【摘要】：實驗?zāi)康模禾接懜咧攀痴T導(dǎo)雄性SD大鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡與炎癥因子TNF-α、IL-6的關(guān)系,并初步揭示有氧運(yùn)動對雄性高脂膳食大鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡與炎癥反應(yīng)的干預(yù)作用。實驗方法：將48只健康的雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠隨機(jī)分為4組：正常對照組(C)、高脂膳食組(HF)、正常運(yùn)動組(CE)、高脂運(yùn)動組(HE),每組12只；C組和CE組給予普通飼料喂養(yǎng),HF組和HE組給予高脂、高熱量飼料喂養(yǎng)。實驗結(jié)束后,各組大鼠數(shù)量為：C組8只,HF組11只,CE組10只,HE組11只。運(yùn)動方案為10周60min無負(fù)重游泳運(yùn)動,每周6天。實驗結(jié)束后檢測大鼠血清中甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)；測量大鼠體重、體長、脂肪重量,計算Lee's指數(shù)及脂體比；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6); RT-PCR檢測大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6以及睪丸中TNFR. IL-6R mRNA的表達(dá)量；HE染色觀察睪丸組織形態(tài)學(xué)的變化；原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測大鼠睪丸組織細(xì)胞凋亡情況。實驗結(jié)果：1.10周后CE組與C組相比,體重呈極顯著降低,Lee's指數(shù)、TG顯著降低,HDL顯著升高,睪周脂、脂體比、TC、LD L無顯著性差異。HF組與C組相比,體重、睪周脂、脂體比、TC、LDL均呈極顯著升高,TG, HDL、Lee's指數(shù)均無明顯差異。HE組與HF組相比,體重、睪周脂、脂體比、TG、TC、LDL均極顯著降低,Lee's指數(shù)、HDL無顯著性差異。2.CE組與C組相比,大鼠血清中TNF-α、IL-6水平呈顯著降低。HF組與c組相比,大鼠血清中TNF-α水平顯著升高,IL-6水平有所升高,但無顯著性差異。HE組與HF組相比,]NF-α、IL-6水平均呈極顯著降低。通過單因素方差分析可知,高脂膳食可引起大鼠血清中TNF-α與IL-6水平增加,而有氧運(yùn)動可降低血清TNF-α與IL-6水平。3.經(jīng)HE染色光鏡下觀察大鼠睪丸組織形態(tài),發(fā)現(xiàn)C組生精小管內(nèi)各級生精細(xì)胞發(fā)育正常,排列整齊,官腔未見明顯狹窄及擴(kuò)張,管腔內(nèi)可見大量成熟精子。CE組睪丸生精小管內(nèi)間隙變寬,成熟精子分布均勻。HF組睪丸組織生精小管管壁變薄,生精細(xì)胞數(shù)量明顯減少且排列紊亂,成熟精子數(shù)量顯著減少,各級生精細(xì)胞出現(xiàn)脫落現(xiàn)象,個別大鼠生精細(xì)胞與基底膜之間出現(xiàn)脫離。HE組生精小管內(nèi)各級生精細(xì)胞基本發(fā)育正常,偶可見細(xì)胞脫落現(xiàn)象,生精小管間可見疏松的間質(zhì)組織。4.CE組與C組相比,大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6的mRNA水平有所升高,但無顯著性差異；HE組與HF組相比,睪周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平顯著降低。通過單因素方差分析可知,高脂膳食使大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平升高,引起睪周脂出現(xiàn)炎癥反應(yīng),而有氧運(yùn)動可以適當(dāng)降低TNF-α、IL-6 mRNA水平,減輕炎癥的影響。5.CE組與C組相比,大鼠睪丸組織中TNFR、IL-6R的mRNA水平有所升高,但無顯著性差異；HE組與HF組相比,睪丸組織中TNFR、IL-6RmRNA水平顯著降低。通過單因素方差分析可知,高脂膳食使大鼠睪丸組織中TNFR、IL-6RmRNA水平顯著升高,引起睪丸組織出現(xiàn)炎癥反應(yīng),而有氧運(yùn)動可以適當(dāng)降低TNFR、IL-6RmRNA水平,減輕炎癥的影響。6.大鼠睪丸組織中凋亡細(xì)胞情況：與C組相比,CE組睪丸組織中生殖細(xì)胞凋亡率有所升高,但無明顯差異,HF組和HE組睪丸組織中生殖細(xì)胞凋亡率極顯著升高。HE組與HF組相比,睪丸組織中生殖細(xì)胞凋亡率極顯著降低。通過單因素方差分析可知,高脂膳食可能引起睪丸組織的炎癥反應(yīng),從而導(dǎo)致睪丸組織中生殖細(xì)胞凋亡增加,而有氧運(yùn)動可以緩解這一情況。結(jié)論：1.高脂膳食可引發(fā)SD雄性大鼠脂代謝紊亂,血清中TNF-α、IL-6蛋白表達(dá)及睪脂中的mRNA水平與Lee's指數(shù)及血脂四項具有相關(guān)性,而有氧運(yùn)動能改善這一情況。2.高脂膳食可以使SD雄性大鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,而且能夠使得精子凋亡明顯增多,通過有氧運(yùn)動能使這一情況得到改善。3.高脂膳食可引起大鼠血清TNF-α、IL-6蛋白表達(dá)及其睪周脂mRNA和睪丸組織中TNFR、IL-6RmRNA水平的升高,其均與凋亡率密切相關(guān),而有氧運(yùn)動可以對其產(chǎn)生抑制作用,這也可能是有氧運(yùn)動干預(yù)肥胖炎癥大鼠生殖細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：G804.2

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