干擾素（IFNs）是一種由免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,目前已知的干擾素有3類,IFN-γ是II型干擾素家族中唯一的成員,因其突出的免疫調(diào)節(jié)能力,又被稱作免疫干擾素。雖然IFN-γ在先天和獲得性免疫應(yīng)答、腫瘤監(jiān)測(cè)以及對(duì)抗病毒和細(xì)菌感染中發(fā)揮著重要作用,但I(xiàn)FN-γ的過(guò)度表達(dá)也會(huì)導(dǎo)致很多疾病的發(fā)生。應(yīng)用抗IFN-γ抗體中和體內(nèi)過(guò)多的IFN-γ,被認(rèn)為是一種有效的治療手段。然而,鼠源抗體或是人鼠嵌合抗體用于人體后,會(huì)引起機(jī)體不同程度的免疫應(yīng)答,不僅影響藥效,而且會(huì)產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。因此,免疫原性較低的全人源抗體藥越來(lái)越受到研究人員和醫(yī)療工作者的重視。利用轉(zhuǎn)基因小鼠制備全人源抗體是一種成熟且可靠的方法,但由于其漫長(zhǎng)的研發(fā)周期和巨額的資金投入,限制了該方法的廣泛使用。于是許多研究人員將目光放在了噬菌體展示技術(shù)上,該技術(shù)是一種從大量變異體中選出目的多肽或蛋白的體外篩選技術(shù)。可利用人免疫球蛋白序列構(gòu)建全人源抗體庫(kù),再以多肽或蛋白為標(biāo)靶,篩選出全人源抗體。本研究以實(shí)驗(yàn)室自有質(zhì)粒pET28a-IFN-γ為模板擴(kuò)增出人IFN-γ基因全長(zhǎng)片段,經(jīng)DNA酶隨機(jī)酶切得到50bp²00bp的基因片段... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

絲狀噬菌體的衣殼蛋白和主要兩種展示方式[5]

生物淘選[14]

第1章引言4在雞胚絨毛膜尿囊膜的培養(yǎng)液中加入流感病毒，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了一類抗病毒物質(zhì)，將其命名為干擾素（interferon，INF）[16]。根據(jù)基因、結(jié)構(gòu)、受體復(fù)合物的不同，可將IFN分為3種類型：即I型干擾素，II型干擾素和III型干擾素。I型干擾素是干擾素家族中最大的類型，包括IFN-α、β、ω、ε等十余種亞型，其中IFN-α又有十余種亞型；Ⅲ型干擾素（IFN－λ）由IFN－λ1（IL－29）、IFN－λ2（IL－28A）和IFN－λ3（IL－28B）組成；而II型干擾素只有IFN-γ一種。1.2.2IFN-γ的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)編碼IFN-γ的基因位于12號(hào)染色體，由3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子組成。單體IFN-γ是一種由143個(gè)氨基酸組成的糖蛋白，分子量為17kD左右，由6個(gè)α螺旋和一段Ｃ端展開(kāi)的未折疊序列組成，不含β折疊，無(wú)生物活性。具有生物活性的IFN-γ是由兩個(gè)相同的單體IFN-γ組成的非共價(jià)連接的同源二聚體。兩個(gè)單體以螺旋、反向平行的方式組合，形成一個(gè)緊湊的球狀分子，具有對(duì)稱的雙重對(duì)稱軸[17-18]。IFN-γ對(duì)酸不穩(wěn)定，在pH小于2.0時(shí)極易被破壞，在56℃條件下，30min被破壞，各種蛋白酶可以將其滅活。圖1.3IFN-γ二聚體分子結(jié)構(gòu)圖[19]1.2.3IFN-γ的信號(hào)通路

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]通過(guò)IFN-γ影響腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制膽囊癌血管發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 孫濤,張明宇,程穎,葛春林.  山東醫(yī)藥. 2011(48)



本文編號(hào)：3394879