【摘要】：研究目的:觀察有氧運動對小鼠體重、血脂、脂肪細胞形態(tài)數(shù)量的影響,以及有氧運動對肥胖相關(guān)基因Lipin1 pre-mRNA選擇性剪接和剪接因子SFRS10的影響。進一步探討有氧運動、Lipin1 pre-mRNA選擇性剪接及剪接因子SFRS10三者之間的內(nèi)在聯(lián)系。研究方法:將40只C57BL/6小鼠適應性飼養(yǎng)一周后,隨機分為正常組(C,n=20)和肥胖組(O,n=20),喂養(yǎng)4周后,將正常組隨機分為正常對照組(C,n=10)和正常+運動組(CE,n=10),肥胖組隨機分為肥胖對照組(O,n=10)和肥胖+運動組(OE,n=10)。C組和CE組給予正常飲食,O組和OE組給予高脂飲食。CE和OE組進行8周的跑臺訓練。采用全自動生化分析儀檢測小鼠相關(guān)血脂指標。通過HE染色方法檢測小鼠脂肪組織中的脂質(zhì)堆積和細胞形態(tài)變化。通過PCR及qPCR檢測有氧運動對小鼠肝臟組織中Lipin1含量、Lipin1剪接變異體表達量以及剪接因子SFRS10的mRNA表達水平。研究結(jié)果:(1)在第4周末,O組及OE組小鼠體重上漲且顯著高于C組。在第8周末,CE組與OE組小鼠體重均出現(xiàn)不同程度的下降,但OE組小鼠體重仍高于C組。在第12周末,O組體重繼續(xù)上升,OE組與CE小鼠體重繼續(xù)降低且都低于C組,并且與C組有顯著性差異。(2)在O組小鼠中,TG、TC、LDL-C均表達較高,且與C組比有顯著性差異(p0.05),HDL-C在肥胖組小鼠表達低且與C組比較有顯著性差異(p0.05)。在12周末,OE組小鼠TG、TC、LDL-C均出現(xiàn)降低且與O組小鼠比較有顯著性差異,HDL-C水平較O組小鼠出現(xiàn)顯著性升高(p0.05)。(3)有氧運動影響肥胖小鼠脂肪細胞形態(tài)和數(shù)量,與C組小鼠相比,O組小鼠脂肪細胞形態(tài)大且數(shù)量少(p0.05),12周實驗結(jié)束后,與C組相比,CE組小鼠脂肪細胞聚集明顯且數(shù)量顯著增加(p0.05)。OE組與O組相比,脂肪細胞形態(tài)縮小且數(shù)量增加(p0.05)。(4)Lipin1和Lipin1β含量在O組小鼠高表達,與C組小鼠相比有顯著性差異(p0.05),8周運動后,二者水平均在OE組降低且與O組比有顯著性差異(p0.05)。Lipin1α在O組低表達。運動后,無論是在CE組還是OE組,Lipin1α水平均出現(xiàn)顯著性升高(p0.05)。(5)SFRS10在O組表達下調(diào)。有氧運動后無論是在CE組還是OE組小鼠,SFRS10水平均出現(xiàn)顯著升高(p0.05)。結(jié)論:(1)有氧運動顯著降低肥胖小鼠體重,改善血脂異常,改變小鼠脂肪細胞形態(tài)和數(shù)量。(2)有氧運動可以調(diào)節(jié)Lipin1基因的表達,并調(diào)節(jié)Lipin1 pre-mRNA的選擇性剪接,使其轉(zhuǎn)錄本表達發(fā)生變化:Lipin1α表達增加,Lipin1β的表達減少。因此脂肪生成減少,肥胖癥發(fā)生率有效降低。(3)有氧運動通過增加剪接因子SFRS10表達,從而降低肥胖相關(guān)基因Lipin1mRNA的表達,導致Lipin1α表達增加而Lipin1β表達減少,從而減少肥胖癥的發(fā)生。
【圖文】：

文獻綜述序列。圖 2.1 及表 2.2 表示的是 Lipin1 的不同亞型、Lipin2 和 Lipin3 在小鼠達分布模式。在 CSAKI L S 等人的結(jié)果中可以看出，Lipin1 在脂肪組織及表達較高，在肝臟組織及其他組織中也有表達，Lipin1 的表達異常會誘導發(fā)謝相關(guān)疾�。籐ipin2 主要在腦及肝臟中高表達，表達異常會產(chǎn)生 Majeed Lipin3 主要在小腸組織中高表達，在骨組織中也有少量表達，但是目前對 L相關(guān)研究較少，異常表達帶來的也影響尚不清楚。

人 Lipin1 基因位于 2p25.1，編碼 890 個氨基酸；小鼠 Lipin1 基因位于體12 7.9cM處，編碼924個氨基酸。對比不同的基因物質(zhì)序列，結(jié)果表明物的蛋白質(zhì)序列相似性為 88.18%-96.43%。表明無論是在人還是在動物體內(nèi)是非常保守的。人和小鼠的基因結(jié)構(gòu)域如圖 2.2①所示，人和小鼠的 Lipin1 基因都含保守的氨基末端（N-LIP，1-108）結(jié)構(gòu)域和羧基末端（C-LIP，人：624-658-864）結(jié)構(gòu)域。在 153-158 位置，是人和小鼠核定位信號區(qū)（Nuclearsignal，NLS）；在人的 C 末端 678-682 及小鼠 712-716 處，有一段 DXDX可與 Mg2+結(jié)合，通過催化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上磷脂酸（PA）的去磷酸化，參與甘油和磷脂的合成；此外，，在人 Lipin1 689-693 及小鼠 723-727 處，有一小段列，為轉(zhuǎn)錄因子相互作用區(qū)，該區(qū)域可與 PPARα相互作用，共激活 PGCPPARγ。此外，Lipin1 還參與多種細胞活動，如脂肪細胞分化，脂肪酸與脂質(zhì)代謝異常有密切關(guān)系。
【學位授予單位】：山西大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：G804.2

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