.0邐23.7士邋1.7邐25.6土邋1.9邐28.8土2.6邐29.9±2.9逡逑OP邐21.3±1.8邐22.1邋土邋1.8邐22.5±1.8邐24.7士2.5邐26.9±2.9邐27.8±3.1#逡逑E邐21.4士2.3邐22.3±2.6邐23.0±2.4邐25.1邋士2.6邐28.8士2.9邐29.4士邋2.6逡逑OPE邐21.0邋士邋1.4邐21.8邋士邋1.5邐22.2士邋1.1邐24.6±0.8邐27.6土邋1.1邐27.7邋士邋1.5逡逑注:C、OP、E、OPE組進(jìn)行雙因素方差分析,#,P<0.05,邋##,邋PC0.01。逡逑邐表10各組小鼠每周體重雙因素方差分析表邐逡逑因素邐起始體重邐第1周邐第2周邐第3周邐第4周邐第5周逡逑OP邐P=0.969邐P=0.862邐P=0.058邐P=0.087邐P=0.739邐P=0.016逡逑Exercise邐P=0.89邐P=0.687邐P=0.255邐P=0.160邐P=0.101邐P=0.386逡逑ExercisexQP邐P-0.685邐P=0.758邐P=0.349邐P=0.324邐P=0.838邐P=0.447逡逑

變化圖,小鼠,變化圖,持續(xù)上漲


由表9、11及圖1、2可知,每周各組小鼠體重持續(xù)上漲,其中C組增長最多,E組逡逑增長次之,OPE組較E組增長少,增長最少的是OP組;到第五周,經(jīng)雙因素方差分析得逡逑出,OP的補(bǔ)充使荷瘤小鼠的體重顯著降低(PC0.05);各組小鼠腫瘤體積隨時(shí)間的增加逡逑而增大,在第四周和第五周最后的兩周時(shí)間里腫瘤體積生長速度大幅度增大,對應(yīng)在差不逡逑

腫瘤,肺癌,小鼠


圖3四組小鼠Lewis肺癌腫瘤圖逡逑

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