基因治療在治愈遺傳性疾病和獲得性疾病方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值,其原理是把功能性基因遞送到靶細(xì)胞產(chǎn)生治療性蛋白或沉默致病性蛋白達(dá)到治療疾病的目的。生物安全性好和轉(zhuǎn)染效率高的基因載體是基因治療獲得臨床應(yīng)用的關(guān)鍵�；蜉d體分為病毒載體和非病毒載體,聚陽離子作為一類重要的非病毒載體能有效負(fù)載和遞送基因至細(xì)胞內(nèi)特定的部位。其中,聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯（PDMAEMA）是聚陽離子基因載體研究的優(yōu)良模型。眾多研究集中于PDMAEMA的不同結(jié)構(gòu)對遞送DNA性能的影響,例如接枝和嵌段共聚物被廣泛研究。但將兩者進(jìn)行對比性、系統(tǒng)性研究卻少有報(bào)導(dǎo)。本論文采用具有基因協(xié)同遞送作用的PVP作為起始鏈段,通過可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移自由基聚合（RAFT）和原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）兩種可控的自由基聚合法制備了基于PVP和PDMAEMA的組成相同的接枝和嵌段兩種結(jié)構(gòu)的聚合物。研究表明接枝聚合物（PgP）能更有效地壓縮pDNA,形成的納米粒比嵌段聚合物（PbP）與pDNA形成的納米粒更緊實(shí)、更穩(wěn)定而且表面電荷更高。在低的N/P條件下,PgP在HepG2細(xì)胞上的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率不僅比PbP高而且明顯高于通用轉(zhuǎn)染試... 

【文章來源】：天津大學(xué)天津市211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 基因治療
        2.1.1 基因治療的原理
        2.1.2 基因治療的發(fā)展
        2.1.3 基因治療的應(yīng)用
    2.2 非病毒性基因載體
        2.2.1 脂質(zhì)體
        2.2.2 陽離子聚合物
        2.2.3 合成陽離子聚合物
    2.3 基因傳遞過程中的障礙
        2.3.1 二元復(fù)合/壓縮效果
        2.3.2 細(xì)胞間遞送的障礙
        2.3.3 細(xì)胞內(nèi)的過程
        2.3.4 細(xì)胞毒性，生物相容性和生物可降解性
        2.3.5 特異性靶向目標(biāo)細(xì)胞
    2.4 研究思路和主要內(nèi)容
第三章 同組異構(gòu)的二元復(fù)合物的制備與表征
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)原料
        3.2.2 PVP均聚物的合成
        3.2.3 接枝共聚物PVP-g-PDMAEMA（PgP）的制備
        3.2.4 嵌段共聚物PVP-b-PDMAEMA（PbP）的制備
        3.2.5 二元復(fù)合物的制備
        3.2.6 聚合物及二元復(fù)合物的理化性質(zhì)測試
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 PVP、PgP和PbP合成與表征
        3.3.2 聚合物的質(zhì)子緩沖能力測試和穩(wěn)定性測試
        3.3.3 二元復(fù)合物的制備與表征
    3.4 本章結(jié)論
第四章 二元復(fù)合物的體外細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)原料
        4.2.2 體外細(xì)胞毒性檢測
        4.2.3 體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        4.2.4 復(fù)合物的細(xì)胞攝取
        4.2.5 復(fù)合物在細(xì)胞內(nèi)的分布
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 體外細(xì)胞毒性檢測
        4.3.2 體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        4.3.3 二元復(fù)合物的細(xì)胞攝取
        4.3.4 內(nèi)涵體逃逸和復(fù)合物在細(xì)胞內(nèi)的分布
    4.4 本章結(jié)論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]A kind of modified bovine serum albumin with great potential for applying in gene delivery[J]. Ning Zhang,Chong-Xi Wang,Jin-Hao Liu,Jin-Feng Xing,An-Jie Dong.  Chinese Chemical Letters. 2013(07)
[2]葉酸受體在腫瘤靶向診斷和治療中的應(yīng)用[J]. 黃英男,吳昊,沈錫中.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(01)
[3]膠原蛋白結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上的設(shè)計(jì)與合成[J]. 杜春玲,姚菊明.  生物工程學(xué)報(bào). 2007(02)



本文編號：3629708