本文選題：鮑曼不動(dòng)桿菌　切入點(diǎn)：碳青霉烯酶　出處：《青島大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的1、了解青島市兩三甲醫(yī)院鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥情況及分布特征,指導(dǎo)臨床合理用藥。2、探討鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制。3、比較與分析院內(nèi)及院間主要克隆株流行情況;分析菌株的同源性。方法1、收集兩醫(yī)院2013年7月至2014年7月期間145株鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株(A院78株;B院67株);2、采用紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer,K-B法)對(duì)所收集的菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;3、采用聚合酶鏈反應(yīng)(Ploymerase Chain Reaction,PCR)對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌在基因水平上檢測(cè)碳青霉烯酶的編碼基因、外膜蛋白car O基因及外排泵系統(tǒng)Ade ABC、Ade DE、Ade IJK、Ade FGH的主要結(jié)構(gòu)基因和MATE家族abe M基因,分析耐藥株所產(chǎn)生的主要碳青霉烯酶和外排泵的流行狀況;4、對(duì)隨機(jī)從碳青霉烯耐藥組中抽取的30株鮑曼不動(dòng)桿菌和敏感組的17株鮑曼不動(dòng)桿菌,用超聲破碎及高速離心法提取外膜蛋白并用聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析并比較不同菌株在外膜蛋白水平上的表達(dá)差異。5、應(yīng)用腸桿菌科基因間一致重復(fù)序列聚合酶鏈反應(yīng)(ERIC-PCR)對(duì)所有菌株進(jìn)行DNA分型及同源性分析。結(jié)果1、所有菌株大部分來自痰標(biāo)本,主要分離于ICU和呼吸內(nèi)科。A院78株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)臨床常用的16種抗菌藥物普遍耐藥,對(duì)頭孢哌酮舒巴坦耐藥率最低(3.85%)其次是米諾環(huán)素(16.67%),氨芐西林舒巴坦(73.08%),對(duì)其他抗菌藥物的耐藥率均超過85%;B院67株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用的23種抗菌藥物普遍耐藥,對(duì)米諾環(huán)素和替加環(huán)素均不耐藥,對(duì)阿米卡星、左氧氟沙星、頭孢哌酮舒巴坦的耐藥率依次為23.88%、38.81%、64.18%,對(duì)其他抗菌藥物的耐藥率均超過89%。兩院所有菌株對(duì)大部分抗菌藥物的耐藥情況有差異,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而對(duì)多重耐藥株來說對(duì)大部分抗菌藥物的耐藥情況在兩院間沒有差異;兩院ICU與非ICU科室間對(duì)大部分抗菌藥物的耐藥情況有差異,但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、兩院所有菌株中均攜帶OXA-51、abe M基因,均未檢測(cè)到OXA-24、SIM-1、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、ade D基因。兩院菌株OXA-23基因攜帶率分別為75.64%(59/78),50.75%(34/67)相比有顯著差異(χ2=9.711,P0.05);A院有3株攜帶OXA-58基因,B院沒有檢測(cè)到此基因。兩院ade B、ade G、ade J的攜帶率分別為96.15%(75"78)和97.01%(65"67)、79.49%(62"78)和92.54%(62"67)、88.46%(69"78)和100%(67"67)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示:ade B(χ2=0.030,P0.05)基因在兩院分離株的攜帶率上沒有差異,ade G(χ2=4.956,P0.05)基因和ade J(χ2=6.380,P0.05)基因在兩院分離株的攜帶率上有差異。兩院car O基因陽性率分別為89.74%(70/78)和86.57%(58/67),統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示(χ2=0.351,P=0.5530.05)差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、SDS-PAGE顯示30株碳青霉烯耐藥組與敏感組相比在大約47KDa(20株)、37KDa(25株)和29KDa(23株)處有不同程度的缺失或減弱;17株敏感組各有16株、13株、13株在相應(yīng)條帶處表達(dá)。4、145株菌株可分為8個(gè)基因型,其中A型71株和E型37株為主要流行株;A院主要流行A型(46.15%)和E型(41.03%)菌株,B院主要流行A型(52.24%)和C型(17.91%)菌株。結(jié)論1、青島市兩三甲醫(yī)院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥情況嚴(yán)重且存在泛耐藥株在院內(nèi)及院間大肆流行。2、外膜蛋白car O基因在耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌中廣泛存在,產(chǎn)OXA-23、OXA-51型碳青霉烯酶、主動(dòng)外排系統(tǒng)Ade ABC、Ade IJK、Ade FGH和Abe M的高表達(dá)、外膜蛋白表達(dá)的缺失或減弱是兩院鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗生素的重要機(jī)制。3、兩院主要流行株、大部分藥物的耐藥情況及某些耐藥基因攜帶率存在顯著差異。
[Abstract]:Objective 1 . To investigate the drug resistance and distribution characteristics of acinetobacter baumanii in two hospitals of Qingdao , and to guide clinical rational drug use . .涓ら櫌鎵，

本文編號(hào)：1691694