目的:觀察瑤醫(yī)富丁方對大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎(CNP)一般情況、全血粘度、前列腺濕重與組織病理學(xué)改變及炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8水平的變化和總p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表達(dá)的影響,評價瑤醫(yī)富丁方治療實驗性CNP的療效并探討其作用機(jī)理,為臨床應(yīng)用瑤醫(yī)富丁方治療CNP提供實驗依據(jù)。方法:將60只成年雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常組、模型組、陽性組(鹽酸坦洛新緩釋片)、瑤醫(yī)富丁方高、中、低劑量組,共6組,每組10只。正常組不做處理,其余各組大鼠均予腹腔注射10%水合氯醛0.3ml/100g麻醉后于無菌條件下行去勢手術(shù)并術(shù)后第二天起于頸、背部多點皮下注射苯甲酸雌二醇0.25mg/Kg·30d,建立實驗性CNP大鼠模型。驗證造模成功后,給藥干預(yù)。瑤醫(yī)富丁方高、中、低劑量組灌胃給藥合生藥濃度分別為3.9667g/ml、1.9833g/ml、0.9917g/ml,陽性組給予鹽酸坦洛新緩釋片懸浮液濃度為0.0023mg/ml灌胃,各組大鼠均按1ml/100g體重進(jìn)行灌胃,正常組與模型組給予等容量的生理鹽水灌胃,1次/d,連續(xù)灌胃30d后取材檢測。觀測指標(biāo):(1)各組大鼠實驗過程中宏觀情況,如,精神狀態(tài)、體重變化等;(2)各組大鼠全血粘度;(3)各組大鼠前列腺外觀、前列腺濕重變化;(4)各組大鼠前列腺組織病理形態(tài)學(xué)變化;(5)Elisa法檢測各組大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平;(6)Western blot法檢測各組大鼠前列腺組織中總p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表達(dá)。結(jié)果:(1)正常組大鼠整體狀態(tài)良好,飲食正常、毛發(fā)光亮,其余各組大鼠從造模開始,飲食活動減少,毛發(fā)變粗糙,至造模結(jié)束體重與正常組大鼠相比,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。給藥干預(yù)后,各組大鼠整體情況好轉(zhuǎn),至實驗結(jié)束時,各組大鼠體重均高于模型組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);富丁方高劑量組體重與正常組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p?0.05);陽性組、富丁方中、低劑量組大鼠體重均較正常組及富丁方高劑量組低(p0.05)。(2)正常組前列腺外觀顏色紅潤、質(zhì)軟,與周圍組織無粘連,模型組大鼠前列腺均有不同程度的萎縮變小,顏色暗紅或灰白,質(zhì)地較硬,與周圍組織筋膜相粘連,陽性組及瑤醫(yī)富丁方各組前列腺較模型組均有所改善,前列腺暗紅色減輕或變淡紅色,質(zhì)地變軟,與周圍組織的粘連減輕,萎縮情況改善。前列腺濕重與正常組相比,模型組、陽性組、富丁方中、低劑量組均較低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),瑤醫(yī)富丁方高劑量組與正常組相比,差異則無統(tǒng)計學(xué)意義(p?0.05);瑤醫(yī)富丁方高、中劑量組前列腺濕重高于模型組(p0.05),陽性組、富丁方低劑量組前列腺濕重有所恢復(fù),但較于模型組,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p?0.05);瑤醫(yī)富丁方高劑量組前列腺濕重均高于陽性組及富丁方低劑量組(p0.05)。光鏡下與模型組相比,瑤醫(yī)富丁方能不同程度減輕各組大鼠前列腺組織病理形態(tài)學(xué)改變,減少間質(zhì)纖維增生和炎細(xì)胞浸潤,增加腺管管腔內(nèi)分泌物,促進(jìn)破壞前列腺組織細(xì)胞的修復(fù)。前列腺組織病理炎癥等級評分,與正常組及富丁方高劑量組相比,模型組、陽性組、富丁方中、低劑量組炎癥等級評分較高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),富丁方高劑量組與正常組相比(p?0.05);與模型組相比,陽性組、富丁方中劑量組炎癥等級評分呈降低趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p_?0.05)。最后實驗數(shù)據(jù)表明,富丁湯高劑量組改善CNP大鼠前列腺組織病變效果最好。(3)模型組大鼠各切變率全血粘度明顯高于正常組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);與模型組相比,瑤醫(yī)富丁方高、中劑量組能明顯降低CNP大鼠各切變率全血粘稠度,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),且瑤醫(yī)富丁高劑量組效果更好;瑤醫(yī)富丁方高劑量組低切變率全血粘稠度均較陽性組及瑤醫(yī)富丁方低劑量組低(p0.05)。(4)與正常組相比,模型組、富丁方中、低劑量組大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平均較高(p0.05),陽性組、富丁方高劑量組TNF-α、IL-6水平均較高(p0.05);與模型組相比,陽性組、富丁方高劑量組TNF-α、IL-6、IL-8水平均較低(p0.05),富丁方中劑量組TNF-α、IL-8水平均較低(p0.05),富丁方低劑量組TNF-α、IL-6、IL-8水平呈降低趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p?0.05);與陽性組相比,富丁方高劑量組TNF-α水平降低(p0.05),富丁方低劑量組TNF-α、IL-8水平較高(p0.05);富丁方高劑組TNF-α、IL-6、IL-8水平較富丁方低劑量組低(p0.05),富丁方中劑量組TNF-α水平較富丁方低劑量組低(p0.05),富丁方高劑組TNF-α水平較富丁方中劑量組低(p0.05)。(5)與正常組相比,模型組大鼠前列腺組織中總p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表達(dá)明顯增加(p0.05),陽性組p-p38MAPK蛋白表達(dá)降低(p0.05)、MMP-9蛋白表達(dá)較高(p0.05),富丁方高劑量組總p38MAPK蛋白表達(dá)降低(p0.05),富丁方高、中劑量組p-p38MAPK蛋白表達(dá)較高(p0.05),富丁方低劑量組總p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表達(dá)較高(p0.05);與模型組相比,陽性組、富丁方各劑量組總p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表達(dá)均降低(p0.05);與陽性組相比,富丁方各劑量組p-p38MAPK蛋白表達(dá)均較高(p0.05),MMP-9蛋白表達(dá)均降低(p0.05),富丁方高劑量組總p38MAPK蛋白表達(dá)降低(p0.05);富丁方高劑量組總p38MAPK蛋白表達(dá)較富丁方低劑量組下降(p0.05)。結(jié)論:(1)瑤醫(yī)富丁方能改善CNP大鼠的整體情況,減輕其病變程度,一定程度恢復(fù)前列腺濕重和分泌功能,減少前列腺組織炎性細(xì)胞浸潤,促進(jìn)受損前列腺組織的修復(fù),表明瑤醫(yī)富丁方對CNP大鼠具有較好的療效。(2)瑤醫(yī)富丁方對CNP的療效機(jī)理可能為:(1)通過降低全血粘度改善前列腺局部微循環(huán)障礙,增強(qiáng)前列腺組織滲透性,提高血藥濃度;(2)對機(jī)體具有免疫調(diào)節(jié)作用,通過免疫調(diào)節(jié)降低炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平;(3)通過P38MAPK信號通路抑制前列腺組織中總p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9的表達(dá),進(jìn)而改善炎癥癥狀。
【學(xué)位單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R29
【部分圖文】：

各組大鼠體重隨時間變化趨勢

各組前列腺解剖實物圖

圖 4. 瑤醫(yī)富丁方對各組大鼠血清 TNF α 的影響。注：與正常組相比，#P<0.05，##P<0.01；與模型組與陽性對照組相比，△P<0.05，△△P<0.01；與富丁方高劑量與富丁方中劑量組相比，☆P<0.05，☆☆P<0.01。
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本文編號：2891897