移取1.00mL血液樣品,加入2mL乙腈和50mg氯化鈉,振蕩10min后,在-4℃下以8 000r·min^-1轉(zhuǎn)速離心10min,取上清液,加入15mg N-丙基乙二胺和25mg十八烷基硅烷,振蕩5min,重復(fù)上述離心操作,取上清液,過0.22μm有機微孔膜,采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定濾液中次烏頭堿、新烏頭堿、烏頭堿和滇烏頭堿等4種烏頭類生物堿的含量。以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈色譜柱為固定相,以不同體積比的0.1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）氨水和甲醇的混合液為流動相進(jìn)行梯度洗脫,串聯(lián)質(zhì)譜分析中采用電噴霧正離子源和多反應(yīng)監(jiān)測模式。4種烏頭類生物堿的質(zhì)量濃度在一定范圍內(nèi)與其對應(yīng)的峰面積呈線性關(guān)系,方法的檢出限（3S/N）為0.010～0.035μg·L^-1。以空白樣品為基體進(jìn)行加標(biāo)回收試驗,所得回收率為96.3%～109%,回收量的日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為2.3%～4.2%,日間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為0.70%～6.7%。 

【文章來源】：理化檢驗(化學(xué)分冊). 2019,55(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

圖１混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖（ｃ）

�。保埃恚椋顣r４種烏頭類生物堿的回收率相當(dāng)。試驗從經(jīng)濟、省時的角度選擇萃取方式為振蕩萃�。保埃恚椋�。２．４．２鹽析劑及其用量在ＱｕＥＣｈＥＲＳ中常用的鹽析劑有氯化鈉和無水硫酸鎂。氯化鈉可以促進(jìn)相分離，繼而在體系中發(fā)生液液分配［２４］；無水硫酸鎂可以結(jié)合體系中的水分，使目標(biāo)物向有機相中分配轉(zhuǎn)移。試驗考察了無水硫酸鎂和氯化鈉作為鹽析劑時對４種烏頭類生物堿回收率的影響。氯化鈉的用量對４種烏頭類生物堿回收率的影響見圖２。由圖２可知：加入氯化鈉作為鹽析劑時，隨著氯化鈉添加量的增加，３種烏頭類生物堿的回收率逐漸增大（烏頭堿的回收率降低后又增大）；氯化鈉的用量為５０ｍｇ時，４種烏頭類生物堿的回收率最高；繼續(xù)增加氯化鈉的用量，４種烏頭類生物堿的回收率基本保持不變。試驗結(jié)果表明：加入無水硫酸鎂作為鹽析劑時，僅在其用量為１０ｍｇ時，４種烏頭類生物堿的回收率最高；繼續(xù)增加無水硫酸鎂的用量，４種烏頭類生物堿的回收率降低。這是由于無水硫酸鎂在吸收水分的過程中放出大量的熱，可能會引起熱不穩(wěn)定的烏頭類生物堿分解，導(dǎo)致整體回收率下降［２５－２６］。試１－次烏頭堿；２－滇烏頭堿；３－烏頭堿；４－新烏頭堿圖２氯化鈉的用量對４種烏頭類生物堿回收率的影響Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＮａＣｌａｍｏｕｎｔｏｎｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ４ａｃｏｎｉｔｕｍａｌｋａｌｏｉｄｓ驗選擇鹽析劑為氯化鈉，用量為５０ｍｇ。２．４．３吸附劑及其用量ＱｕＥＣｈＥＲＳ在基質(zhì)分散固相萃�。ǎ洌樱校牛┎�

鐘世豪，等：ＱｕＥＣｈＥＲＳ－超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法測定血液中４種烏頭類生物堿１－烏頭堿；２－新烏頭堿；３－次烏頭堿；４－滇烏頭堿；圖３吸附劑對４種烏頭類生物堿回收率的影響Ｆｉｇ．３Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｄｓｏｒｂｅｎｔｏｎｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ４ａｃｏｎｉｔｕｍａｌｋａｌｏｉｄｓ１－新烏頭堿；２－次烏頭堿；３－烏頭堿；４－滇烏頭堿圖４不同吸附劑作用下的基質(zhì)效應(yīng)Ｆｉｇ．４Ｍａｔｒｉｘｅｆｆｅｃｔｓｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｄｓｏｒｂｅｎｔｓ質(zhì)效應(yīng)較小，Ａｌ－Ｎ降低基質(zhì)效應(yīng)的效果比ＧＣＢ、ＰＳＡ和Ｃ１８差。ＰＳＡ同時含有伯胺和仲胺，可以有效去除血液中的脂肪酸、有機酸及糖類；Ｃ１８是在硅膠基質(zhì)上接十八烷基，能夠有效吸附血液中的油脂等非極性物質(zhì)；ＧＣＢ對平面結(jié)構(gòu)的化合物具有極強的吸附性，會對４種烏頭類生物堿產(chǎn)生吸附作用［２７］。綜合考慮，試驗選擇吸附劑為ＰＳＡ和Ｃ１８。試驗進(jìn)一步考察了ＰＳＡ和Ｃ１８的用量對４種烏頭類生物堿回收率的影響。結(jié)果表明：ＰＳＡ的用量為３０ｍｇ時，４種烏頭類生物堿的回收率最高；Ｃ１８的用量為５０ｍｇ時，４種烏頭類生物堿的回收率最高，繼續(xù)增加Ｃ１８的用量，４種烏頭類生物堿的回收率不再升高，Ｃ１８的用量多于９０ｍｇ時，４種烏頭類生物堿的回收率降低。試驗將ＰＳＡ和Ｃ１８組合使用，使用１０ｍｇＰＳＡ和２０ｍｇＣ１８、２０ｍｇＰＳＡ和１０ｍｇＣ１８以及

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Qu ECh ERS/LC-MS/MS法測定食品中7種真菌毒素[J]. 熊欣,劉青,張廣文,龐世琦,曾廣豐,陳文銳.  分析測試學(xué)報. 2018(09)
[2]超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定血液中5種烏頭類生物堿[J]. 滕傲雪,王瑞花,何洪源,常靖.  理化檢驗(化學(xué)分冊). 2018(08)
[3]改進(jìn)QuEChERS-氣相色譜/質(zhì)譜法測定食源性植物中煙堿及次要生物堿[J]. 張洪非,羅彥波,李翔宇,姜興益,朱風(fēng)鵬,龐永強,陳歡,韓書磊,付亞寧,劉彤,侯宏衛(wèi).  分析科學(xué)學(xué)報. 2018(02)
[4]基于Fe3O4磁性納米粒子的QuEChERS預(yù)處理方法聯(lián)合GC-MS對血液中多種苯二氮卓類藥物檢測[J]. 于天曉,韓彥潔,張瑤,許紅.  分析試驗室. 2018(04)
[5]烏頭安全有效性研究進(jìn)展及其臨床應(yīng)用前景[J]. 楊苗苗,楊霖,李孝棟.  藥學(xué)研究. 2018(03)
[6]45例急性烏頭堿中毒的臨床表現(xiàn)和救治分析[J]. 楊發(fā)俊.  中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新. 2017(36)
[7]氣相色譜-質(zhì)譜法結(jié)合QuEChERS方法和分散液液微萃取技術(shù)測定茭白中三唑類農(nóng)藥殘留[J]. 姚芳,宋志宇,聶晶,葉靜青,韋其真,倪琳,李祖光.  理化檢驗(化學(xué)分冊). 2017(06)
[8]烏頭類中藥毒性及現(xiàn)代毒理學(xué)研究進(jìn)展[J]. 劉帥,李妍,李衛(wèi)飛,許金凱,李飛,杜紅.  中草藥. 2016(22)
[9]全血中有機磷農(nóng)藥和鼠藥測定的QuEChERS前處理法[J]. 董芳,李惠玲,馬婧,周博,于燕.  中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 2016 (10)
[10]超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時快速檢驗全血中扎來普隆及其代謝產(chǎn)物[J]. 徐多麒,張蕾萍,王繼芬,黃健,郭震,林寬.  分析化學(xué). 2016(07)

碩士論文
[1]QuEChERS結(jié)合GC-MS/MS和LC-MS/MS高通量檢測果蔬農(nóng)藥多殘留研究[D]. 劉婷.中南林業(yè)科技大學(xué) 2018



本文編號：3627065