微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)產(chǎn)生的微滴尺寸較小,在較低濃度的低溫保護劑條件下即可實現(xiàn)玻璃化。本文采用微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)對Hep G2細胞進行玻璃化保存,研究保護劑加載過程、噴射過程、接收過程及玻璃化/復溫過程對細胞造成的損傷程度,并通過降低保護劑中Me₂SO濃度、添加適量海藻糖來優(yōu)化保護劑配方。結(jié)果表明,微滴噴射玻璃化保存各過程對細胞均有損傷,保護劑加載過程、噴射過程、玻璃化及復溫過程對細胞造成的損傷較大,薄片接收過程對細胞造成的損傷小。另外,隨著保護劑中Me₂SO濃度的降低,低溫保存后的細胞活性明顯降低;保護劑濃度相同時,玻璃化保存效果較慢速冷凍效果好;適量的海藻糖能夠起到增強低溫保存效果的作用,過量則起到降低作用;以5%Me₂SO+0. 3 mol/L海藻糖作為低溫保護劑玻璃化保存細胞時,細胞存活率達(92. 42±0. 95)%,24 h貼壁率達到(95. 64±1. 03)%,微滴噴射玻璃化效果最好。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與設(shè)備
    1.2 微滴噴射玻璃化保存系統(tǒng)
    1.3 細胞冷凍方法
    1.4 細胞活性判斷方法
        1.4.1 臺盼藍染色計算細胞存活率
        1.4.2 24 h貼壁率
    1.5 微滴噴射玻璃化各過程的損傷分析
    1.6 低溫保護劑的優(yōu)化
2 結(jié)果與討論
    2.1 噴射各過程對細胞造成的損傷
    2.2 降低Me2SO濃度對細胞活性的影響
    2.3 添加海藻糖對細胞活性的影響
3 總結(jié)與展望



本文編號：3786606