痛愈舒顆粒對寒凝血瘀型EMs大鼠OPN表達的影響
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【摘要】:研究目的:1.通過建立寒凝血瘀型EMs大鼠,動態(tài)的觀察EMs異位病灶的形狀變化、病理學(xué)改變、血流變及凝血功能的變化,判斷對EMs大鼠進行藥物干預(yù)的最好時間點。2.對成模EMs大鼠進行治療性干預(yù),觀察痛愈舒顆粒對大鼠異位病灶的病理形態(tài)的改變及對OPN表達的影響,探討痛愈舒顆粒對寒凝血瘀型EMs的作用,為今后內(nèi)異癥的治療提供實驗依據(jù)。3.對已成模的EMs大鼠進行預(yù)防性干預(yù)用藥,觀察痛愈舒顆粒預(yù)防性劑量對大鼠OPN表達的影響及EMs大鼠異位病灶的病理學(xué)改變和各血液指標(biāo)的變化,為內(nèi)異癥的預(yù)防性治療用藥提供依據(jù)。實驗方法:1.以“自體子宮內(nèi)膜移植法”與“冰水混合物浸泡法”復(fù)合建立寒凝血瘀型EMs大鼠模型,在造模后3日、5日、4周、6周、8周時各隨機抽取4只大鼠,進行寒凝血瘀的表征觀察,同時對異位病灶的形態(tài)與病理學(xué)進行觀察。2.對EMs大鼠進行治療性用藥干預(yù),HE染色法觀察對照組、模型4周組、8周組、痛愈舒低劑量組、痛愈舒中劑量組、痛愈舒高劑量組及西藥組每組異位病灶的病理學(xué)改變,對各組異位病灶免疫組化法檢測其OPN的表達。3.對EMs大鼠進行預(yù)防性用藥干預(yù),應(yīng)用HE染色法對各實驗組異位病灶進行病理學(xué)改變的觀察,采用免疫組化的方法檢測各組異位病灶中OPN的表達。結(jié)果:1.造模3天的大鼠子宮內(nèi)膜組織水腫明顯,其間可見炎性細胞;造模5天的大鼠子宮內(nèi)膜,間質(zhì)細胞相對變多,組織水腫減輕,但異位組織尚未形成完整內(nèi)膜上皮結(jié)構(gòu)。造模4周時大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞呈柱狀排列,間質(zhì)細胞明顯增多,腺體數(shù)量增多,血管豐富,已經(jīng)形成了典型的異位內(nèi)膜組織。造模6周、8周的大鼠子宮內(nèi)膜與造模4周相比無明顯差異。模型組大鼠具有寒凝血瘀表征及血液流變學(xué)和凝血功能的異常,各模型組之間的血液指標(biāo)變化無統(tǒng)計學(xué)意義。2.藥物灌胃后,各劑量的痛愈舒顆粒組及西藥組的模型大鼠在異位病灶體積上均有縮小,且上皮細胞萎縮,排列不連續(xù),間質(zhì)細胞減少,腺體數(shù)量減少,其中以痛愈舒高劑量組和西藥組最為明顯。且痛愈舒顆粒各組對大鼠寒凝血瘀表征及一般狀態(tài)的改變較為明顯,西藥組沒有改變,且出現(xiàn)體重增加不良效果。痛愈舒顆粒各組對模型大鼠的血液指標(biāo)的改善較為明顯,西藥組與模型組相比差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。與空白對照組相比,模型4、8周組及各藥物治療組的OPN表達明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);各藥物治療組的OPN表達與各模型組相比,明顯降低,且造模8周組與造模4周組相比,OPN的表達升高更加顯著,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05):痛愈舒各組、西藥組與造模8周組相比,OPN的表達降低明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);痛愈舒高劑量組與西藥相比,OPN的表達明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.在預(yù)防性用藥實驗中,預(yù)防組大鼠沒有明顯的寒凝血瘀表征,異位病灶的體積縮小,與痛愈舒高劑量組相比間質(zhì)細胞更少,腺體變形、減少明顯,纖維化程度更高,出現(xiàn)退行性改變。與空白對照組相比,模型4周組、痛愈舒高劑量組OPN的表達升高明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。痛愈舒高劑量組、預(yù)防組與模型4周組相比,OPN的表達明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而預(yù)防組與痛愈舒高劑量組相比,OPN的表達降低更為明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.本實驗采用自體內(nèi)膜移植法和冰水浸泡法復(fù)合建立寒凝血瘀型內(nèi)異癥大鼠模型,動態(tài)的觀察EMs異位病灶的形狀變化、病理學(xué)改變、血流變及凝血功能的變化,確定了造模5日時是預(yù)防性給藥的開始時間,造模4周時是治療性給藥的時間點。2.與正常子宮內(nèi)膜相比,寒凝血瘀型內(nèi)異癥大鼠異位內(nèi)膜中OPN的表達明顯升高。提示其異常增高的表達在內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。3.痛愈舒顆粒治療性用藥可以有效抑制內(nèi)異癥病情的發(fā)展,使異位病灶萎縮、退化,且在改善內(nèi)異癥大鼠寒凝血瘀表征、血液流變學(xué)及凝血功能方面,效果明顯,沒有西藥所致的副作用,且抑制了異位病灶中OPN的表達,推測其可通過抑制OPN的表達對內(nèi)異癥病情的進展進行抑制。痛愈舒高劑量為治療寒凝血瘀型內(nèi)異癥的最佳劑量。4.痛愈舒顆粒預(yù)防性用藥可以使異位病灶組織退化、失去正常形態(tài),且其治療效果要優(yōu)于治療性用藥,并且抑制了OPN的表達,痛愈舒顆粒對內(nèi)異癥具有早期防治的作用。
【關(guān)鍵詞】:寒凝血瘀 子宮內(nèi)膜異位癥 大鼠模型 OPN 痛愈舒顆粒
【學(xué)位授予單位】:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R271
【目錄】:
- 縮略詞4-5
- 中文摘要5-8
- ABSTRACT8-12
- 前言12-14
- 第一部分 文獻綜述14-32
- 綜述一 中醫(yī)學(xué)對子宮內(nèi)膜異位癥認(rèn)識的研究進展14-19
- 一、古代醫(yī)藥典籍對于子宮內(nèi)膜異位癥的認(rèn)識14-15
- 二、現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)對子宮內(nèi)膜異位癥的研究進展15-19
- 綜述二 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對內(nèi)異癥認(rèn)識的研究進展19-26
- 一、西醫(yī)學(xué)對子宮內(nèi)膜異位癥病因病機的研究進展19-22
- 二、西醫(yī)學(xué)對內(nèi)異癥治療的研究進展22-23
- 三、OPN(骨橋蛋白)與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)研究23-26
- 參考文獻26-32
- 第二部分 實驗研究32-54
- 一、自體移植法寒凝血瘀型子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的建立及觀察32-40
- (一) 材料及方法32-36
- (二) 實驗結(jié)果36-40
- 1. 寒凝血瘀型異位癥大鼠造模情況36
- 2. 寒凝血瘀異位癥大鼠的表現(xiàn)36-37
- 3. 異位病灶的形態(tài)觀察37-38
- 4. 異位癥大鼠異位組織病理觀察38-40
- (三) 結(jié)論40
- 二、痛愈舒顆粒治療性用藥干預(yù)EMs大鼠OPN表達的影響40-48
- (一) 實驗材料40-41
- (二) 實驗方法41-42
- (三) 測定42-43
- (四) 統(tǒng)計處理43
- (五) 結(jié)果43-48
- (六) 小結(jié)48
- 三、痛愈舒顆粒對寒凝血瘀型EMs大鼠預(yù)防性用藥干預(yù)其OPN表達的影響48-54
- (一) 實驗材料及方法48
- (二) 測定48-49
- (三) 統(tǒng)計處理49
- (四) 結(jié)果49-52
- (五) 小結(jié)52-54
- 第三部分 討論54-64
- 一、立題依據(jù)54-57
- (一) 素因54-57
- (二) 誘因57
- 二、痛愈舒顆粒的組成及藥物分析57-59
- 三、“治未病”理論對內(nèi)異癥預(yù)防及治療的指導(dǎo)意義59-62
- 1. 未病攝生,重在預(yù)防60-61
- 2. 已病早治,阻其傳變61
- 3. 愈后調(diào)理,防其復(fù)發(fā)61-62
- 四、痛愈舒顆粒對內(nèi)異癥大鼠的治療和預(yù)防作用62-63
- 1. 痛愈舒顆粒對內(nèi)異癥大鼠的治療作用62-63
- 2. 痛愈舒顆粒對內(nèi)異癥大鼠的預(yù)防作用63
- 五、不足與展望63-64
- 結(jié)論64-65
- 致謝65-66
- 參考文獻66-69
- 個人簡歷69
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