發(fā)布時間：2020-03-28 10:20

【摘要】：丁吡嗎啉是由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所聯(lián)合開發(fā)的丙烯酰胺類殺菌劑。是我國具有自主知識產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新農(nóng)藥品種。離體實驗結(jié)果表明丁吡嗎啉對辣椒疫霉的EC50值與市售殺菌劑烯酰嗎啉相當；室內(nèi)盆栽試驗和田間小區(qū)試驗結(jié)果表明丁吡嗎啉能有效地防治辣椒疫��；丁吡嗎啉現(xiàn)已完成臨時登記，然而其對辣椒疫霉菌的作用機制還有待研究。 本文通過創(chuàng)新得出菌絲饑餓處理法，獲取了可以直接觀察的辣椒疫霉菌稀薄菌絲。利用掃描電鏡觀察了高濃度丁吡嗎啉處理后，菌絲的外部形態(tài)變化，利用熒光染色的方法觀察到細胞壁物質(zhì)的合成與分布，，利用透射電鏡觀察了辣椒疫霉菌絲的內(nèi)部變化。探討了丁吡嗎啉對辣椒疫霉細胞壁的作用機理，試驗結(jié)果如下： （1）菌絲掃描電鏡的結(jié)果表明：用含丁吡嗎啉的培養(yǎng)液處理后，菌絲的形態(tài)發(fā)生明顯的變化，最為顯著的變化是菌絲濃密且頂端出現(xiàn)串珠狀近球形突起，以25μg/mL丁吡嗎啉處理時表現(xiàn)最突出，膨大處的直徑約為4.23μm，收縮處約為2.57μm，而正常菌絲尖端約為2.03μm。用25μg/mL丁吡嗎啉培養(yǎng)液處理10min后，菌絲有破裂、類似空皮的現(xiàn)象。 （2）菌絲透射電鏡的結(jié)果表明：用含丁吡嗎啉25μg/mL培養(yǎng)液處理后，細胞壁增厚明顯，液泡增多，有多層細胞壁的形成，并有細胞質(zhì)物質(zhì)分布于加厚的細胞壁中；細胞質(zhì)出現(xiàn)外流現(xiàn)象并形成細胞壁楔子，線粒體及細胞核未受顯著影響。菌絲頂端的串珠狀結(jié)構(gòu)由隔膜隔斷，成熟菌絲未見膨大現(xiàn)象，但見到隔膜的產(chǎn)生，并伴有細胞質(zhì)外流。 （3）菌絲熒光染色結(jié)果表明：正常辣椒疫霉菌絲頂端呈現(xiàn)亮色熒光，而菌絲亞頂端及其他部位熒光較弱，用丁吡嗎啉處理菌絲后，菌絲失去頂端生長能力，頂端膨大凸起成近球形串珠狀，串珠狀的部位均呈現(xiàn)亮色熒光，而未膨大的部位熒光較弱，表明用丁吡嗎啉處理菌絲后，細胞壁物質(zhì)仍然能繼續(xù)合成，但細胞壁的極性生長受到抑制，新合成的細胞壁物質(zhì)分布于整個膨大凸起的串珠狀部位。 （4）孢子熒光染色的結(jié)果表明：用丁吡嗎啉處理后，孢子仍能被強烈染色，休眠孢子的極性生長受到抑制。再次證明了丁吡嗎啉處理后，辣椒疫霉菌細胞壁物質(zhì)仍能繼續(xù)合成，但影響細胞壁極性分布。
【圖文】：

霉三羧酸循環(huán)（TAC）、糖酵解途徑（EMP）、磷酸戊糖途徑（HMP）三種不同的代謝途徑的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丁吡嗎啉對磷酸戊糖途徑有一定的抑制作用（秦維彩，2010）。圖2. 辣椒疫霉透射電鏡圖（A, D-對照；B, E-5 μg/mL丁吡嗎啉作用；C, F-10 μg/mL丁吡嗎啉作用；CW-細胞壁，M-線粒體，V-液泡，VE-泡囊，DB-致密體，PM-質(zhì)膜，L-脂質(zhì)體）Fig.1 variety of ultrastructure of Phytophthora capsici under observation by TEMA, D: ultrastructure of Phytophthora capsici without pyrimorphB, E: ultrastructure of Phytophthora capsici with 5 μg/mL pyrimorphC, F: ultrastructure of Phytophthora capsici with 10 μg/mL pyrimorph液泡是維持細胞滲透壓和營養(yǎng)貯藏的一種重要的細胞器，在菌絲無隔的疫霉類真菌中，液泡在維持滲透壓和菌絲極性生長的作用尤為重要（Erwin et al., 1996）。質(zhì)膜體是存在于細胞壁和細胞膜之間的一種膜狀結(jié)構(gòu)（Mehrotra et al., 1990）

圖 2.1 掃描電鏡觀察辣椒疫霉菌絲形態(tài)上的變化(50.0 μm, 700×)Fig.1 Variety of Phytophthora capsici under observation by SEM(50.0 μm, 700×)A: 用含丁吡嗎啉 0 μg/mL 的胡蘿卜培養(yǎng)液處理的菌絲; B: 用含丁吡嗎啉 5 μg/mL 的 CA 培養(yǎng)液侵泡 10min，除掉培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng) 24 小時后觀察; C, D: 用含丁吡嗎啉 25 μg/mL 的 CA 培養(yǎng)液侵泡 10min，除掉培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng) 24 小時后觀察。掃描電鏡的結(jié)果顯示：用含丁吡嗎啉 5 μg/mL 的胡蘿卜培養(yǎng)液處理后(圖 2.1，B)，菌絲生長不規(guī)則，最為明顯的變化是頂端球形突起（圖 2.1，B 中箭頭所指），菌絲相對于未用丁吡嗎啉處理的菌絲（圖 2.1，A），菌絲變稠密，生長不規(guī)則；用含丁吡嗎啉 25 μg/mL 的胡蘿卜培養(yǎng)液處理后(圖 2.1，C,D)，菌絲變化明顯，最為突出的變化是菌絲出現(xiàn)大量的球形突起，相較于用含丁吡嗎啉 5 μg/mL 的胡蘿卜培養(yǎng)液處理后的頂端球形突起，25 μg/mL 的丁吡嗎啉處理后，菌絲稠密度增加明顯，球形突起的數(shù)量增加明顯，并有“串珠”狀形式出現(xiàn)，菌絲破裂，有類似于空皮的狀況出現(xiàn)。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：S436.418.1

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2604316