【摘要】：目的建立一種簡(jiǎn)約且易于自動(dòng)化操作的Whatman FTA卡血樣DNA提取方法。方法取直徑1.2mmFTA卡血樣,分別用FTA-DNA直接提取法及FTA常規(guī)提取方法提取DNA,AB-IdentifilerTM試劑盒分別進(jìn)行10μl和25μl體系檢測(cè)比較,并篩選批量FTA卡血樣DNA自動(dòng)化提取程序。結(jié)果200份FTA卡血樣分別采用2種方法提取DNA模板,25μl體系PCR-STR檢測(cè),分型結(jié)果均良好。10μl體系檢測(cè),FTA-DNA直接提取法優(yōu)于FTA常規(guī)提取方法,圖譜RFU值為1000~2000,采用自動(dòng)化工作站運(yùn)行該提取程序較手工操作DNA分型圖譜均衡性更佳;采用FTA常規(guī)提取方法檢測(cè),圖譜RFU值100~2000,小片段優(yōu)先擴(kuò)增現(xiàn)象明顯,且有19%的樣本出現(xiàn)丟峰現(xiàn)象,采用自動(dòng)化工作站運(yùn)行該程序?qū)ζ浣Y(jié)果改善不明顯。經(jīng)工作站運(yùn)行FTA-DNA直接提取法自動(dòng)程序及10μl體系檢測(cè)本2萬(wàn)余份FTA卡采集的血樣,均獲得16個(gè)STR基因座DNA分型結(jié)果。結(jié)論本文建立的FTA-DNA直接提取法適用于FTA卡血樣自動(dòng)化DNA建庫(kù)。

【參考文獻(xiàn)】

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