本文關(guān)鍵詞：脊柱推拿對(duì)腦癱幼鼠腦白質(zhì)炎癥的拮抗作用與機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的觀察脊柱推拿對(duì)腦癱(Cerebral palsy,CP)幼鼠腦白質(zhì)炎癥細(xì)胞因子白介素6(IL-6)和白介素10(IL-10)的影響,為脊柱推拿重建腦癱炎癥穩(wěn)態(tài)的分子機(jī)制提供前期研究基礎(chǔ)。方法將108只3日齡SD幼鼠,隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組(共40只)、模型對(duì)照組(共40只)和實(shí)驗(yàn)組(共28只),模型對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組采用左側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎聯(lián)合缺氧3h的方法制備腦癱模型,空白對(duì)照組不予處理,只正常喂養(yǎng)。造模后24h時(shí),從空白對(duì)照組和模型對(duì)照組中各隨機(jī)取出6只處死用于做TTC染色,再各隨機(jī)取出6只處死用于做腦干濕重比檢測(cè);同日,實(shí)驗(yàn)組開始用脊柱推拿的方法進(jìn)行早期干預(yù),1次/日,15 min/次,空白對(duì)照組和模型對(duì)照組剩余幼鼠不予任何干預(yù)。三組維持相同的溫度、適度生存環(huán)境及喂養(yǎng)方法,相同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)并記錄幼鼠的精神狀態(tài)、毛發(fā)潤(rùn)澤程度及體重等一般情況。第4周(Postnatal 28days,P28)和第8周(P56)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),每組各隨機(jī)取出7只處死,用HE染色觀察腦白質(zhì)的病理改變;每組剩余的7只用免疫熒光法檢測(cè)腦白質(zhì)區(qū)內(nèi)IL-6和IL-10的蛋白表達(dá)水平。處死前1周進(jìn)行平衡木實(shí)驗(yàn)(Beam Balance Test,BBT)以觀察其運(yùn)動(dòng)平衡能力。結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組4周時(shí)的精神狀態(tài)、反應(yīng)等一般情況良好,與空白對(duì)照組相比無明顯差異;與模型對(duì)照組相比,模型對(duì)照組幼鼠反應(yīng)較遲鈍、雙眼不等大。實(shí)驗(yàn)組8周時(shí)毛發(fā)光澤油亮、精神狀態(tài)良好、反應(yīng)靈敏、發(fā)育正常,與空白對(duì)照組相比幾乎無差異;而模型對(duì)照組幼鼠毛色暗淡,反應(yīng)遲鈍、發(fā)育遲緩、雙眼不等大(睜眼后左側(cè)眼裂變小)。每日體重增加量:空白對(duì)照組均較模型對(duì)照組顯著增加(P0.05)。P13、P17、P19、P21、P23、P25,實(shí)驗(yàn)組4周時(shí)體重日變化量均較模型對(duì)照組顯著增加(P0.05);P7、P11、P17、P19、P21、P23、P27、P29、P31、P33、P35、P37、P39、P41、P43、P45、P47、P53,實(shí)驗(yàn)組8周時(shí)體重日變化量均較模型對(duì)照組顯著增加(P0.05)。說明脊柱推拿能加快促進(jìn)腦癱幼鼠的體重增長(zhǎng)速度,且對(duì)推拿時(shí)間具有一定的依賴性,隨著推拿次數(shù)的增加,體重增長(zhǎng)速度越快。2.平衡木實(shí)驗(yàn)顯示,實(shí)驗(yàn)組4周時(shí),通過平衡木的時(shí)間和雙后肢下滑的次數(shù)方面與8周時(shí)比較發(fā)現(xiàn):通過平衡木的時(shí)間無顯著差異(P0.05),但雙后肢下滑的次數(shù)差異非常顯著(P0.001);4周時(shí),與空白對(duì)照組比較,各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異(P0.05),與模型對(duì)照組比較,通過平衡木的時(shí)間顯著縮短(P0.05)、雙后肢下滑次數(shù)顯著減少(P0.05);8周時(shí),與空白對(duì)照組比較,各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異(P0.05),與模型對(duì)照組比較,通過平衡木的時(shí)間顯著縮短(P0.05)、雙后肢下滑次數(shù)顯著減少(P0.05)。說明脊柱推拿能促進(jìn)腦癱幼鼠的運(yùn)動(dòng)平衡能力的改善,且與推拿時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān),推拿時(shí)間越長(zhǎng),改善效果越好。3.HE染色顯示,實(shí)驗(yàn)組4周時(shí),腦白質(zhì)區(qū)內(nèi)部分神經(jīng)元細(xì)胞存在不同程度的水腫、壞死和核固縮現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)組8周時(shí)與4周時(shí)進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)部分受損神經(jīng)元細(xì)胞的水腫、壞死和核固縮現(xiàn)象均有明顯改善。4周時(shí)發(fā)現(xiàn),腦白質(zhì)區(qū)內(nèi)部分神經(jīng)元細(xì)胞存在不同程度的水腫、壞死和核固縮現(xiàn)象,4周時(shí)與空白對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與模型對(duì)照組比較,神經(jīng)元細(xì)胞的水腫、壞死和核固縮現(xiàn)象相對(duì)較輕;8周時(shí)與空白對(duì)照組比較,幾乎無異,與模型對(duì)照組比較,神經(jīng)元細(xì)胞的水腫、壞死和核固縮現(xiàn)象相對(duì)較輕。說明脊柱推拿可促使腦白質(zhì)區(qū)內(nèi)神經(jīng)元細(xì)胞的修復(fù)與再生,且推拿時(shí)間越長(zhǎng),恢復(fù)效果越明顯。4.免疫熒光檢測(cè)顯示,實(shí)驗(yàn)組4周時(shí)腦白質(zhì)內(nèi)部分炎癥細(xì)胞因子IL-6、IL-10的異常表達(dá)均發(fā)生了明顯改善。實(shí)驗(yàn)組8周時(shí)與4周時(shí)比較發(fā)現(xiàn)IL-6、IL-10炎癥因子蛋白水平表達(dá)的改善程度差異非常顯著(P0.01)。4周時(shí),與空白對(duì)照組比較,IL-6和IL-10蛋白表達(dá)均顯著增高(P0.05),與模型對(duì)照組比較,IL-6蛋白表達(dá)顯著降低(P0.05),IL-10蛋白表達(dá)顯著增高(P0.05);8周時(shí),與空白對(duì)照組比較,IL-6和IL-10蛋白表達(dá)均顯著增高(P0.05),與模型對(duì)照組比較,IL-6蛋白表達(dá)顯著降低(P0.05),IL-10蛋白表達(dá)顯著增高(P0.05)。說明脊柱推拿可有效降低腦白質(zhì)內(nèi)IL-6的蛋白表達(dá)水平,同時(shí)提高IL-10的蛋白表達(dá)水平。說明通過推拿可有效參與調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞因子IL-6和IL-10異常表達(dá),通過脊柱推拿可以調(diào)節(jié)促炎因子IL-6與抗炎因子IL-10的蛋白水平表達(dá),且其調(diào)節(jié)效果與推拿時(shí)間有關(guān),推拿時(shí)間越長(zhǎng),效果越好。結(jié)論1.脊柱推拿能有效促進(jìn)腦癱幼鼠的各項(xiàng)生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo),如體重、飲食、精神狀態(tài)等。且與推拿時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān),推拿時(shí)間越長(zhǎng),生長(zhǎng)發(fā)育狀況越好。2.脊柱推拿能有效促進(jìn)腦癱幼鼠運(yùn)動(dòng)平衡能力的提高,且與推拿時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān),推拿時(shí)間越長(zhǎng),改善效果越好。3.脊柱推拿可改善腦白質(zhì)區(qū)內(nèi)神經(jīng)元細(xì)胞的病理形態(tài),降低腦白質(zhì)促炎因子IL-6蛋白水平表達(dá),增加抗炎因子IL-10的蛋白水平表達(dá),重建炎癥的相對(duì)穩(wěn)態(tài)。這與文獻(xiàn)報(bào)道中提及的血清中炎癥因子表達(dá)的方式一致,提示脊柱推拿對(duì)腦白質(zhì)的病理改變及脊柱推拿對(duì)CP幼鼠運(yùn)動(dòng)平衡能力的改善和炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)有關(guān)。4.脊柱推拿可通過降低腦白質(zhì)內(nèi)促炎因子IL-6、提高抗炎因子IL-10蛋白表達(dá)來重建腦癱炎癥穩(wěn)態(tài),進(jìn)而促進(jìn)運(yùn)動(dòng)及其它功能的全面康復(fù),為進(jìn)一步研究調(diào)控機(jī)制奠定前期基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：脊柱推拿 腦癱 炎癥 腦白質(zhì) IL-6 IL-10
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R244.1
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 中英文縮寫對(duì)照表13-14
• 引言14-16
• 1.材料16-17
• 2.方法17-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)分組17
• 2.2 各組動(dòng)物處理方法17-18
• 2.3 檢測(cè)方法18-21
• 2.3.1 腦組織TTC染色法18-19
• 2.3.2 腦干濕重檢測(cè)法19
• 2.3.3 平衡木實(shí)驗(yàn)19-20
• 2.3.4 HE染色法20
• 2.3.5 免疫熒光檢測(cè)法20-21
• 2.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21
• 3.結(jié)果21-32
• 3.1各組生長(zhǎng)發(fā)育情況比較21
• 3.2 各組幼鼠日體重變化比較21-24
• 3.3 腦組織TTC染色結(jié)果比較24
• 3.4 腦組織干濕重比結(jié)果比較24-25
• 3.5 各組幼鼠平衡木實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果比較25-27
• 3.6 各組幼鼠腦白質(zhì)HE染色結(jié)果比較27-28
• 3.7 各組幼鼠腦白質(zhì)免疫熒光檢測(cè)IL-6 蛋白表達(dá)結(jié)果比較28-29
• 3.8 各組幼鼠腦白質(zhì)免疫熒光檢測(cè)IL-10蛋白表達(dá)結(jié)果比較29-32
• 討論32-38
• 結(jié)論38-39
• 問題與展望39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 本課題國(guó)內(nèi)外目前研究狀況(文獻(xiàn)綜述)44-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 發(fā)表文章51-52
• 附件52-57
• 致謝57

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：333322