本文關(guān)鍵詞：桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的物質(zhì)基礎(chǔ)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)分析桂枝、附子以及桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍灌胃后膠原關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠的血清移行成分,考察造模對含藥血清制備的影響,進(jìn)一步探討桂枝附子配伍灌胃后的入血物質(zhì)基礎(chǔ)以及配伍環(huán)境的相互作用,從而為桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍抗RA提供理論依據(jù)。方法:實(shí)驗(yàn)分為含藥血清制備方案的確立和桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍的入血物質(zhì)基礎(chǔ)研究兩個部分。第一部分實(shí)驗(yàn)將雄性Wistar大鼠35只隨機(jī)平均分為正常組、單倍劑量組、5倍劑量組、10倍劑量組和20倍劑量組,每組7只。分別采用單倍、5倍、10倍、20倍的給藥劑量予桂枝附子配伍灌胃給藥,正常組予生理鹽水灌胃。分別于給藥后15min、30min、60min、90min、120min、180min、240min肝門靜脈取血,采用甲醇沉淀法、乙腈沉淀法、三氯乙酸沉淀法以及乙酸乙酯沉淀法對血清進(jìn)行處理,予高效液相色譜法(HPLC)對血清進(jìn)行檢測分析,以分離度好、靈敏性高以及檢測峰數(shù)量盡可能多的制備方法為最終的含藥血清制備方案。第二部分實(shí)驗(yàn)將雄性Wistar大鼠25只隨機(jī)取6只分為正常組、桂枝附子組,每組各3只,其余大鼠采用Ⅱ型膠原造模。將造模成功的CIA大鼠隨機(jī)平均分為模型組、造模桂枝組、造模附子組、造模桂枝附子組。按照第一部分實(shí)驗(yàn)確定的含藥血清制備方案,予20倍給藥劑量灌胃給藥,正常組和模型組大鼠予生理鹽水灌胃,60min后經(jīng)肝門靜脈取血,采用甲醇沉淀法處理血清,予液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)對其進(jìn)行分析。通過將含藥血清與相同條件下測定的模型組血清、正常組血清、供試品以及對照品圖譜比較,分析大鼠給藥后血清中的移行成分,考察桂枝附子配伍灌胃后的入血物質(zhì)基礎(chǔ)以及配伍環(huán)境的相互作用,分別建立桂枝、附子及桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍的入血指紋圖譜。結(jié)果:(1)桂枝附子組含藥血清中產(chǎn)生了10個移行成分,均為代謝產(chǎn)物;(2)造模桂枝組的含藥血清中產(chǎn)生了10個移行成分,其中1個為原形成分,9個為代謝產(chǎn)物;(3)造模附子組含藥血清產(chǎn)生了9個移行成分,其中2個為原形成分,7個為代謝產(chǎn)物;(4)造模桂枝附子組含藥血清產(chǎn)生了25個移行成分,其中8個為原形成分,17個為代謝產(chǎn)物。結(jié)論:(1)研究顯示造模后大鼠的含藥血清中移行成分增加明顯,成分濃度也較高。由此可見,CIA大鼠病理模型對含藥血清制備具有一定的影響。(2)CIA大鼠予桂枝附子配伍灌胃后的血清中一共產(chǎn)生了25個移行成分,其中8個為原型成分,17個為代謝產(chǎn)物。這些化合物有可能成為桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。(3)桂枝附子配伍灌胃后的血中移行成分多于單用桂枝和單用附子灌胃后血中移行成分之和,有的成分只有在桂枝附子配伍的情況下才能被機(jī)體吸收,由此可見桂枝附子配伍促進(jìn)了機(jī)體對有效物質(zhì)的吸收。這不僅為桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍灌胃后含藥血清中的移行成分分析奠定了基礎(chǔ),也為方劑配伍規(guī)律的研究提供了思路與方法。
【關(guān)鍵詞】：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 桂枝附子 含藥血清 LC-MS 物質(zhì)基礎(chǔ)
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 符號與說明10-11
• 前言11-12
• 第一部分 確立含藥血清的制備方案12-30
• 材料與方法12-19
• 結(jié)果19-28
• 討論28-29
• 結(jié)論29-30
• 第二部分 探討桂枝附子溫通經(jīng)脈配伍的入血物質(zhì)基礎(chǔ)30-69
• 方法30-32
• 結(jié)果32-61
• 討論61-68
• 結(jié)論68-69
• 參考文獻(xiàn)69-71
• 文獻(xiàn)綜述 桂枝附子配伍治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展71-89
• 參考文獻(xiàn)84-89
• 附錄89-93
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況93
• 參與科研情況93-94
• 致謝94

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本文編號：413353