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相分離聯(lián)合層析去除類人膠原蛋白中的內(nèi)毒素

發(fā)布時(shí)間:2019-04-26 14:54
【摘要】:研究類人膠原蛋白(HLC)中內(nèi)毒素的去除方法,為規(guī)模化制備醫(yī)用生物材料提供參考。采用Triton X-114雙水相分離法作為內(nèi)毒素去除工藝的第1步,親和層析法作為工藝的第2步,二者偶聯(lián)操作從類人膠原蛋白中除去內(nèi)毒素,并對(duì)除去內(nèi)毒素后的HLC進(jìn)行了理化性能檢測(cè)。結(jié)果表明:采用Triton X-114雙水相分離法,在蛋白質(zhì)量濃度2.06 mg/m L,作用溫度44.71℃,作用時(shí)間3 h,溶液pH值為7時(shí)雙水相分離系數(shù)K=9.58,蛋白中內(nèi)毒素含量由10 000—25 000 EU/mg下降為1.5—2.0 EU/mg,蛋白回收率為95.6%;偶聯(lián)了多聚賴氨酸親和配基的親和層析后,HLC中內(nèi)毒素含量由1.5—2.0 EU/mg降至0.025—0.25 EU/mg,蛋白回收率可達(dá)81.9%;2步操作均不會(huì)使蛋白發(fā)生相對(duì)分子質(zhì)量及化學(xué)結(jié)構(gòu)的改變。此工藝操作簡(jiǎn)便,可顯著降低生產(chǎn)成本。
[Abstract]:......
【作者單位】: 西北大學(xué)化工學(xué)院;陜西省生物材料與發(fā)酵工程研究中心;
【基金】:西安市教育廳專項(xiàng)基金(12JK0449)
【分類號(hào)】:TQ028;TQ936.2

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本文編號(hào):2466165

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