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實時熒光環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增檢測無乳鏈球菌方法的建立與評價

發(fā)布時間:2018-02-24 02:18

  本文關(guān)鍵詞: 無乳鏈球菌 實時熒光 聚合酶鏈反應(yīng) 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增 出處:《中華醫(yī)院感染學(xué)雜志》2016年10期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的建立實時熒光環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增(Rea-LAMP)快速檢測無乳鏈球菌的方法,為無乳鏈球菌的快速檢測提供一種新的方法。方法針對無乳鏈球菌纖連蛋白fbsB基因的6個區(qū)域設(shè)計6條特異性引物,利用鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)恒溫反應(yīng)60min,通過熒光信號實時檢測無乳鏈球菌。結(jié)果研究的反應(yīng)體系在使用引物1時,擴增效果最好;在10株相關(guān)菌株的檢測中,除無乳鏈球菌出現(xiàn)很好的陽性外,其余菌株均為陰性;本研究檢測無乳鏈球菌DNA的靈敏度可達到300pg/μl。結(jié)論 Rea-LAMP檢測無乳鏈球菌的特異性強、穩(wěn)定性高、操作簡便快速,具有較大的推廣應(yīng)用前景,可用于無乳鏈球菌的快速檢測。
[Abstract]:Objective to establish a method for rapid detection of streptococcus lactobacillus by real-time fluorescent loop mediated isothermal amplification of Streptococcus lactis. To provide a new method for rapid detection of Streptococcus lactis. Methods six specific primers were designed for the six regions of fbsB gene of Streptococcus lactis. Streptococcus lactis was detected by fluorescence signal for 60 mins by isothermal reaction with chain replacement DNA polymerase BST DNA polymerase. The results showed that the reaction system was the best when the primers were used at 1:00. In this study, the sensitivity of detection of streptococcus lactobacillus DNA was 300pg / 渭 l.Conclusion the detection of streptococcus lactis by Rea-LAMP has strong specificity, high stability and simple and rapid operation. It can be used for rapid detection of streptococcus lactis.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗科;廣州醫(yī)科大學(xué)金域檢驗學(xué)院;
【基金】:國家衛(wèi)計委醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展研究中心基金資助項目(W2015JG07) 廣州市衛(wèi)生局一般引導(dǎo)基金資助項目(20151A011083)
【分類號】:R440

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本文編號:1528496

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