本文關鍵詞：膝骨關節(jié)炎與正常人血漿microRNA表達差異研究

  更多相關文章： 治未病 microRNA 骨關節(jié)炎 血漿 表達

【摘要】：1研究目的：基于中醫(yī)治未病的理論體系,通過對膝骨關節(jié)炎與正常人血漿microRNA異常表達的研究,篩選出膝骨關節(jié)炎與正常人血漿表達差異的microRNA,將其用于膝骨關節(jié)炎的早期診斷,或者膝骨關節(jié)炎的預后判斷,給中醫(yī)治未病理論提供新的觀點方法。2研究方法：納入中國中醫(yī)科學院望京醫(yī)院關節(jié)一科門診13例原發(fā)膝骨關節(jié)炎的志愿者血漿和13例沒有任何遺傳家族病史及健康人的血漿,將獲取的血漿樣本送于華大基因(BGI)深圳華大基因科技服務有限公司處理后進行RNA提取工作,通過目前最先進的RT-PCR方法,采用新一代HiSeq高通量測序技術對樣品中的microRNA做數(shù)字化精確性分析,分析檢測篩選各標本中microRNA;篩選出的表達差異的microRNA,繪制出實驗樣品間的microRNA的分散圖。為取得我們所需要的可信分子序列,本次實驗需要對初始數(shù)據(jù)材料做去除接頭、去污染序列及去低質(zhì)量序列的相關處理。再對該可信任的分子序列進行RNA序列長度分布統(tǒng)計和樣本間公共序列的統(tǒng)計。根據(jù)篩選條件fold change值1且差異性明顯P值0.01,具有統(tǒng)計意義,對兩組血漿進行比較篩選出潛在的骨關節(jié)炎致病基因。3研究結(jié)果：在各組的microRNA表達差異研究對比發(fā)現(xiàn),在原發(fā)膝骨關節(jié)炎患者血漿中存在很多microRNA中高表達。而這些存在差異表達的microRNA,正是本次實驗需要篩選出來,根據(jù)統(tǒng)計學,篩選條件fold change值1且差異性明顯P值0.01,具有統(tǒng)計意義,經(jīng)過實驗的篩選測序,發(fā)現(xiàn)其中僅hsa-miR-378c、hsa-miR-1268a、hsa-miR-483-5p、 hsafmiR-375和hsa-miR-1275為符合條件的microRNA,在膝骨關節(jié)炎血漿中高表達。4結(jié)論：在所有檢測樣品標本已知microRNA中,在fold change值1且P值0.01的條件下,共計篩選出5中microRNA,這5種microRNA分別是hsa-miR-378c、hsa-miR-1268a、 hsa-mi R-483-5p、hsa-miR-375和hsa-miR-1275在原發(fā)骨關節(jié)炎患者血漿中表達量明顯升高,本次實驗研究提示我們這5種microRNA為膝骨關節(jié)炎發(fā)病的潛在致病基因。此實驗結(jié)果可以為膝骨關節(jié)炎的早期診斷及預后提供新的技術,為中醫(yī)治未病提供全新的依據(jù)。
【關鍵詞】：治未病 microRNA 骨關節(jié)炎 血漿 表達
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R274.9
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 第一部分 文獻綜述9-30
• 綜述一 中醫(yī)“治未病”思想9-21
• 1 中醫(yī)對膝痹病的認識10-11
• 2 中醫(yī)對膝痹病的分型11-12
• 3 中醫(yī)對膝痹病的治療12-16
• 4 中醫(yī)體質(zhì)對膝骨關節(jié)炎的運用16-19
• 參考文獻19-21
• 綜述二 膝骨關節(jié)炎的西醫(yī)診療現(xiàn)狀21-30
• 1 膝骨關節(jié)炎的標記物研究22-23
• 2 microRNA在膝骨關節(jié)炎發(fā)病中具有重要的作用23-24
• 3 microRNA的測序技術24-25
• 4 循環(huán)microRNA有可能成為膝骨關節(jié)炎標記物的新希望25-27
• 參考文獻27-30
• 第二部分 臨床研究30-45
• 前言30-31
• 臨床資料31-35
• 1 實驗目的31
• 2 實驗方法31
• 3 病例選擇31-32
• 4 樣品RNA準備32-33
• 5 樣本間microRNA序列表達差異分析33-34
• 6 實驗分析34-35
• 研究結(jié)果35-37
• 1 microRNA長度分布統(tǒng)計35
• 2 目標microRNA篩選35-37
• 討論37-40
• 1 關于膝骨關節(jié)炎與中醫(yī)治未病37
• 2 microRNA在膝骨關節(jié)炎中作用37-40
• 結(jié)語40-41
• 1 研究結(jié)論40
• 2 問題與展望40-41
• 參考文獻41-45
• 附錄45-53
• 致謝53-54
• 個人簡歷54

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