發(fā)布時間：2017-07-03 08:08

  本文關(guān)鍵詞：PCR毛細管電泳法檢測嗜水氣單胞菌gyrB和16SrRNA基因:溺死診斷方法

  更多相關(guān)文章： 法醫(yī)病理學 溺死 嗜水氣單胞菌 PCR毛細管電泳

【摘要】：目的建立嗜水氣單胞菌gyr B和16SrRNA基因PCR毛細管電泳檢測方法,探討它們在淡水溺死診斷中的應用價值。方法提取人、18種浮游生物(白色念珠菌、嗜水氣單胞菌及16種藻類),以及經(jīng)微波消解-真空抽濾-電鏡掃描法檢測過的30例尸體(其中生前淡水溺死28例,陸地自然死亡2例)的組織樣本的DNA(肺、肝、腎各1份/例),分別使用引物AH(gyr B基因)及引物Ah(16SrRNA基因)進行擴增,擴增產(chǎn)物用毛細管電泳法檢測。結(jié)果人、白色念珠菌、16種藻類DNA擴增后毛細管電泳檢測結(jié)果均為陰性,而嗜水氣單胞菌結(jié)果均為陽性,其產(chǎn)物大小分別為195 bp,350 bp。分別利用引物AH和Ah對28例淡水溺死尸體樣本肺、肝、腎進行PCR毛細管法進行檢測,嗜水氣單胞菌的檢出率:AH分別為96.4%,71.4%,60.7%;Ah分別為75.0%,42.9%,32.1%,計算得到溺死者的體循環(huán)臟器中嗜水氣單胞菌檢驗的總陽性率分別為82.1%,53.6%,2例陸地自然死亡案件尸體樣本檢測結(jié)果均為陰性。兩對引物AH與Ah對嗜水氣單胞菌檢出率有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論 PCR毛細管電泳法檢測嗜水氣單胞菌gyr B基因用于診斷淡水溺死靈敏度較高,可作為診斷的輔助性方法;聯(lián)用16SrRNA基因可提高該菌的檢出率,增強MDVF-Auto SEM法診斷淡水溺死的證據(jù)力。
【作者單位】： 廣東工業(yè)大學輕工化工學院;廣州市刑事科學技術(shù)研究所公安部法醫(yī)病理學重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 法醫(yī)病理學 溺死 嗜水氣單胞菌 PCR毛細管電泳
【基金】：廣東省公益研究和能力建設(shè)項目(2015A020217001) 公安部計劃研究項目(2015JSYJA03)
【分類號】：D919
【正文快照】： 目前,法醫(yī)學鑒定溺死的方法主要包括尸體剖檢、硅藻檢驗以及浮游細菌檢驗等[1]。其中剖檢尸體鑒定溺死主要依據(jù)一些溺死的典型特征進行判斷,包括逝者口、鼻及呼吸道中出現(xiàn)白沫、肺腫大、胸膜積液以及胸膜下出血等,但是若尸體已高度腐敗,上述特征則不明顯甚至不存在,因而死因難

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