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推拿對大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的TLR4/MyD88信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響

發(fā)布時間:2021-03-27 06:43
  目的:本研究以推拿手法對建立的SPF級SD雌性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型進行分組治療,并對治療后的血液、膝關(guān)節(jié)軟骨的各項指標進行檢測:①用ELISA法檢測的血清IL-1β、IL-6、TNF-α的表達水平;②對膝關(guān)節(jié)軟骨行Mankin評分;③用熒光定量PCR和 Western blot 法檢測關(guān)節(jié)軟骨中 TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB p65 mRNA 及蛋白的表達水平,通過對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析,來探討推拿手法治療大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎的機制,為臨床推拿治療膝骨關(guān)節(jié)炎提供充實可靠的動物實驗依據(jù)。方法:遵循隨機化的原則,運用隨機數(shù)字表,抽取10只大鼠為空白組,余下40只大鼠采用木瓜蛋白酶關(guān)節(jié)注射法建立大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型,待造模成功后,再將造模大鼠隨機分為模型組、推拿組、灌胃組、推拿加灌胃組,每組10只?瞻捉M、模型組常規(guī)飼養(yǎng),推拿組行一指禪手法治療,灌胃組用塞來昔布溶液灌胃,推拿加灌胃組同時予以上兩種治療。治療4周后取材,對大鼠血清用ELISA法檢測IL-1β、IL-6、TNF-α的表達水平,對大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨行Mankin評分、熒光定量PCR、以及用Western blot法檢測軟骨T... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻研究
    1.1 中西醫(yī)對膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機制研究進展
        1.1.1 西醫(yī)對膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機制的研究進展
        1.1.2 中醫(yī)對KOA發(fā)病機制的研究進展
    1.2 KOA中西醫(yī)治療現(xiàn)狀
        1.2.1 西醫(yī)治療
        1.2.2 中醫(yī)治療
    1.3 KOA與TLR4/MYD88信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
第二章 實驗研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 時間及地點
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 分組
        2.2.2 造模
        2.2.3 干預(yù)治療及取材
    2.3 指標檢測
        2.3.1 ELISA法檢測血清IL-1β、IL-6、TNF-α的表達
        2.3.2 軟骨組織切片染色觀察及Mankin評分
        2.3.3 熒光定量PCR檢測TLR4、MYD88、NF-KB p65及TRAF6 mRNA表達
        2.3.4 Western blot檢測TLR4、MYD88、TRAF6及NF-K B p65蛋白表達
        2.3.5 統(tǒng)計方法
        2.3.6 實驗設(shè)計思路圖
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 造模結(jié)果
        2.4.2 ELISA法檢測血清IL-1β、IL-6、TNF-α的表達的結(jié)果
        2.4.3 關(guān)節(jié)軟骨組織病理切片HE染色及Mankin評分結(jié)果
        2.4.4 熒光定量PCR檢測結(jié)果
        2.4.5 Western blot檢測結(jié)果
第三章 分析與討論
    3.1 選題依據(jù)
        3.1.1 歷代醫(yī)家對膝骨關(guān)節(jié)炎的認識
        3.1.2 推拿與膝骨關(guān)節(jié)炎
    3.2 手法及穴位選擇依據(jù)
    3.3 動物模型選擇依據(jù)
    3.4 實驗結(jié)果分析
結(jié)語
參考文獻
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計學(xué)審核證明



本文編號:3103088

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