本文關鍵詞：海藻酸鈉—聚陽離子微膠囊腹腔移植被包裹規(guī)律及其影響因素的研究

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【摘要】：微囊化細胞移植被認為是一種可行的治療手段,已經(jīng)用于I型糖尿病治療、內(nèi)分泌器官切除術(shù)后激素支持治療、心肌梗死后心肌康復的輔助治療,以及半月板受傷后促進半月板再生治療。微膠囊移植后面臨的最大問題之一是微膠囊表面被宿主包裹,阻礙微囊化細胞氧氣和養(yǎng)料的供給,導致微囊化細胞移植有效治療時間縮短的現(xiàn)狀。研究人員試圖通過純化微膠囊材料和優(yōu)化微膠囊表面性質(zhì)來減少微膠囊在體內(nèi)被包裹的現(xiàn)象來延長微膠囊體內(nèi)移植治療的有效時間,但是收效甚微。本論文主要通過研究海藻酸鈉-聚陽離子微膠囊腹腔移植后被宿主包裹和排斥的規(guī)律、進而揭示微膠囊被宿主包裹影響因素、同時考察微膠囊移植的安全性。首先本論文在研究宿主排斥規(guī)律之前,以高純度海藻酸鈉-聚賴氨酸-海藻酸鈉(APA)和海藻酸鈉-殼聚糖-海藻酸鈉(ACA)做為海藻酸鈉-聚陽離子微膠囊研究模型,以肝癌細胞系HepG2、干細胞MSC為模式細胞,考查微膠囊移植入C57BL/6小鼠腹腔研究微膠囊移植的安全性。結(jié)果證明空微膠囊、載細胞微膠囊、二次移植載細胞微膠囊、和移植泄漏載細胞微膠囊的移植均未產(chǎn)生系統(tǒng)炎性反應、免疫毒性、肝腎毒性。其次,本論文以APA和ACA為研究模型,研究了微囊在體內(nèi)被宿主包裹的規(guī)律及其相應時間點宿主排斥微囊的規(guī)律。實驗結(jié)果證明微膠囊被宿主包裹第1d開始,至第14d進入穩(wěn)定期,被宿主包裹數(shù)量不再變化；C57BL/6小鼠細胞排斥反應最高期出現(xiàn)在移植后第1d,炎性因子反應最高期出現(xiàn)在移植后第7d,整體排斥反應至14d基本消退。之后,本論文進一步深入研究微膠囊體被宿主包裹的影響因素,主要分析了炎性細胞、炎性因子和移植體積對微囊被宿主包裹的影響。多因素相關分析結(jié)果顯示淋巴細胞、IL-6與游離微膠囊的回收率負相關,淋巴細胞、巨噬細胞、IL-6、IL-10和MCP-1與微膠囊表面被包裹的程度正相關；移植劑量與游離微膠囊回收率正相關,與微膠囊表面被包裹的程度負相關,并給出計算公式。結(jié)果說明炎性反應促進微膠囊被宿主包裹,移植劑量抑制微膠囊被宿主包裹。最后本論文根據(jù)以上結(jié)果對微膠囊移植被包裹程度進行優(yōu)化,具體選用了短期使用糖皮質(zhì)激素潑尼松抗炎、微膠囊化干細胞移植抗炎、醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉凝膠共移植抗粘連三種優(yōu)化方法。這三種方法提高了游離微膠囊回收率,降低游離微膠囊細胞包裹率,為微囊化細胞移植找到了三種有潛力的優(yōu)化方法。本論文為微膠囊移植提供理論基礎和為微膠囊的抗粘連方法研究提供新的視角,并且為微囊化細胞移植治療指出更有潛力的應用空間。
【關鍵詞】：微膠囊 移植 細胞粘附 移植劑量 炎性反應
【學位授予單位】：大連理工大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R457.7
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-19
• 縮略表19-20
• 1 緒論20-39
• 1.1 引言20
• 1.2 微囊化細胞移植現(xiàn)狀20-29
• 1.2.1 器官移植的簡介20
• 1.2.2 器官移植存在的問題20-21
• 1.2.3 細胞移植的引入21
• 1.2.4 異體移植的缺點21
• 1.2.5 微囊化細胞移植技術(shù)21-22
• 1.2.6 微囊化細胞移植技術(shù)的應用范圍22-25
• 1.2.7 微囊化細胞細胞治療主要移植位置25-27
• 1.2.8 微囊化細胞移植治療的缺點27-29
• 1.3 微膠囊類材料體內(nèi)移植安全性評價29-32
• 1.3.1 全身毒性實驗29
• 1.3.2 植入后局部反應實驗29-30
• 1.3.3 皮膚刺激實驗30
• 1.3.4 全身致敏實驗30-31
• 1.3.5 遺傳毒性31
• 1.3.6 致癌性實驗31-32
• 1.3.7 生殖和發(fā)育毒性實驗32
• 1.3.8 免疫毒性實驗32
• 1.4 宿主排斥移植物的主要方式32-36
• 1.4.1 超急性排斥反應33-34
• 1.4.2 急性血管排斥反應34
• 1.4.3 急性細胞排斥反應34-35
• 1.4.4 慢性排斥反應35-36
• 1.5 論文研究思路與內(nèi)容36-39
• 1.5.1 微囊化細胞移植存在問題36-37
• 1.5.2 研究思路與內(nèi)容37-39
• 2 微膠囊體內(nèi)移植的安全性的研究39-62
• 2.1 引言39
• 2.2 儀器與試劑39-41
• 2.2.1 儀器39-40
• 2.2.1 主要實驗材料和試劑40-41
• 2.2.3 細胞株41
• 2.3 實驗方法41-43
• 2.3.1 實驗動物的選擇、分組、飼養(yǎng)41
• 2.3.2 二次移植的實驗設計41
• 2.3.3 移植泄漏的實驗設計41
• 2.3.4 細胞培養(yǎng)41
• 2.3.5 空微膠囊、微囊化細胞制備方法41-42
• 2.3.6 微膠囊的植入和回收42
• 2.3.7 大體解剖和檢查42
• 2.3.8 血液中炎性細胞總數(shù)和分類檢測42
• 2.3.9 免疫毒性的評價42
• 2.3.10 肝腎毒性的評價42-43
• 2.3.11 HE染色法表征免疫器官組織學形態(tài)43
• 2.3.12 統(tǒng)計學分析方法43
• 2.4 實驗結(jié)果43-59
• 2.4.1 空微膠囊的安全性分析43-47
• 2.4.2 載細胞微膠囊安全性分析47-51
• 2.4.3 二次移植載細胞微膠囊安全性的評價51-55
• 2.4.4 載細胞微膠囊泄漏的安全性分析55-59
• 2.5 討論59-61
• 2.6 本章小結(jié)61-62
• 3 微膠囊移植后宿主排斥及其被包裹規(guī)律的研究62-77
• 3.1 引言62
• 3.2 儀器與試劑62-63
• 3.2.1 儀器62
• 3.2.2 主要實驗材料和試劑62-63
• 3.3 實驗方法63-65
• 3.3.1 實驗動物的選擇、分組、飼養(yǎng)63
• 3.3.2 APA/ACA空微膠囊制備方法63
• 3.3.3 微膠囊的植入和回收63
• 3.3.4 大體解剖和檢查63
• 3.3.5 腹腔灌洗液中白細胞總數(shù)和分類檢測63-64
• 3.3.6 腹腔灌洗液中微膠囊回收計算64
• 3.3.7 HE染色法表征被包裹微膠囊組織學形態(tài)64-65
• 3.3.8 統(tǒng)計學分析方法65
• 3.4 實驗結(jié)果65-73
• 3.4.1 宿主免疫排斥反應隨植入時間的變化規(guī)律65-70
• 3.4.2 不同種類微膠囊被宿主包裹的規(guī)律70-73
• 3.5 討論73-75
• 3.6 本章小結(jié)75-77
• 4 微膠囊被宿主包裹的影響因素研究77-91
• 4.1 引言77
• 4.2 儀器與試劑77-79
• 4.2.1 儀器77-78
• 4.2.2 主要實驗材料和試劑78-79
• 4.3 實驗方法79-81
• 4.3.1 實驗動物的選擇、分組、飼養(yǎng)79
• 4.3.2 ACA空微膠囊制備方法79
• 4.3.3 蛋白吸附測定79
• 4.3.4 親水性測定79
• 4.3.5 XPS表面分析79-80
• 4.3.6 不同炎癥模型的實驗設計方法80
• 4.3.7 不同微膠囊劑量移植實驗設計方法80
• 4.3.8 微膠囊的植入和回收80
• 4.3.9 腹腔灌洗液中白細胞總數(shù)和分類檢測80
• 4.3.10 腹腔灌洗液中微膠囊回收計算80
• 4.3.11 統(tǒng)計學分析方法80-81
• 4.4 實驗結(jié)果81-86
• 4.4.1 炎性細胞和細胞因子對微膠囊被宿主包裹程度的影響81-85
• 4.4.2 微膠囊移植劑量對微膠囊被宿主包裹程度的影響85-86
• 4.5 討論86-90
• 4.6 本章小結(jié)90-91
• 5 微膠囊被宿主包裹的優(yōu)化實驗91-105
• 5.1 引言91
• 5.2 儀器與試劑91-93
• 5.2.1 儀器91-92
• 5.2.2 主要實驗材料和試劑92-93
• 5.2.3 細胞株93
• 5.3 實驗方法93-94
• 5.3.1 實驗動物的選擇、分組、飼養(yǎng)93
• 5.3.2 糖皮質(zhì)激素抗微膠囊包裹的實驗設計93
• 5.3.3 透明質(zhì)酸鈉凝膠抗微膠囊包裹的實驗設計93
• 5.3.4 微膠囊化APA-MSC抗微膠囊包裹的實驗設計93-94
• 5.3.5 細胞培養(yǎng)94
• 5.3.6 空微膠囊、微囊化細胞制備方法94
• 5.3.7 微膠囊的植入和回收94
• 5.3.8 腹腔灌洗液中白細胞總數(shù)和分類檢測94
• 5.3.9 腹腔灌洗液中微膠囊回收計算94
• 5.3.10 HE染色法表征被包裹微膠囊組織學形態(tài)94
• 5.3.11 統(tǒng)計分析方法94
• 5.4 實驗結(jié)果94-102
• 5.4.1 減少宿主局部炎癥反應的優(yōu)化實驗95-97
• 5.4.2 調(diào)節(jié)宿主局部炎癥反應的優(yōu)化實驗97-99
• 5.4.3 減少微膠囊與腹膜接觸面積的優(yōu)化實驗99-102
• 5.5 討論102-103
• 5.6 本章小結(jié)103-105
• 6 結(jié)論與展望105-108
• 6.1 結(jié)論105-106
• 6.2 創(chuàng)新點摘要106
• 6.3 展望106-108
• 參考文獻108-122
• 作者簡介122
• 攻讀博士學位期間科研項目及科研成果122-124
• 致謝124

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5 田茵;微膠囊的制備及藥物應用[J];衛(wèi)生殺蟲藥械;2000年01期

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1 沈[;微膠囊懸浮劑推動農(nóng)藥更新?lián)Q代[N];中國化工報;2003年

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3 劉國信;微膠囊化技術(shù)有益食品業(yè)[N];中國化工報;2001年

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