本文關(guān)鍵詞：采用流式細(xì)胞術(shù)分析過敏性休克大鼠嗜堿性粒細(xì)胞活化試驗(yàn)

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【摘要】：目的應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測過敏性休克大鼠血中嗜堿性粒細(xì)胞CD63的表達(dá)，確定過敏性休克時(shí)嗜堿性粒細(xì)胞的活化情況，探討FCM及嗜堿性粒細(xì)胞活化試驗(yàn)（BAT）在過敏性休克診斷中的應(yīng)用價(jià)值。 方法40只Wistar-Hokkaido大鼠，雌雄不限，體重200～220g。將40只大鼠隨機(jī)分為對照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組包括致敏不激發(fā)組、過敏性休克死亡組、過敏性休克死后12h組、過敏性休克死后24h組，每組8只。采用卵蛋白腹腔注射建立過敏性休克大鼠動(dòng)物模型，在休克死亡后的不同時(shí)間點(diǎn)提取各組大鼠右心室血及其肺組織。用三色免疫熒光標(biāo)記流式細(xì)胞技術(shù)和CD63/CD45/CD203c組合抗體檢測各組大鼠血嗜堿性粒細(xì)胞活化情況。以CD45和CD203c聯(lián)合設(shè)門，CD63作為嗜堿性粒細(xì)胞活化標(biāo)志物，檢測各組大鼠血液中嗜堿性粒細(xì)胞表面CD63表達(dá)率，以代表各組大鼠血嗜堿性粒細(xì)胞的活化情況。提取的肺組織于10%的中性甲醛固定，，石蠟切片，常規(guī)HE染色，并采用免疫熒光染色法觀察各組大鼠肺組織CD63的表達(dá)情況，BI-2000病理圖像分析儀對圖像進(jìn)行分析，并采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果（1）過敏性休克死亡組CD63的表達(dá)率為17.341±2.044%，休克死亡后12h組CD63的表達(dá)率為13.631±2.199%，休克死亡后24h組CD63的表達(dá)率為12.236±1.646,對照組CD63表達(dá)率為1.423±0.383%，致敏不激發(fā)組CD63表達(dá)率為1.465±0.337%。結(jié)果表明，過敏性休克死亡組、休克死亡后12h組、休克死亡后24h組CD63的表達(dá)率均明顯高于對照組（P=0.000,P0.01），其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。致敏不激發(fā)組與對照組相比，結(jié)果沒有顯著性差異。而實(shí)驗(yàn)組中休克死亡組CD63表達(dá)率最高，隨著死后經(jīng)過時(shí)間的延長CD63的表達(dá)率逐漸降低。（2）免疫熒光染色法在顯微鏡下觀察到CD63的陽性染色為綠色，觀察到過敏性休克組都有CD63的表達(dá)，說明嗜堿性粒細(xì)胞發(fā)生活化，且隨著時(shí)間的延長，陽性染色逐漸減少。 結(jié)論 （1）大鼠過敏性休克時(shí)血嗜堿性粒細(xì)胞存在異�；罨�。 （2）CD63可作為I型過敏反應(yīng)中嗜堿性粒細(xì)胞特異性激活標(biāo)志物，為過敏性疾病的診斷提供輔助的檢測指標(biāo)。 （3）嗜堿性粒細(xì)胞活化試驗(yàn)有望作為過敏反應(yīng)體內(nèi)試驗(yàn)的補(bǔ)充，為臨床診斷及法醫(yī)學(xué)鑒定過敏性休克提供新的方法和途徑。
【關(guān)鍵詞】：過敏性休克 嗜堿性粒細(xì)胞活化試驗(yàn) 流式細(xì)胞術(shù) CD63 CD203c
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：D919.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮略語9-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-15
• 結(jié)果15-18
• 討論18-21
• 小結(jié)21-22
• 附圖22-23
• 參考文獻(xiàn)23-26
• 綜述26-33
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 個(gè)人簡介33-34
• 致謝34

【參考文獻(xiàn)】

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1 徐

本文編號：1125377