本文關鍵詞：應用定量蛋白組學技術篩選不同生存期食管癌患者血清差異蛋白，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景 食管癌具有極強的“中國特色”,仍是我國與腫瘤相關死亡的主要原因,呈明顯地域性分布。預后極差,5年生存率只有15%左右。目前,食管癌臨床預后評價仍以TNM分期為標準。然而,大規(guī)模流行病學調查時發(fā)現(xiàn)一些腫瘤組織分期與預后不一致的病例,即屬于同一TNM分期患者具有不同的預后。這些提示,單純使用形態(tài)學改變作為判斷預后的指標存在一定的局限性。因此,尋找與食管癌預后相關預后評價分子指標具有重要的理論意義。 目的 篩選與食管癌生存期相關的差異表達蛋白,為指導臨床治療和判斷預后風險提供參考。 方法 1.收集食管癌患者的術前血清標本及臨床病理資料,并跟蹤隨訪,明確患者術后生存時間,隨訪時間截止到2013年10月。根據(jù)生存期進行分組：生存期3年組；3年≤生存期≤5年組；生存期5年組。每組隨機篩選10例血清樣品,同時收集正常對照組血清10例。 2.去除血清中的高豐度蛋白質,進行8標同位素相對和絕對定量標記(iTRAQ),之后聯(lián)合液相色譜串聯(lián)質譜(LC-MS/MS)進行分析得到多肽片段定量信息。 3.多肽質譜分析結果經(jīng)Mascot2.2軟件查庫及Proteome Discovererl.3軟件分析,得到蛋白的定性信息以及其在各組的相對定量。 4.四組樣品進行單因素方差分析,采用生物信息學對顯著差異表達蛋白進行分類注釋。通過EMBI-EBI蛋白質數(shù)據(jù)庫獲取詳細蛋白質信息,篩選出與生存期相關的候選蛋白。 結果 1.在食管癌不同生存期患者血清中經(jīng)質譜分析查庫搜索共鑒定出556種蛋白,具有明顯表達差異的蛋白253種(P0.05) 2.鑒定的556種蛋白分別參與18種生物學過程：蛋白代謝、刺激反應、分子轉運、細胞轉化等；參與17種細胞組成,如：細胞外基質、細胞膜、細胞質、細胞器、細胞核等；共有14種分子功能,包括蛋白結合、金屬離子結合、酶活性調節(jié)、核苷酸結合等。 3.以正常對照組為參照,在食管癌患者血清中有52種蛋白與食管癌生存期呈正相關,如載脂蛋白D、a-2巨球蛋白隨生存期延長其表達明顯上調；與生存期呈負相關的蛋白有48種,如血管緊張肽原、碳酸酐酶Ⅱ隨生存期延長其表達明顯下降。 結論 本研究提示應用iTRAQ技術尋找食管癌血清腫瘤標記物具有較好的應用前景,血管緊張肽原、碳酸酐酶Ⅱ、載脂蛋白D、a-2巨球蛋白有可能作為食管癌判斷預后風險的生物標記。
【關鍵詞】：食管癌 定量蛋白組學 iTRAQ LC-MS/MS
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R473.73
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-17
• 結果17-22
• 討論22-30
• 小結30
• 今后研究方向30-31
• 參考文獻31-37
• 綜述：iTRAQ技術在消化系統(tǒng)腫瘤中的應用37-48
• 參考文獻44-48
• 附錄48-56
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況56-57
• 致謝57-58
• 個人簡歷58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 薛城敬,于欽鳳,肖偉;肺癌患者胸腔積液中α_2-巨球蛋白含量的測定及其臨床意義[J];河北醫(yī)學;2003年07期

2 馮笑山;王立東;單探幽;郭濤;李吉林;范宗民;焦新英;常智慧;高社干;韓晶;宋昕;申秋;樊慧;王能超;李韶華;高珊珊;何欣;郭軍輝;劉寶池;;食管癌淋巴結轉移的蛋白質組學[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2007年03期

3 王林纖;戴勇;涂植光;;iTRAQ標記技術與差異蛋白質組學的生物標志物研究[J];生命的化學;2010年01期

4 張娟;卜旺雨;齊義軍;;食管鱗癌的蛋白質組學[J];中國生物化學與分子生物學報;2012年12期

5 覃慧嬋;柳廣南;蘇紅;張建全;傅鈺雁;;iTRAQ聯(lián)合LC-MS/MS技術在肺腺癌血漿生物標志物篩選中的應用[J];山東醫(yī)藥;2013年20期

6 李慎秋,賀勤;載脂蛋白D在皮膚惡性黑素瘤中的水平檢測及臨床意義[J];中國皮膚性病學雜志;2005年03期

7 陳萬青;鄭榮壽;張思維;趙平;;2003～2007年中國癌癥發(fā)病分析[J];中國腫瘤;2012年03期

8 張合林,平育敏,杜喜群,白世祥,何清波;應用Cox模型分析影響食管癌切除術后的預后因素[J];中華腫瘤雜志;1999年01期

9 任興軍;譚小林;楊成虎;李小瓊;馮峰;胡瓊英;丁銀環(huán);戴天陽;王開正;;血清低分子量差異蛋白質組在食管癌診斷和分期中的作用研究[J];中外婦兒健康;2011年06期

10 張欽樂;楊小麗;李剛;何曉;臧寧;胡艷玲;張學榮;何敏;;基于質譜鑒定的肝癌標志物的血清iTRAQ分析[J];腫瘤;2011年07期

  本文關鍵詞：應用定量蛋白組學技術篩選不同生存期食管癌患者血清差異蛋白，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：267457