中巴法醫(yī)昆蟲種類研究—側(cè)重麗蠅及其分子鑒定
發(fā)布時(shí)間:2018-04-28 22:06
本文選題:中巴 + 法醫(yī); 參考:《浙江大學(xué)》2009年博士論文
【摘要】: 近些年來越來越多的昆蟲學(xué)證據(jù)被應(yīng)用于司法實(shí)踐中,特別是在刑事案件偵破和法庭審判中起著不可低估的作用。全面了解特定地區(qū)尸體上昆蟲的種類,掌握快速準(zhǔn)確的鑒定技術(shù)以及環(huán)境因素對(duì)昆蟲種類的影響是正確利用這些昆蟲進(jìn)行法醫(yī)鑒定的基礎(chǔ),是法醫(yī)昆蟲學(xué)研究的重要內(nèi)容。 本論文分別調(diào)查分析了中國(guó)和巴基斯坦兩國(guó)代表性區(qū)域法醫(yī)昆蟲的種類與種群演替規(guī)律,以及巴基斯坦傳統(tǒng)節(jié)日—宰牲節(jié)對(duì)法醫(yī)昆蟲種類等的影響,并對(duì)杭州華家池重要類群麗蠅的分子鑒定技術(shù)進(jìn)行了研究。 中國(guó)杭州華家池周圍的蠅類(雙翅目:Diptera)調(diào)查結(jié)果表明:(1)華家池共有蠅類法醫(yī)昆蟲12種,其中麗蠅科Calliphoridae7種,分別為大頭金蠅Chrysomyamegacephala(Fabricius)、肥軀金蠅Ch.pinguis(Walker)、巨尾阿麗蠅Aldrichinagrahami(Aldrich)、絲光綠蠅Lucilia sericata(Meigen)、紫綠蠅L.porphyrina(Walker)、亮綠蠅L.illustris(Meigen)和瘦葉帶綠蠅Hemipyrellia,igurriens(Wiedemann);麻蠅科Sarcophagidae一種,即肥須亞麻蠅Parasarcophagacrassipalpis(Macquart);蠅科Muscidae 4種,即家蠅Musca domestica(Linnaeus)、Musca sp.、Fannia sp.、Ophyra sp.;(2)大頭金蠅是唯一全年都可以誘集到的種群,而且該種蟲口數(shù)量占絕對(duì)的優(yōu)勢(shì),而紫綠蠅蟲口數(shù)量最小;(3)2007年1月至2008年12月的調(diào)查結(jié)果顯示,麗蠅科7個(gè)種類、肥須亞麻蠅和家蠅的蟲口數(shù)量在冬季均明顯偏低,并且一月份只誘集到了大頭金蠅和家蠅兩種,二月份誘集到大頭金蠅、肥軀金蠅、巨尾阿麗蠅、家蠅等四種,三月份誘集到了大頭金蠅、肥軀金蠅、巨尾阿麗蠅、絲光綠蠅、亮綠蠅、肥須亞麻蠅、家蠅等7種;同時(shí),統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明蟲口數(shù)量在這些月份之間沒有顯著差異,但冬夏種群蟲口數(shù)量差異顯著。 鑒于麗蠅幼期種類在形態(tài)上難以區(qū)分,本研究以華家池采集的麗蠅為材料,選用來自線粒體基因組的COⅠ、CYTB和ND5以及核糖體基因組的ITS1和ITS2共5個(gè)基因片段做分子標(biāo)記,對(duì)麗蠅種類的分子鑒定進(jìn)行了探索性研究。從7種麗蠅17個(gè)標(biāo)本中擴(kuò)增得到了75條基因序列并提交到GenBank。結(jié)果表明COⅠ、Cytb、ND5和ITS2可作為麗蠅種間分子鑒定的分予標(biāo)記。ITS1序列可以作為麗蠅同屬分子鑒定的分子標(biāo)記。同時(shí),研究比較了28對(duì)蠅(包括麗蠅、家蠅)5個(gè)基因位點(diǎn)的種間差異。結(jié)果表明:在麗蠅中,(1)ITS1的種內(nèi)序列差異度為0.29-1.16%,而在種間水平上差異顯著,為7.8-57.3%,表明ITS1能夠用來進(jìn)行同屬內(nèi)近緣種類鑒定;(2)ITS2的種間差異度為1.2-19%,表明該序列能夠用于種的鑒別,但在姊妹中則可能出錯(cuò);(3)COI序列的種內(nèi)差異度在2.2-10.4%之間,也顯示在姊妹種的鑒定上可能會(huì)錯(cuò);(4)另一方面,CYTB和ND5序列種間分歧度分別為5.2-15.4%,4.5-12.4%,表明這兩個(gè)序列均可成功用于種的鑒定。在麗蠅和家蠅組合中,(1)ITS2有30-35.2%的科間序列差異度,從而證明可作為最重要的基因標(biāo)記用于科級(jí)水平的鑒定;(2)COⅠ的序列差異度10.3-13.5%表明在麗蠅科、家蠅科和某些麗蠅科內(nèi)種類之間(10.4%)不能明顯地區(qū)分;(3)CYTB序列的科間差異度12.5-16.7%也說明該序列在科技水平上不能明顯區(qū)分;(4)但ND5序列的科間差異度16-17%則說明在可用于科級(jí)水平的鑒定;(5)結(jié)果還證明CO1、CYTB、ND5和ITS2等基因在鑒別麗蠅的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系中也很有用;(6)基于自己獲得的基因序列以及GenBank中獲得的分子數(shù)據(jù),還推算了麗蠅科種類的演化關(guān)系。總之,ITS1序列具有低的種內(nèi)和高的種間差異度,可望用于近緣種的區(qū)分;ND5可用于麗蠅不同地理種群的鑒別;ITS2和ND5均表現(xiàn)出科級(jí)水平的差異顯著,COⅠ和ITS2序列分析表明,麗蠅科和家蠅科大約于20-50 MYA形成不同的進(jìn)化分支。 在巴基斯坦穆斯林傳統(tǒng)節(jié)日—宰牲節(jié)期間,大量動(dòng)物尸體殘留物拋棄在外,從而引起尸食類昆蟲的大量繁殖,而目前尚無脊椎動(dòng)物在戶外垃圾場(chǎng)的降解以及與疾病傳播方面的研究報(bào)道。本文以巴基斯坦一個(gè)典型鄉(xiāng)鎮(zhèn)為代表,2008年首次對(duì)宰牲節(jié)期間產(chǎn)生的血坑、肉、皮毛和骨頭等14處場(chǎng)所進(jìn)行了調(diào)查,共發(fā)現(xiàn)35種昆蟲,其中腐肉上面發(fā)現(xiàn)的種類和數(shù)量最多;首次分析研究了分別來自巴基斯坦D.I.Khan城和Rawalpindi城宰牲節(jié)期間紅顏金蠅Ch.rufifacies種群的COⅠ、COⅡ和ITS2基因序列,并加以對(duì)比分析,發(fā)現(xiàn)兩個(gè)城市不同個(gè)體的紅顏金蠅的分子序列分析完全相同。同時(shí),在宰牲節(jié)期間的調(diào)查也發(fā)現(xiàn)牲畜交易過程提高了蠅蛆病的傳播效率,兩個(gè)城市的紅顏金蠅不同個(gè)體分子序列分析沒有差異的結(jié)果暗示了大量的動(dòng)物貿(mào)易可能會(huì)攜帶并傳播一些重要的蠅類,從而導(dǎo)致蠅類種群擴(kuò)散。另外,還討論了宰牲節(jié)對(duì)法醫(yī)鑒定產(chǎn)生的深遠(yuǎn)影響。
[Abstract]:In recent years , more and more of the evidence has been applied to judicial practice , especially in the investigation of criminal cases and in court trials . It is important to understand the kinds of insects on the corpse of a particular area , to master the rapid and accurate identification technology and the influence of environmental factors on the kinds of insects .
In this paper , the species and population succession of forensic insects in the representative regions of China and Pakistan were analyzed , and the influence of traditional festival - Eid al - Eid on the types of forensic insects was analyzed .
The results showed that ( 1 ) There were 12 species of Muscidae : ( Walker ) , Aldrichinagrahami ( Walker ) , Lucilia capitata ( Meigen ) , Liriomyza rufiichinagrahami ( Walker ) , Myurriens ( Wiedemann ) , Musca domestica , Musca sp . , Fannia sp . , Ophyra sp . ( 2 ) The number of adult flies is the only one which can be lured into the whole year , and the number of the insect ports accounts for the absolute advantage , and the number of the insect ports is the smallest .
The results showed that : ( 1 ) The interspecies diversity of ITS2 was between 2.2 and 10.4 % , which showed that ITS1 could be used in identification of species . ( 4 ) The difference between species in the sequence of cytb and ND5 was between 2.2 and 10.4 % , indicating that ITS1 could be used in identification of species level . ND5 can be used for the identification of different geographical populations of Liriomyza riomyza ; both ITS2 and ND5 show significant differences in the level of science , and the analysis of CO 鈪,
本文編號(hào):1817075
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