本文選題：結(jié)核分枝桿菌　切入點(diǎn)：肺結(jié)核　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：研究背景結(jié)核病(Tuberculosis, TB)是因人體感染結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterial tuberculosis, MTB)而發(fā)生的慢性傳染病,主要病灶是肺部,稱為肺結(jié)核(Pulmonary tuberculosis, PTB)。近年來(lái),隨著人口流動(dòng)的增加、HIV與MTB伴發(fā)感染、耐多藥(multidrug-resistant)和廣譜耐藥(extensively drug-resistant)菌株的流行,使全球結(jié)核病死灰復(fù)燃,呈現(xiàn)卷土重來(lái)之勢(shì)。全球1/3的人口感染了MTB,2014年新發(fā)結(jié)核病例960萬(wàn)、因結(jié)核病死亡150萬(wàn)。我國(guó)是全球第二大結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó),45%的人口感染了MTB,每年新發(fā)結(jié)核病例100萬(wàn)、因結(jié)核病死亡5萬(wàn),相當(dāng)于每10分鐘就有1人死于結(jié)核!結(jié)核病嚴(yán)重危害人類健康,已成為重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題和社會(huì)問(wèn)題!快速、靈敏的診斷方法缺乏,造成結(jié)核病診斷延誤或誤診。盡管抗生素的發(fā)明曾一度控制結(jié)核病的流行,但抗生素的用藥療程長(zhǎng)達(dá)半年乃至一年,副作用明顯,而且越來(lái)越多的結(jié)核病患者對(duì)多種抗生素產(chǎn)生了耐藥性。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),全球3.3%的新發(fā)病例和20%的復(fù)發(fā)病例為耐多藥結(jié)核,其中9.7%為廣譜耐藥結(jié)核；我國(guó)是全球耐多藥結(jié)核負(fù)擔(dān)最重的國(guó)家之一,每年新發(fā)耐多藥結(jié)核患者12萬(wàn)、廣譜耐藥結(jié)核患者近1萬(wàn)；前者治愈率不足50%,即使治愈后,人體很難完全清除體內(nèi)的MTB,在自身免疫力降低時(shí),容易復(fù)發(fā)；后者則基本無(wú)藥可治。因此,疫苗仍是控制結(jié)核病流行的最佳策略。目前臨床上唯一使用的卡介苗(BCG)在數(shù)十年的反復(fù)傳代和保存中,已經(jīng)缺失了一些毒力因子和免疫保護(hù)作用基因,以及環(huán)境分枝桿菌的干擾,使得BCG的保護(hù)效果更差,僅對(duì)預(yù)防兒童重癥結(jié)核有效,對(duì)成人肺結(jié)核無(wú)顯著的保護(hù)作用。因此,研制新型診斷試劑和疫苗勢(shì)在必行!結(jié)核桿菌屬于胞內(nèi)寄生菌,體液免疫對(duì)其作用有限,在抗結(jié)核免疫反應(yīng)中,作用最關(guān)鍵的是特異性T細(xì)胞,包括CD4+Th1和CD8+T細(xì)胞�；罨腃D4+Th1釋放IFN-γ、TNF-α等細(xì)胞因子,激活和趨化巨噬細(xì)胞,提高其對(duì)胞內(nèi)結(jié)核菌的殺滅和抗原遞呈能力。CD8+T細(xì)胞則發(fā)揮其細(xì)胞毒作用,特異識(shí)別和殺傷靶細(xì)胞,暴露并清除胞內(nèi)寄生的結(jié)核桿菌。特異CD4+Th1和CD8-T細(xì)胞無(wú)法識(shí)別完整的結(jié)核抗原,僅識(shí)別由MHC分子遞呈的抗原表位。因此,表位才是結(jié)核蛋白抗原性的基礎(chǔ)。確定T細(xì)胞表位,對(duì)于表位疫苗設(shè)計(jì)、結(jié)核診斷試劑開發(fā)具有十分重要的意義。T細(xì)胞表位(epitope)是抗原中被T細(xì)胞表面受體(T cell receptor, TCR)特異性識(shí)別的抗原部分,又稱為抗原決定簇。T細(xì)胞表位與MHC分子結(jié)合,通過(guò)與TCR相互作用,活化T細(xì)胞。目前,已知的MTB特異性T細(xì)胞表位約有800個(gè),分布在170個(gè)不同的抗原蛋白；其中65%的已知表位集中來(lái)自30個(gè)最著名的MTB抗原,如ESAT-6、CFP-10和PPE家族蛋白,對(duì)于其它MTB抗原的表位,目前所知甚少。集中的抗原譜導(dǎo)致過(guò)窄的免疫應(yīng)答,容易引起免疫耐受,不利于機(jī)體有效地抗結(jié)核。從MTB基因組選擇抗原,篩選和鑒定抗原表位,有助于“拓寬”現(xiàn)有表位的免疫保護(hù)效應(yīng)。T細(xì)胞表位是通過(guò)MHC分子提呈的,即具有MHC限制性。大量已知的MTB抗原表位是歐美白種人群攜帶MHC分子(如HLA-A*0201)遞呈的；結(jié)核感染最嚴(yán)重的地區(qū)是非洲和東南亞等欠發(fā)達(dá)的國(guó)家和地區(qū),適用于這些地區(qū)人群的T細(xì)胞表位嚴(yán)重缺乏。中國(guó)是世界上第二大結(jié)核高負(fù)擔(dān)國(guó),篩選和鑒定中國(guó)人群高頻HLA提呈的MTB表位,有助于促進(jìn)具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的抗結(jié)核疫苗和診斷試劑的研發(fā)。近年來(lái),基于肽與MHC分子結(jié)合親和力的表位預(yù)測(cè),成為了表位篩選和鑒定的熱點(diǎn)。目前,大部分的表位研究都是通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)獲得高親和力的候選表位,然后人工合成肽,逐一驗(yàn)證。傳統(tǒng)的親和力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是一個(gè)費(fèi)時(shí)費(fèi)力的過(guò)程,利用紫外誘導(dǎo)肽置換技術(shù),能快速、準(zhǔn)確、大規(guī)模地驗(yàn)證表位與MHC分子的親和力,更高效地找到免疫優(yōu)勢(shì)表位。本課題組從MTB全基因組選擇目標(biāo)抗原,運(yùn)用生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)聯(lián)合紫外誘導(dǎo)肽置換實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,初步篩選出與中國(guó)人群高頻HLA分子高親和結(jié)核的候選T細(xì)胞表位；進(jìn)而利用臨床樣本,驗(yàn)證其抗結(jié)核免疫活性；并且利用肽-MHC多聚體,在肺結(jié)核患者外周血中檢測(cè)到抗原特異性T細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)組最終鑒定出6條新的CTL表位和3條新的Thl表位,為研發(fā)適用于中國(guó)人群的肽表位疫苗、結(jié)核診斷試劑奠定重要基礎(chǔ)。研究目的1.篩選和鑒定覆蓋最廣泛中國(guó)人群的HLA-A*1101限制性CTL表位,并且評(píng)價(jià)其抗結(jié)核免疫效應(yīng)。2.篩選和鑒定覆蓋最廣泛中國(guó)人群的HLA-DRB1*0901限制性Th1表位,并且評(píng)價(jià)其抗結(jié)核免疫效應(yīng)。研究方法1.檢測(cè)結(jié)核患者HLA-A、HLA-DR等位基因頻率T細(xì)胞表位的識(shí)別和遞呈有MHC限制性。不同區(qū)域的人群,攜帶的HLA等位基因有很大差異。為了鑒定能夠覆蓋最廣泛的中國(guó)人群T細(xì)胞表位,我們檢測(cè)中國(guó)人群的HLA基因頻率,尋找等位基因頻率最高的HLA分型。我們從南方醫(yī)院和廣州市胸科醫(yī)院一共收集了350名結(jié)核患者的外周血樣本,利用測(cè)序分型技術(shù)(SBT),對(duì)結(jié)核患者HLA-A、HLA-DR位點(diǎn)進(jìn)行高分辨基因分型檢測(cè)。2.預(yù)測(cè)CTL表位和Th表位1) HLA-A*1101限制性CTL表位的預(yù)測(cè)①?gòu)腁nat Zvi, ect al篩選的具有免疫優(yōu)勢(shì)的抗原中選擇了45個(gè)MTB抗原蛋白：從Sylvie Bertholet, ect al鑒定的誘導(dǎo)IFN-γ分泌的抗原中選擇了16個(gè)MTB抗原蛋白；另外,通過(guò)PubMed檢索2008至2013年間報(bào)道新的MTB抗原蛋白,選擇了33個(gè)MTB抗原蛋白。綜上所述,最終篩選獲得94個(gè)MTB抗原。②從結(jié)核數(shù)據(jù)庫(kù)TB Database獲取94個(gè)MTB抗原的氨基酸序列；使用CBS數(shù)據(jù)庫(kù)上NetMHCcons方法預(yù)測(cè)HLA-A*1101限制性CTL表位。選取與HLA-A*1101分子親和力最高的48條表位肽。2) HLA-DRB1*0901限制性Th表位的預(yù)測(cè)①選擇了強(qiáng)免疫原性并廣泛應(yīng)用的MTB抗原38kDa (Rv0934)和Ag85A (Rv3804c)。目前表位數(shù)據(jù)庫(kù)IEDB尚未有這兩個(gè)抗原HLA-DRB1*0901限制性T細(xì)胞表位研究報(bào)道。②從TB Database獲取38kDa和Ag85A的氨基酸序列；使用CBS數(shù)據(jù)庫(kù)上NetMHCII方法預(yù)測(cè)抗原上的Th表位,選取與HLA-DRB1*0901分子親和力最高的18個(gè)表位。3. HLA-A*1101限制性CTL表位的篩選和鑒定1)紫外誘導(dǎo)肽置換實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證CTL表位與HLA-A*1101分子的親和力合成含光敏型配體的p-MHC單體,將其與預(yù)測(cè)的CTL表位肽混合,紫外照射1小時(shí)。光敏型配體發(fā)生斷裂而從MHC分子脫離,CTL表位與MHC分子結(jié)合形成新的p-MHC單體,并且親和力越高,形成的單體越多越穩(wěn)定。使用MHCI特異性ELISA檢測(cè)新形成的p-MHC單體的量,確定預(yù)測(cè)的CTL與HLA-A*1101分子之間的親和力。2) ELISA檢測(cè)CTL、Th表位誘導(dǎo)肺結(jié)核患者PBMC分泌細(xì)胞因子CTL表位肽刺激6名HLA-A*1101(+)確診結(jié)核患者的PBMC細(xì)胞。72小時(shí)后,ELISA檢測(cè)上清中IFN-γ、TNF-α和GrB的分泌水平。3)ELISPOT檢測(cè)分泌IFN-γ的CD8+T細(xì)胞頻數(shù)及患者識(shí)別陽(yáng)性率CTL表位肽刺激30名HLA-A*1101(+)肺結(jié)核患者的PBMC細(xì)胞,在ELISPOT板孵育24小時(shí),檢測(cè)生成的斑點(diǎn)數(shù)。設(shè)置陽(yáng)性反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn),統(tǒng)計(jì)各CTL表位肽被患者識(shí)別的陽(yáng)性率。4)CTL表位誘導(dǎo)肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞增殖用CTL表位肽刺激來(lái)自HLA-A*1101(+)肺結(jié)核患者、HLA-A*1101(-)肺結(jié)核患者和HL-A*1101(+)健康志愿者的PBMC細(xì)胞,用CFSE對(duì)淋巴細(xì)胞進(jìn)行染色,7天后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD8+T細(xì)胞的增殖水平。5)表位肽-MHC多聚體檢測(cè)肺結(jié)核患者肽特異性T細(xì)胞合成帶APC熒光的HLA-A*1101多聚體(裝載CTL表位p12),用于標(biāo)記p12特異性T細(xì)胞。用多聚體標(biāo)記4名肺結(jié)核患者的PBMC,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)p12特異性T細(xì)胞的百分比。6)檢測(cè)CTL表位肽p12誘導(dǎo)CD69和CD107分子的表達(dá)及胞內(nèi)細(xì)胞因子分泌用p12刺激HLA-A*1101肺結(jié)核患者的PBMC,6小時(shí)后,用表面標(biāo)記抗體檢測(cè)T細(xì)胞早期活化標(biāo)志CD69和溶酶體相關(guān)膜蛋白CD107的表達(dá)水平。將T細(xì)胞破膜固定后,檢測(cè)胞內(nèi)IFN-γ、TNF-α和IL-2的表達(dá)水平。4.HLA-DRB1*0901限制性CD4+T細(xì)胞篩選和驗(yàn)證1) ELISA檢測(cè)Th表位誘導(dǎo)Th1型細(xì)胞因子分泌用Th表位刺激10名HLA-DRB1*0901肺結(jié)核患者的PBMC細(xì)胞,72小時(shí)后,ELISA檢測(cè)上清中Th1型細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-17的分泌水平。2) ELISPOT檢測(cè)分泌IFN-γ的CD4+T細(xì)胞頻數(shù)用Th1表位刺激來(lái)自HLA-DRB1*0901(+)和HLA-DRB1*0901(-)肺結(jié)核患者的PBMC,在ELISPOT板孵育24小時(shí)后,檢測(cè)生成的斑點(diǎn)數(shù)。3)Th1表位肽誘導(dǎo)肺結(jié)核患者CD4+T細(xì)胞增殖用Th1表位肽刺激來(lái)自HLA-DRB1*0901(+)和HLA-DRB1*0901(-)肺結(jié)核患者的PBMC,使用CFSE染料標(biāo)記細(xì)胞,7天后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+T細(xì)胞的增殖水平。4)ICS檢測(cè)Th1表位誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌用HLA-DRB1*0901限制性Th1表位肽p2刺激肺結(jié)核患者的PBMC,6小時(shí)后,檢測(cè)胞內(nèi)IFN-γ、TNF-α和IL-2的表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(standard error, mean±SE)表示。不同組之間的比較使用單因素方差分析(One-way ANOVA),多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組的均值比較方差齊時(shí)采用Dunnett-t檢驗(yàn),各組間兩兩比較方差齊時(shí)采用LSD法。兩樣本間的均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)(Independent-samples T Test)。當(dāng)P0.05時(shí),被認(rèn)為差異具有顯著意義。結(jié)果1.獲得了中國(guó)結(jié)核患者HLA-A、HLA-DR等位基因頻率分布為獲得結(jié)核患者中HLAⅠ、Ⅱ類等位基因的頻率,利用測(cè)序分型技術(shù)(SBT),對(duì)中國(guó)南方地區(qū)350名結(jié)核患者進(jìn)行HLA-A、HLA-DR位點(diǎn)高分辨基因分型檢測(cè),證實(shí)頻率最高的前五位與HLA等位基因權(quán)威數(shù)據(jù)庫(kù)AFND (http://www.allelefrequencies.net)中國(guó)人群的結(jié)果一致。其中HLA-A*1101和HLA-DRB1*0901分別是HLA-A位點(diǎn)和HLA-DRB1位點(diǎn)等位基因頻率最高的基因型,能夠覆蓋最廣泛的中國(guó)人群。2.MTB抗原特異性CTL和Th1表位的預(yù)測(cè)和鑒定1)HLA-A*1101限制性MTB抗原CTL表位的預(yù)測(cè)和鑒定①抗原選擇：通過(guò)篩選抗原的方法和設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn),獲得了Rv0079等94個(gè)能夠誘導(dǎo)人CD8+T細(xì)胞反應(yīng)的MTB抗原。② HLA-A*1101表位：從結(jié)核數(shù)據(jù)庫(kù)(TB Database)獲得94個(gè)MTB抗原蛋白的氨基酸序列,采用CBS數(shù)據(jù)庫(kù)中的NetMHCcons預(yù)測(cè)方法,預(yù)測(cè)與HLA-A*1101分子高親和力的表位。選擇了親和力最強(qiáng)的48條表位,這些表位肽的IC5015nM。2) HLA-DRB1*0901限制性Th表位的預(yù)測(cè)和鑒定①抗原選擇：通過(guò)檢索IEDB,發(fā)現(xiàn)常見(jiàn)MTB抗原38kDa (Rv3804)和Ag85A(Rv0934c)并沒(méi)有HLA-DRB1*0901限制性表位的報(bào)道,于是選取它們作為目標(biāo)抗原。② HLA-DRB1*0901表位：從結(jié)核數(shù)據(jù)庫(kù)(TB Database)獲得了38kDa和Ag85A的氨基酸序列,通過(guò)CBS數(shù)據(jù)庫(kù)中NetMHCIIpan預(yù)測(cè)方法,預(yù)測(cè)與HLA-DRB1*0901分子結(jié)合的表位。我們選取了IC5050nM的高親和力表位肽,共計(jì)18條。3. HLA-A*1101限制性CTL表位的篩選及其免疫學(xué)功能驗(yàn)證1)通過(guò)紫外誘導(dǎo)肽置換實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證48條CTL表位肽與HLA-A*1101分子結(jié)合親和力,其中22條預(yù)測(cè)表位肽與HLA-A*1101分子有強(qiáng)親和力(陽(yáng)性對(duì)照肽),將預(yù)測(cè)表位肽的序列與MTB蛋白組比對(duì),確認(rèn)了預(yù)測(cè)表位肽MTB蛋白來(lái)源的唯一性。2)通過(guò)不同的實(shí)驗(yàn)方法(ELISA法、ELISPOT法和ICS法)檢測(cè)了22條預(yù)測(cè)表位肽活化CD8+T細(xì)胞和誘導(dǎo)細(xì)胞因子反應(yīng),發(fā)現(xiàn)其中6條表位肽特異性地誘導(dǎo)肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ (P0.05)。3)為驗(yàn)證6條免疫優(yōu)勢(shì)的CTL表位肽的MTB特異性和HLA-A*1101限制性,檢測(cè)表位肽誘導(dǎo)HLA-A*1101(+)肺結(jié)核患者、HLA-A*1101(-)肺結(jié)核患者和HLA-A*1101(+)健康志愿者的PBMC中分泌IFN-y的CD8+T細(xì)胞的頻數(shù)。結(jié)果顯示,6條抗原表位肽刺激后,HLA-A*1101(+)肺結(jié)核患者PBMC中分泌IFN-y的CD8+T細(xì)胞的頻數(shù),顯著地高于其它兩組,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4)為了進(jìn)一步檢測(cè)6條優(yōu)勢(shì)表位肽的免疫學(xué)活性,我們檢測(cè)了它們誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖的能力,發(fā)現(xiàn)它們能特異性地誘導(dǎo)HLA-A*1101(+)肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞增殖(P0.05)。5)為了直接檢測(cè)表位肽特異性T細(xì)胞,合成了肽-MHC多聚體(dextramer),利用多聚體標(biāo)記,在HLA-A*1101(+)的肺結(jié)核患者PBMC中檢測(cè)到顯著水平的表位肽p12特異性CD8+T細(xì)胞(P0.05)。6)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明,優(yōu)勢(shì)表位肽p12誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞早期活化標(biāo)志CD69分子和殺傷活性標(biāo)志分子CD107a/b的表達(dá)上調(diào)；表位肽p12夠誘導(dǎo)肺結(jié)核患者產(chǎn)生同時(shí)分泌兩種或以上細(xì)胞因子的多功能CD8+T細(xì)胞。4.HLA-DRBl*0901限制性Thl表位的篩選及其免疫學(xué)功能驗(yàn)證1)通過(guò)不同的實(shí)驗(yàn)方法(ELISA和流式細(xì)胞術(shù))檢測(cè)18條Th表位肽誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞反應(yīng),發(fā)現(xiàn)其中6條誘導(dǎo)肺結(jié)核患者分泌Thl型細(xì)胞因子(P0.05)。2) ELISPOT檢測(cè)6條優(yōu)勢(shì)表位肽誘導(dǎo)HLA-DRB1*0901(+)和HLA-DRB1*0901(-)肺結(jié)核患者的IFN-γ反應(yīng),發(fā)現(xiàn)6條表位肽誘導(dǎo)的IFN-y反應(yīng)均能被anti-CD4抗體阻斷(P0.05)；其中3條表位肽能特異性地誘導(dǎo)HLA-DRB1*0901(+)的肺結(jié)核患者PBMC分泌IFN-γ(P0.05).3)為進(jìn)一步檢測(cè)上述3條HLA-DRB1*0901限制性CD4+T細(xì)胞優(yōu)勢(shì)表位肽的免疫學(xué)活性,檢測(cè)了它們誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖的能力。結(jié)果顯示,3條優(yōu)勢(shì)表位肽能特異性誘導(dǎo)HLA-DRB1*0901(+)肺結(jié)核患者的CD4+T細(xì)胞發(fā)生顯著增殖,P0.05)。4)利用流式細(xì)胞術(shù),檢測(cè)到了表位肽p4夠誘導(dǎo)肺結(jié)核患者產(chǎn)生同時(shí)分泌兩種或以上細(xì)胞因子的多功能CD4+T細(xì)胞。結(jié)論1.通過(guò)HLA基因頻率測(cè)序分型,獲得了中國(guó)人群HLA-A和DR位點(diǎn)上的等位基因頻率,為鑒定覆蓋廣泛人群HLA的MTB表位奠定基礎(chǔ)。2.利用生物信息預(yù)測(cè),結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的方法,鑒定了6條來(lái)自不同MTB抗原蛋白的HLA-A*1101限制性CTL表位；通過(guò)臨床樣本功能實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證了上述優(yōu)勢(shì)表位能誘導(dǎo)IFN-γ、TNF-α和GrB等細(xì)胞因子分泌,誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞增殖；通過(guò)肽-MHC多聚體標(biāo)記,證實(shí)p12是自然遞呈的表位。這些HLA-A*1101限制性表位肽為進(jìn)一步研發(fā)疫苗或診斷試劑奠定基礎(chǔ)。3.利用生物信息預(yù)測(cè),結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的方法,鑒定了3條新的HLA-DRB1*0901限制性Thl表位,通過(guò)功能實(shí)驗(yàn)證明上述表位肽能夠誘導(dǎo)IFN-γ、TNF-α等Thl型細(xì)胞因子分泌,誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞的增殖,為進(jìn)一步研發(fā)多肽疫苗或診斷試劑奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R378.911

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1 關(guān)欣,鄭紅光;TH1反應(yīng)在銅綠假單胞菌二次感染小鼠中作用的研究[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

2 劉英杰;楊志蕃;崔洋;陳光;曹雅明;;約氏瘧原蟲感染早期抵抗和易感小鼠Th1反應(yīng)特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)研究[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào);2007年01期

3 魏軍,尚濤,王德智;妊娠高血壓綜合征患者外周血單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生Th1、Th2型細(xì)胞因子失衡的研究[J];中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志;2003年04期

4 劉旺華;周小青;劉建新;謝靜;楊靜宜;;急性化膿性扁桃體炎衛(wèi)分證外周血Th1、Th2類細(xì)胞因子的表達(dá)及臨床意義[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2012年04期

5 呂芳;馬瑛;瘳志恒;;心理干預(yù)對(duì)耐多藥肺結(jié)核患者Th1和Th2的影響[J];當(dāng)代護(hù)士(中旬刊);2014年04期

6 管孝鞠,吳玉章;Th1極化佐劑的研究進(jìn)展[J];華西藥學(xué)雜志;2001年02期

7 張小玲;;劫敏顆粒對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者血清Th1、Th2的影響[J];河北中醫(yī);2009年04期

8 趙;Th1和Th2細(xì)胞在麻風(fēng)免疫中的作用及其機(jī)制[J];中國(guó)麻風(fēng)雜志;1996年03期

9 王鶴堯;鄭文婕;;左旋咪唑鼻腔給藥改變小鼠變應(yīng)性鼻炎黏膜局部的Th1／Th2免疫應(yīng)答[J];中國(guó)新藥雜志;2006年17期

10 李躍旗;許鵬輝;蘇海濱;遲淑萍;朱雷;戚揚(yáng);李金波;程云;;慢性HCV感染患者PBMC體外Th1類細(xì)胞因子分泌及其相關(guān)因素分析[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 唐克誠(chéng);李海;孟超;李謙;鄒懷賓;盧誠(chéng)震;袁桂玉;;慢性乙型重型肝炎患者TH1／TH2細(xì)胞因子平衡研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

2 蘇崢;姚希賢;王軍民;;丙型肝炎病毒基因型與Th1／Th2淋巴細(xì)胞亞群功能的關(guān)系[A];第十五次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 吳文漪;張萍;;慢性乙型肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞Th1、Th2型細(xì)胞標(biāo)記物及其細(xì)胞因子的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)感染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

4 李耀平;喬麗娟;馬克容;;大腸癌TH1／TH2治療中的動(dòng)態(tài)觀察[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

5 王艷玲;杜國(guó)選;黃美杏;;TH1、TH2及其平衡與哮喘的相關(guān)性研究[A];第十一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

6 肖玲莉;楊毅;周蓮寶;王榴慧;胡霄穎;;益生菌調(diào)節(jié)濕疹患兒Th1／Th2平衡及對(duì)腸道菌群的影響[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

7 周強(qiáng);趙建剛;呂厚山;栗占國(guó);;HLA-DRβ_1特異性非T細(xì)胞激活肽對(duì)膠原性關(guān)節(jié)炎大鼠Th1／Th2細(xì)胞的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉蘇東;結(jié)核分枝桿菌免疫優(yōu)勢(shì)CTL和Th1表位的篩選與鑒定[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

2 倪海峰;體外循環(huán)對(duì)Th1、Tc1/Th2、Tc2細(xì)胞分化影響及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 張紅;1，，25-二羥基維生素D_3對(duì)慢性實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠Th1、Th17活化的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

2 李紅梅;槐杞黃對(duì)哮喘大鼠Th1、Th2、Th17表達(dá)及肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[D];中南大學(xué);2010年

3 孫博;異丙托溴銨對(duì)變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻黏膜Th1、Th2、Th17及Treg細(xì)胞的影響[D];中南大學(xué);2014年

4 田英;IM外周血單個(gè)核細(xì)胞Th1、Th2型細(xì)胞標(biāo)記物及其細(xì)胞因子的表達(dá)[D];四川大學(xué);2002年

5 胡瑞;補(bǔ)氣活血法對(duì)慢性支氣管炎肺氣虛證大鼠TH1和TH2相關(guān)細(xì)胞因子的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

6 梁婧;胃癌Th1和Th2類細(xì)胞因子的基因表達(dá)及臨床意義[D];山東大學(xué);2006年

7 孔志斌;PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)哮喘患者外周血Th1／Th2失衡影響的臨床研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2007年

本文編號(hào)：1667299