目的構(gòu)建溺死相關(guān)浮游生物基因座的復(fù)合擴(kuò)增體系,驗(yàn)證體系特異性并評(píng)估其在法醫(yī)溺死診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法針對(duì)溺死相關(guān)浮游生物同源基因序列,設(shè)計(jì)特異性引物,并用FAM、HEX、TAMRA、ROX、SIZ熒光染料分組標(biāo)記,構(gòu)建復(fù)合擴(kuò)增體系;進(jìn)行體系特異性驗(yàn)證;以16例實(shí)驗(yàn)豬樣本評(píng)估體系檢驗(yàn)效能;復(fù)合擴(kuò)增體系、硅藻形態(tài)學(xué)MD-VF-Auto SEM檢測(cè)法及硅藻rbc L基因PCR-CE檢測(cè)法分別檢測(cè)28例案件樣本,比較分析應(yīng)用效果。結(jié)果該復(fù)合擴(kuò)增體系共包含14個(gè)基因座,可特異性擴(kuò)增35種浮游藻類和3種浮游細(xì)菌,人、3種人體共生菌及8種浮游細(xì)菌均為陰性。以該體系檢測(cè)溺死實(shí)驗(yàn)豬,陽性率為90%,非溺死實(shí)驗(yàn)豬均未檢出;檢測(cè)溺死案件樣本,陽性率為96%,非溺死案件均未檢出。復(fù)合擴(kuò)增體系與MD-VF-Auto SEM法檢測(cè)案件尸體肺、肝和腎的陽性率均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P> 0.05）,但其與硅藻rbcL基因PCR-CE法檢測(cè)案件肝和腎的陽性率均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。結(jié)論本文針對(duì)多種溺死相關(guān)浮游生物14個(gè)基因建立的復(fù)合擴(kuò)增體系,具備多種靶物種的特異性遺傳標(biāo)記,且所需檢材量小,提高了檢測(cè)... 

【文章來源】：中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2020,35(01)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 樣本及儀器
        1.1.1 特異性檢測(cè)樣本
        1.1.2 測(cè)試樣本
        1.1.3 試劑儀器
    1.2 方法
        1.2.1 復(fù)合擴(kuò)增體系的構(gòu)建
        1.2.2 體系特異性驗(yàn)證
        1.2.3 實(shí)驗(yàn)豬評(píng)估體系檢驗(yàn)效能
        1.2.4 實(shí)際案例分析體系應(yīng)用效果
2 結(jié)果
    2.1 體系特異性結(jié)果
    2.2 實(shí)驗(yàn)豬檢測(cè)結(jié)果
    2.3 28例案件應(yīng)用效果
3 討論
    3.1 復(fù)合擴(kuò)增體系特異性分析
    3.2 復(fù)合擴(kuò)增體系的應(yīng)用評(píng)估


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)硅藻UPA基因在溺死診斷中的研究[J]. 劉向東,劉超,徐曲毅,彭帆,胡孫林,麥柏盛,劉宏,李越,胡慧英,徐際超,張書睿,韓雅莉,譚竹鈞.  中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2018(02)
[2]溺死相關(guān)硅藻rbcL基因檢測(cè)技術(shù)研究[J]. 彭帆,劉超,徐曲毅,劉向東,趙建,劉宏,李越,胡孫林,宋旭恒,李明,韓雅莉.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]PCR毛細(xì)管電泳法檢測(cè)嗜水氣單胞菌gyrB和16SrRNA基因:溺死診斷方法[J]. 麥柏盛,徐曲毅,劉超,趙建,韓雅莉.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(11)
[4]COX1、12SrRNA、16SrRNA基因復(fù)合擴(kuò)增種屬鑒定研究[J]. 蒙曉平,白曉軍,梅燕,曹錫梅,張潮,成振,荊麗紅,郭大瑋,張更謙.  中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2015(06)
[5]嗜水氣單胞菌氣溶素和溶血素基因的克隆與結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)[J]. 劉明智,葉星,田園園,鄧國成,馬冬梅,白俊杰.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(02)



本文編號(hào)：3200062