【摘要】：目的比較Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜法3種DNA提取法在污染嚴(yán)重混合斑分型中的應(yīng)用效果。方法從日常案例中收集污染嚴(yán)重的混合斑25份,差異消化法分離精子后同時用Chelex-100法、酚/氯仿法和二氧化硅膜技術(shù)3種方法提取DNA,采用PCR-STR技術(shù)對D19S253、FGA和CSF1PO 3個基因座進(jìn)行分型,Gel-Pro軟件處理電泳圖譜,SPSS軟件分析比較不同方法之間的差異。結(jié)果采用Chelex-100法提取DNA,25份檢材分型結(jié)果均未成功;采用酚/氯仿法,25份檢材中10份分型成功,3份檢材FGA和CSF1PO基因座可分型,4份檢材CSF1PO基因座可分型;采二氧化硅膜純化法,25份檢材均成功分型;酚/氯仿法和二氧化硅膜法兩種方法比較,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。結(jié)論二氧化硅膜純化技術(shù)可以有效去除PCR抑制物,提取的DNA擴(kuò)增效果明顯優(yōu)于Chelex-100法和酚/氯仿法,具有較高的應(yīng)用價值。
[Abstract]:Objective to compare the application effect of Chelex-100 method, phenol / chloroform method and silica membrane method in the classification of seriously polluted mixed spot. Methods Twenty-five samples of seriously polluted mixed spots were collected from daily cases. Sperm were separated by differential digestion and Chelex-100 was used at the same time. DNA, was extracted by phenol / chloroform method and silica membrane technique. Three genotypes of D19S253FGA and CSF1PO were classified by PCR-STR technique. The electrophoretic patterns were processed by Gel-Pro software and the differences between different methods were analyzed and compared by SPSS software. Results the typing results of DNA,25 samples extracted by Chelex-100 method were not successful, 10 of 25 samples were successfully typed by phenol / chloroform method, 3 samples were genotyped by FGA and CSF1PO loci, and 4 samples by CSF1PO loci. Silica membrane purification method, 25 samples were successfully classified; phenol / chloroform method and silica membrane method were compared, the results showed significant difference (P0.05). Conclusion silica membrane purification technique can effectively remove PCR inhibitor, and the amplification effect of DNA extracted is better than that of Chelex-100 and phenol / chloroform method.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系 河南科技大學(xué)法醫(yī)學(xué)院 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系
【分類號】：D919

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2280718