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中藥五倍子促進(jìn)釉質(zhì)齲再礦化作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究及作用機(jī)制初探

發(fā)布時(shí)間:2017-08-03 02:01

  本文關(guān)鍵詞:中藥五倍子促進(jìn)釉質(zhì)齲再礦化作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究及作用機(jī)制初探


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【摘要】:齲病是一種獨(dú)特的牙體硬組織疾病,因牙釉質(zhì)沒(méi)有細(xì)胞和血管,不能像其它組織一樣通過(guò)細(xì)胞機(jī)制進(jìn)行自我修復(fù),必須通過(guò)一個(gè)物理化學(xué)過(guò)程(再礦化)才能修復(fù)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)中藥五倍子具有促進(jìn)早期牙釉質(zhì)齲再礦化的作用。目的:本課題擬在前期研究基礎(chǔ)上,運(yùn)用中藥現(xiàn)代化研究有效成分與整體藥效并重的新思路,按照國(guó)際齲病學(xué)研究領(lǐng)域?qū)π滦头例x制劑效能的評(píng)估體系中經(jīng)典的齲病動(dòng)物模型,深入評(píng)估五倍子抗齲有效成分在口腔環(huán)境中促進(jìn)釉質(zhì)齲再礦化作用;并對(duì)其促進(jìn)再礦化作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。旨在促進(jìn)研制具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的中藥防齲制劑,用于人類口腔疾病——齲病的群體防治,具有重要意義。方法:1.中藥五倍子促進(jìn)釉質(zhì)齲再礦化作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究:構(gòu)建經(jīng)典的大鼠齲病模型,用17 d日齡的SPF-SD大鼠40只,雌雄各半,飼以Keyes 2000#致齲飼料+10%蔗糖水溶液,每周記錄體重。通過(guò)服用抗生素抑制口腔內(nèi)源性鏈球菌后,給大鼠口腔局部接種遠(yuǎn)緣鏈球菌(S.sobrinus 6715)。之后隨機(jī)平均分為4組:去離子蒸餾水組(陰性對(duì)照);1000 ppm NaF組(陽(yáng)性對(duì)照);4000 ppm GCE組(五倍子粗提取物,富含鞣質(zhì));4000 ppm GA組(五倍子最終提取物,沒(méi)食子酸)。分別對(duì)各組大鼠口腔局部應(yīng)用藥物干預(yù)5周,2次/天。最后處死大鼠取上下頜骨。在體視顯微鏡下用Keyes齲齒評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)磨牙齲壞程度做初步評(píng)估;為進(jìn)一步得到更精確的再礦化證據(jù),用高分辨率的micro CT對(duì)磨牙區(qū)域進(jìn)行掃描分析,計(jì)算第一磨牙殘余釉質(zhì)體積、釉質(zhì)礦物密度。最后做組間對(duì)比,評(píng)價(jià)效果。2.中藥五倍子有效成分與Ca~(2+)絡(luò)合作用實(shí)驗(yàn):五倍子有效成分GCE、GA分別與CaCl_2溶液混合反應(yīng),采用紫外可見(jiàn)分光光度法分別檢測(cè)二者與Ca~(2+)形成的絡(luò)合物,計(jì)算絡(luò)合反應(yīng)平衡常數(shù)。結(jié)果:1.根據(jù)Keyes齲齒評(píng)分結(jié)果,藥物處理組中大鼠磨牙齲平均分值較陰性對(duì)照組有所降低,各組之間分值有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(p0.05),表現(xiàn)為NaF組GCE組GA組去離子水組;根據(jù)micro CT分析結(jié)果,大鼠第一磨牙殘存釉質(zhì)體積、釉質(zhì)的礦物質(zhì)密度值均呈現(xiàn)以下關(guān)系:去離子水組GA組GCE組NaF組,各組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。另外,體視顯微鏡下可見(jiàn)大多數(shù)磨牙縱切面上,齲損帶表面有相對(duì)完整的表層再礦化區(qū)。2.五倍子有效成分與CaCl_2溶液混合后,紫外可見(jiàn)分光光度法能夠檢測(cè)到絡(luò)合物的形成跡象。且兩溶液混合10 min至1 h期間,溶液吸收光譜特征吸收峰出現(xiàn)的波長(zhǎng)段及波峰高度都未見(jiàn)明顯改變。但是,五倍子有效成分與鈣離子絡(luò)合反應(yīng)的平衡常數(shù)較小,與GCE相比,GA的絡(luò)合反應(yīng)平衡常數(shù)更小。結(jié)論:1.五倍子的主要有效成分GCE、GA可以有效促進(jìn)大鼠磨牙釉質(zhì)齲的再礦化。2.GCE和GA能夠與Ca~(2+)結(jié)合形成絡(luò)合物從而可能發(fā)揮“鈣離子攜帶器”的作用,促進(jìn)Ca~(2+)的沉積。
【關(guān)鍵詞】:五倍子 沒(méi)食子酸 釉質(zhì)齲 再礦化 絡(luò)合 紫外-可見(jiàn)分光光度法
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R285.5
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-13
  • 英文縮略詞表(Abbreviations)13-14
  • 引言14-19
  • 實(shí)驗(yàn)一、中藥五倍子促進(jìn)釉質(zhì)齲再礦化作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究19-35
  • 1 材料與儀器19-22
  • 1.1 主要儀器19-20
  • 1.2 主要試劑20
  • 1.3 藥物有效成分的提取20-21
  • 1.4 致齲菌遠(yuǎn)緣鏈球菌的培養(yǎng)21-22
  • 1.5 動(dòng)物22
  • 2 方法與步驟22-25
  • 2.1 齲病動(dòng)物模型的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)干預(yù)的實(shí)施22-23
  • 2.2 根據(jù)Keyes經(jīng)典標(biāo)準(zhǔn)對(duì)大鼠磨牙齲診斷、計(jì)分23-25
  • 2.3 應(yīng)用micro CT(micro computed tomography)掃描并分析大鼠磨牙釉質(zhì)剩余體積及平均礦物密度25
  • 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析25
  • 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-28
  • 4.1 齲齒的診斷及評(píng)分25-26
  • 4.2 micro CT檢測(cè)分析結(jié)果26-28
  • 5 討論28-35
  • 實(shí)驗(yàn)二、中藥五倍子有效成分與Ca2+絡(luò)合作用實(shí)驗(yàn)35-49
  • 1 試劑與儀器35-36
  • 2 方法與步驟36-38
  • 2.1 五倍子有效成分吸收光譜的測(cè)定36
  • 2.2 五倍子有效成分與Ca2+反應(yīng)形成絡(luò)合物的特征吸收波峰的確定36-37
  • 2.3 五倍子有效成分與Ca2+絡(luò)合比及絡(luò)合平衡常數(shù)的測(cè)定37-38
  • 3 結(jié)果分析38-45
  • 3.1 五倍子有效成分最大吸收峰值38-39
  • 3.2 五倍子有效成分與Ca2+反應(yīng)生成絡(luò)合物的最大吸收峰值39-40
  • 3.3 五倍子有效成分與Ca2+絡(luò)合比的測(cè)定40-43
  • 3.4 五倍子有效成分與Ca2+絡(luò)合平衡常數(shù)的計(jì)算43-45
  • 4 討論45-49
  • 結(jié)論49-51
  • 參考文獻(xiàn)51-59
  • 綜述59-75
  • REFERENCES70-75
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷75-77
  • 在校期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文77-79
  • 致謝79

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本文編號(hào):612129

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