本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管電泳技術(shù)在酶分析及毒品靈敏檢測中的應(yīng)用研究

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【摘要】：由于分離效率高,分析速度快,試劑與樣品消耗量少,并且可以與多種檢測手段連用等獨(dú)特優(yōu)點(diǎn),毛細(xì)管電泳技術(shù)(CE)已經(jīng)逐漸發(fā)展成為酶分析的重要工具,并廣泛應(yīng)用于幾乎所有酶分析的研究領(lǐng)域。另一方面,由于CE操作簡單,成本低廉,高效快速且實(shí)用性強(qiáng),近年來在毒品的痕量檢測方面受到越來越廣泛的關(guān)注。本論文中,作者開展了CE在以上兩個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用研究。論文第一部分工作針對丙氨酸消旋酶(Ala R)的催化消旋反應(yīng),建立一個(gè)基于連續(xù)自動(dòng)進(jìn)樣-膠束電動(dòng)色譜技術(shù)的新型在線酶分析方法。利用穿過樣品池的兩根相隔5?m的毛細(xì)管,依據(jù)氨基酸的柱上快速衍生擴(kuò)散,通過自動(dòng)控制分離電壓的開關(guān),實(shí)現(xiàn)了準(zhǔn)確的在線連續(xù)進(jìn)樣及分析;同時(shí),利用膠束電動(dòng)色譜實(shí)現(xiàn)了酶反應(yīng)過程中的手性丙氨酸對映體(底物和產(chǎn)物)的高效分離和靈敏監(jiān)測。利用該方法分別測定了D-Ala→L-Ala和L-Ala→D-Ala反應(yīng)的米氏常數(shù)。該工作推進(jìn)了CE在線酶分析的研究,為高效、準(zhǔn)確檢測酶活性和酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究提供了新方法。此外,實(shí)驗(yàn)中獲得的酶活性和酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)信息,對了解Ala R的代謝功能以及臨床診斷和應(yīng)用具有重要意義。論文第二部分工作旨在發(fā)展基于毛細(xì)管電泳技術(shù)的先進(jìn)分離分析方法,針對毒品進(jìn)行有效、快速、準(zhǔn)確的分析檢測,對于涉毒等相關(guān)犯罪活動(dòng)的防范與偵破提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)通過結(jié)合毛細(xì)管電泳分析與場放大進(jìn)樣(FASI)和固相萃取(SPE)的優(yōu)勢,提高了毒品檢測的靈敏度。實(shí)驗(yàn)室自制的毛細(xì)管固相萃取柱實(shí)現(xiàn)了微量毒品的有效富集與凈化,富集后的分析物洗脫液再通過毛細(xì)管電泳場放大進(jìn)樣,進(jìn)一步富集并分離與檢測。實(shí)驗(yàn)中以C18萃取劑填充到已拉伸尖端的毛細(xì)管中作為固相萃取柱,以兩種常見毒品麻黃堿和甲基安非他明為分析對象,考察該分析方法的可行性與富集效果。
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：O658.9;D918.9

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本文編號：1270118