本文關(guān)鍵詞：運(yùn)脾化濁法對(duì)血脂異常大鼠microRNA及其靶基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的基于血脂異常大鼠動(dòng)物模型,以化濁調(diào)脂方進(jìn)行干預(yù),利用生物信息學(xué)方法探討運(yùn)脾化濁法對(duì)血脂異常大鼠microRNA及其靶基因表達(dá)的影響。方法1.將84只雄性Wistar大鼠按體重隨機(jī)分為正常組(n=10)與高脂組(n=74),正常組大鼠給予普通飼料喂養(yǎng),高脂組大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng),4周后測(cè)量血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量。建立血脂異常大鼠模型后,以不同劑量化濁調(diào)脂1號(hào)方、化濁調(diào)脂2號(hào)方干預(yù)8周,普伐他汀鈉片、血脂康膠囊作為陽(yáng)性對(duì)照藥。2.提取大鼠肝臟組織miRNAs，F(xiàn)old-change篩選兩個(gè)樣品間(沒(méi)有重復(fù))的差異表達(dá)miRNAs(上調(diào)時(shí)Fold-change≥2.0,下調(diào)時(shí)Fold-change≤0.5)。利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)差異表達(dá)的miRNAs,篩選出與脂質(zhì)代謝關(guān)系密切的miRNAs,并預(yù)測(cè)得到相關(guān)靶基因。3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)miRNAs的表達(dá)。結(jié)果l.miRNA表達(dá)譜使用GenePix Pro 6.0提取芯片掃描圖像上的探針表達(dá)信息,經(jīng)篩選共得到700個(gè)miRNA信息。2.差異表達(dá)的miRNAs①高脂模型組大鼠肝臟差異表達(dá)的miRNAs:與普通組相比,血脂異常可以改變大鼠肝臟miRNA表達(dá)譜,其中10個(gè)miRNA上調(diào),42個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是mo-miR-342-5p,下調(diào)最明顯的是rno-miR-10a-3p。②普伐他汀鈉片對(duì)miRNA表達(dá)的影響：與高脂模型組相比,普伐他汀鈉片可以影響大鼠肝臟組織miRNA的表達(dá),使71個(gè)miRNA上調(diào),35個(gè)miRNA下調(diào)。其中上調(diào)最明顯的是rno-miR-10a-3p,與脂代謝密切相關(guān)的miRNA,如rno-miR-214-5p表達(dá)同樣上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-9a-5p,rno-miR-155-5p,rno-miR-148b-3p亦有明顯下調(diào)。③血脂康膠囊對(duì)miRNA表達(dá)的影響：與高脂模型組相比,血脂康膠囊可以影響大鼠肝臟組織miRNA的表達(dá),使93個(gè)miRNA上調(diào),76個(gè)miRNA下調(diào)。其中上調(diào)最明顯的是rno-miR-10a-3p,與脂代謝密切相關(guān)的miRNA,如rno-miR-214-5p,表達(dá)同樣明顯上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-184, rno-miR-155-5p、rno-miR-122-5p等也出現(xiàn)明顯的表達(dá)下調(diào)。④化濁調(diào)脂1號(hào)方對(duì)miRNA表達(dá)的影響：化濁調(diào)脂1號(hào)方可改變大鼠肝臟組織的miRNA表達(dá)譜,與高脂模型組相比,使53個(gè)miRNA上調(diào),24個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是rno-miR-10a-3p,rno-miR-214-5p、rno-miR-30b-5p也有明顯的上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-7a-1-3p,rno-miR-122-5p表達(dá)亦有明顯下調(diào)。與普伐他汀組相比,使42個(gè)miRNA上調(diào),69個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是rno-miR-9a-5p,no-miR-27b-3p、 rno-miR-148b-3p、rno-miR-30b-5p等亦出現(xiàn)明顯表達(dá)上調(diào)。下調(diào)最明顯的是mo-miR-471-3p,rno-miR-122-5p也有明顯表達(dá)下調(diào)。與血脂康組相比,使82個(gè)miRNA上調(diào),159個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是rno-miR-880-3p,rno-miR-148b-3p、 rno-miR-155-5p、rno-miR-30b-5p同樣明顯上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-193a-5p, rno-miR-33-3p亦出現(xiàn)明顯下調(diào)。⑤化濁調(diào)脂2號(hào)方對(duì)miRNA表達(dá)的影響：化濁調(diào)脂2號(hào)方可以改變大鼠肝臟組織的miRNA表達(dá)譜。與高脂模型組相比,運(yùn)脾化濁2號(hào)方使99個(gè)miRNA上調(diào),63個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是rao-miR-10a-3p,rno-miR-214-5p、rno-miR-30b-5p同樣明顯上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-184,而miR-155-5p也出現(xiàn)明顯下調(diào)。與普伐他汀組相比,運(yùn)脾化濁2號(hào)方使50個(gè)miRNA上調(diào),29個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是rno-miR-122-3p,rno-miR-30b-5p表達(dá)同樣明顯上調(diào)。下調(diào)最明顯的是rno-miR-1b,而rno-miR-155-5p表達(dá)也出現(xiàn)明顯下調(diào)。與血脂康組相比,運(yùn)脾化濁2號(hào)方使54個(gè)rniRNA上調(diào),45個(gè)miRNA下調(diào)。上調(diào)最明顯的是mo-miR-144-3p,rno-miR-30b-5p表達(dá)同樣明顯上調(diào)。下調(diào)最明顯的是mo-miR-193a-5p，，rno-miR-155-5p表達(dá)也明顯下調(diào)。3.miRNA靶基因預(yù)測(cè)①化濁調(diào)脂1號(hào)方組：將篩選出的差異表達(dá)較顯著的miRNAs:rno-miR-411-3 p、 rno-miR-329-3p、rno-miR-877、mo-miR-345-5p、rno-miR-30b-5p、rno-miR-20b-5p、 mo-miR-122-5p、mo-miR-214-5p等在數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行預(yù)測(cè),共檢測(cè)到miRNA相關(guān)的777個(gè)靶基因。②化濁調(diào)脂2號(hào)方組：將篩選出的差異表達(dá)較顯著的miRNAs:rno-miR-10a-3p、 rno-miR-147、rno-miR-142-3p、rno-miR-300-5p、rno-miR-125b-5p、mo-miR-324-3p、 rno-miR-199a-3p、mo-miR-340-5p、rno-miR-17-5p、mo-miR-339-5p、mo-miR-148b-3p、 rno-miR-184等在數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行預(yù)測(cè),共檢測(cè)到miRNA相關(guān)的1109個(gè)靶基因。③綜合預(yù)測(cè)結(jié)果,進(jìn)行GO/KEGG分析,篩選出PPARD、ABCG1及LDLR等3個(gè)與脂代謝密切相關(guān)的靶基因。4.PCR驗(yàn)證結(jié)果①rno-miR-155-5p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) ；② rno-miR-10a-3p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；③ rno-miR-214-5p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),P=0.013,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中,與高脂組比較,化濁調(diào)脂1號(hào)方組、2號(hào)方組表達(dá)明顯下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.008,0.014)；④ rno-miR-148b-3p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) ；⑤ rno-miR-33-3p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；但與高脂組比較,化濁調(diào)脂2號(hào)方組表達(dá)明顯下調(diào),P=0.028,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑥ rno-miR-33-5p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；⑦no-miR-122-5p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)下調(diào),P=0.048,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中,運(yùn)脾化濁1號(hào)方組與2號(hào)方組表達(dá)明顯下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.039,0.006)；⑧ rno-miR-30b-5p:與高脂組比較,各給藥組表達(dá)上調(diào),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) 。結(jié)論：1.血脂異常可以影響大鼠肝臟組織多種microRNA的表達(dá)；2.運(yùn)脾化濁法可以干預(yù)血脂異常大鼠肝臟組織多種microRNA的表達(dá)；3.運(yùn)脾化濁法對(duì)脂代謝的調(diào)節(jié)作用可能是通過(guò)抑制mo-miR-122-5p、rno-miR-33-3p的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究 miRANs調(diào)控網(wǎng)絡(luò) 血脂異常 運(yùn)脾化濁法
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R259
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 符號(hào)說(shuō)明12-13
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述13-29
• 綜述一 中醫(yī)復(fù)方治療血脂異常研究進(jìn)展及思考13-22
• 1. 血脂異常中醫(yī)病因病機(jī)13-14
• 2. 中藥復(fù)方治療血脂異常臨床研究14-16
• 2.1 經(jīng)典名方治療血脂異常臨床研究14-15
• 2.2 自擬經(jīng)驗(yàn)方治療血脂異常臨床研究15-16
• 3. 中醫(yī)復(fù)方治療血脂異常動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究16-17
• 4. 思考17-19
• 參考文獻(xiàn)19-22
• 綜述二 血脂異常中成藥配伍規(guī)律研究22-29
• 1. 材料與方法22-23
• 1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)22
• 1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)22
• 1.3 數(shù)據(jù)錄入及統(tǒng)計(jì)分析22
• 1.4 一般資料22-23
• 2. 結(jié)果23-25
• 2.1 血脂異常中成藥主治證候分布情況23
• 2.2 血脂異常中成藥常見(jiàn)藥物分析23-24
• 2.3 血脂異常中成藥藥對(duì)配伍規(guī)律分析24
• 2.4 血脂異常中成藥角藥配伍規(guī)律分析24-25
• 2.5 基于聚類(lèi)分析的血脂異常中成藥配伍規(guī)律研究25
• 3. 討論25-28
• 參考文獻(xiàn)28-29
• 前言29-30
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究30-88
• 一 實(shí)驗(yàn)材料30-32
• 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物30
• 2. 動(dòng)物飼料30
• 3. 實(shí)驗(yàn)藥物30
• 4. 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑30-32
• 二 實(shí)驗(yàn)方法32-39
• 1. 血脂異常大鼠模型構(gòu)建32
• 2. 藥物干預(yù)32-33
• 3. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程觀(guān)察33
• 4. 標(biāo)本取材、檢測(cè)指標(biāo)及檢測(cè)方法33-37
• 5. 統(tǒng)計(jì)方法37-39
• 三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-83
• 1. miRNA表達(dá)譜39
• 2. 差異表達(dá)的miRNAs39-69
• 3. 差異表達(dá)的miRNA靶基因預(yù)測(cè)結(jié)果69-72
• 4. PCR驗(yàn)證結(jié)果72-83
• 四 討論83-88
• 結(jié)語(yǔ)88-89
• 1. 結(jié)論88
• 2. 創(chuàng)新點(diǎn)88
• 3. 存在問(wèn)題與不足88-89
• 參考文獻(xiàn)89-93
• 致謝93-94
• 在學(xué)期間主要研究成果94

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳勇;劉巍;;microRNA影響抗腫瘤藥物敏感性相關(guān)研究進(jìn)展[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2009年09期

2 牛曉曉;王秦秦;;microRNA與肺癌[J];中國(guó)肺癌雜志;2010年04期

3 劉靜;王小中;;慢性粒細(xì)胞白血病相關(guān)microRNA的研究進(jìn)展[J];分子診斷與治療雜志;2010年04期

4 LEE Younghee;LUSSIER Yves A;;Identification of common microRNA-mRNA regulatory biomodules in human epithelial cancer[J];Chinese Science Bulletin;2010年31期

5 唐志強(qiáng);;The effect of microRNA-21-siRNA-lentivirus on biological behaviors in human hepatic cancer cell line hepG2[J];China Medical Abstracts(Surgery);2012年01期

6 ;PTEN and PDCD4 are Bona Fide Targets of microRNA-21 in Human Cholangiocarcinoma[J];Chinese Medical Sciences Journal;2012年02期

7 林建宇;朱雨捷;王晶;湯溢飛;徐中華;;急性冠狀動(dòng)脈綜合征相關(guān)microRNA靶向通路及其功能分析[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年04期

8 崔洪亮;張陽(yáng)德;;microRNA的協(xié)同調(diào)控網(wǎng)的構(gòu)建與研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年33期

9 張明杰;徐卓明;朱麗敏;龔霄雷;黃蕊;;先天性心臟病重度肺動(dòng)脈高壓血漿 microRNA 的分析與驗(yàn)證[J];上海醫(yī)學(xué);2013年12期

10 孟勝喜;胡義揚(yáng);馮琴;;microRNA在中醫(yī)藥防治非酒精性脂肪性肝病中的應(yīng)用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 荊清;袁文俊;秦永文;;microRNA的基因調(diào)控新功能[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

2 靳新;駱志剛;王金華;管乃洋;;microRNA靶標(biāo)研究進(jìn)展[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)功能基因組學(xué)研討會(huì)論文集[C];2006年

3 ;Comparasion of Inhibitory Effects on Survivin Gene Expression in Prostate Cancer by Vector-based microRNA and siRNA[A];2008年全國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要[C];2008年

4 朱丹霞;徐衛(wèi);繆扣榮;方成;朱華淵;董華潔;王冬梅;范磊;喬純;李建勇;;慢性淋巴細(xì)胞白血病microRNA異常表達(dá)研究[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

5 Yangchao Chen;;Small molecule modulators of microRNA-34a with anti-cancer activities[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

6 金希;厲有名;;單純性脂變與非酒精性脂肪性肝炎間差異microRNA表達(dá)譜研究[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

7 賈新正;盧肖男;聶慶華;張細(xì)權(quán);;雞部分microRNA的同源預(yù)測(cè)與克隆驗(yàn)證[A];中國(guó)動(dòng)物遺傳育種研究進(jìn)展——第十五次全國(guó)動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

8 李炯;段德民;鄭克孝;;新型非標(biāo)記高通量microRNA芯片技術(shù)[A];第一屆全國(guó)生物物理化學(xué)會(huì)議暨生物物理化學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略研討會(huì)論文摘要集[C];2010年

9 徐小濤;陸曉;孫婧;束永前;;肺癌側(cè)群細(xì)胞microRNA表達(dá)譜檢測(cè)及初步分析[A];2010’全國(guó)腫瘤分子標(biāo)志及應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第五屆中國(guó)中青年腫瘤專(zhuān)家論壇論文匯編[C];2010年

10 王俊峰;李巍;吳小江;阮康成;;大鼠附睪microRNA表達(dá)譜的研究[A];第十一次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)暨第九屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)摘要集[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳英云 喬蕤琳;哈醫(yī)大成功研發(fā)國(guó)內(nèi)首例microRNA轉(zhuǎn)基因及敲減小鼠模型[N];黑龍江經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

2 記者 陳青;2厘米以下肝癌檢出率88%[N];文匯報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 崔洪亮;microRNA的腫瘤表達(dá)研究及協(xié)同調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析[D];中南大學(xué);2014年

2 馬建華;高粱低磷低氮形態(tài)生理特征及低氮響應(yīng)的microRNA研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 李虔楨;microRNA相關(guān)基因遺傳多態(tài)性與冠心病臨床關(guān)聯(lián)及預(yù)后研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王耀輝;血清microRNA作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 周霽子;環(huán)境因素對(duì)心臟畸形胎兒影響的表觀(guān)遣傳學(xué)機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

6 張麗;microRNA通過(guò)調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)參與血管性認(rèn)知障礙發(fā)生發(fā)展[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 查若鵬;肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)microRNA的鑒定及其分子機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

8 方硯田;結(jié)腸癌干細(xì)胞分選、差異microRNA表達(dá)譜檢測(cè)以及miR-449b-CCND1、E2F3通路在結(jié)腸癌干細(xì)胞自我更新的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

9 辛成齊;椰棗microRNA鑒定及其在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)譜研究[D];中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

10 李棟;先天性心臟病血漿microRNA表達(dá)譜及與GATA4靶序列單核苷酸多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究[D];山東大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高智紅;應(yīng)用多樣性增量方法識(shí)別人類(lèi)基因組microRNA前體序列[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2010年

2 王娜娜;microRNA進(jìn)化關(guān)系及編碼特性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2007年

3 王玫;小麥microRNA的鑒定與分析[D];南昌大學(xué);2007年

4 秦保東;原發(fā)性膽汁性肝硬化microRNA表達(dá)譜的檢測(cè)及其功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 徐嬌陽(yáng);循環(huán)microRNA用于低氧性肺動(dòng)脈高壓早期診斷的實(shí)驗(yàn)研究[D];石河子大學(xué);2015年

6 余綺荷;晚期結(jié)直腸癌一線(xiàn)化療的臨床療效預(yù)后分析及療效相關(guān)microRNA的初步篩選[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 蔡雨函;乙型腦炎病毒的分離鑒定及其在microRNA水平上與PK-15細(xì)胞的相互作用研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 葉泥;山羊地方性鼻內(nèi)腺瘤microRNA的表達(dá)差異研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 李敏;活血化痰安神方對(duì)冠心病心絞痛痰瘀互結(jié)證患者臨床及microRNA研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

10 程冉;桂枝茯苓丸加味治療子宮肌瘤的療效觀(guān)察及對(duì)血清microRNA表達(dá)譜的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：運(yùn)脾化濁法對(duì)血脂異常大鼠microRNA及其靶基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：372247