本文選題：RNA干擾 + 囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體　； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年11期

【摘要】：目的構(gòu)建含靶向囊泡谷氨轉(zhuǎn)運(yùn)體3(Vglut 3)的特異性RNA干擾序列的1型單純皰疹病毒載體,并觀察其經(jīng)坐骨神經(jīng)接種后緩解小鼠觸誘發(fā)痛的作用。方法首先構(gòu)建攜帶Vglut3特異性短發(fā)卡RNA(sh RNA)的重組1型單純皰疹病毒載體。將重組載體通過(guò)坐骨神經(jīng)接種,檢測(cè)其在小鼠觸誘發(fā)痛模型中的鎮(zhèn)痛效果。分別用von Frey絲和Hargreaves'實(shí)驗(yàn)測(cè)試小鼠的機(jī)械性觸誘發(fā)痛和熱痛敏,通過(guò)免疫組織化學(xué)和免疫印跡法評(píng)估背根神經(jīng)節(jié)中VGLUT3的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建了重組1型單純皰疹病毒載體HSV-1-shvglut3。經(jīng)坐骨神經(jīng)接種后,該載體可將Vglut3特異性sh RNA逆行運(yùn)輸至背根神經(jīng)節(jié)。觸誘發(fā)性疼痛模型小鼠接種HSV-1-shvglut3載體2周后,背根神經(jīng)節(jié)中VGLUT3表達(dá)下調(diào),小鼠的機(jī)械性縮爪閾值回升至大致基礎(chǔ)水平。這種鎮(zhèn)痛效應(yīng)持續(xù)超過(guò)兩個(gè)星期,未出現(xiàn)明顯的系統(tǒng)副作用,且小鼠熱痛閾沒(méi)有明顯變化。結(jié)論表達(dá)于背根神經(jīng)節(jié)中的Vglut3是一個(gè)針對(duì)觸誘發(fā)痛極具前景的干擾靶點(diǎn)。我們構(gòu)建的HSV-1-shvglut3載體通過(guò)外周接種,對(duì)觸誘發(fā)痛有特異、安全、高效、持久的鎮(zhèn)痛作用。
[Abstract]:Objective to construct a herpes simplex virus type 1 vector containing a specific RNA interference sequence targeting vesicular glutamine transporter (3(Vglut 3) and to observe the effect of herpes simplex virus (HSV 1) inoculated with sciatic nerve on relieving the tactile pain in mice. Methods Recombinant herpes simplex virus type 1 vector carrying Vglut3 specific short hairpin RNA(sh was constructed. The recombinant vector was inoculated with sciatic nerve to detect the analgesic effect of the recombinant vector in the mouse model of touch-induced pain. The expression of VGLUT3 in dorsal root ganglion (DRG) was evaluated by immunohistochemistry and immunoblotting, respectively, by using von Frey wire and Hargreaves' test. Results the recombinant herpes simplex virus (HSV-1-shvglut3) vector was successfully constructed. After sciatic nerve inoculation, Vglut3 specific sh RNA could be transported retrograde to dorsal root ganglion. The expression of VGLUT3 in dorsal root ganglion was down-regulated and the mechanical claw threshold increased to the basic level 2 weeks after inoculation with HSV-1-shvglut3 carrier. The analgesic effect lasted for more than two weeks without obvious systemic side effects and no significant changes in thermal pain threshold in mice. Conclusion Vglut3 expressed in dorsal root ganglion is a promising target for tactile pain. The HSV-1-shvglut3 vector we constructed has a specific, safe, efficient and lasting analgesic effect on Touch induced pain through peripheral inoculation.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院麻醉科;中南民族大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院國(guó)家民族事務(wù)委員會(huì)認(rèn)知科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室膜離子通道醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;武漢大學(xué)中南醫(yī)院麻醉科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科;
【基金】：Supported by National Natural Science Foundation of China(81050023,81271234)~~
【分類號(hào)】：R402

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本文編號(hào)：1858471