目的:觀察血瘀證對糖尿病腎病(DKD)大鼠的腎損害以及對內(nèi)質網(wǎng)應激(ERS)的影響,探討DKD血瘀證大鼠腎損害與ERS之間的關系。方法:選用50只SPF級雄性SD大鼠,用高脂高糖飼料聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)方法建立DKD大鼠模型。隨機分為正常組、糖尿病組、糖尿病+血瘀證組,其中糖尿病+血瘀證組(0.05 mg·kg-1)采用右旋糖酐法制備。觀察各組大鼠一般情況、血液流變學指標,24 h尿蛋白含量、肌酐、腎臟病理學變化;免疫組化、蛋白免疫印跡法(Western blot)和實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-time PCR)檢測腎組織ERS相關蛋白葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78),活化轉錄因子6(ATF6)和腎臟纖維化指標纖維連接蛋白(FN),α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表達。結果:與正常組比較,糖尿病組大鼠出現(xiàn)多飲多食多尿、體質量減輕,血液流變學指標全血黏度和血漿黏度均明顯升高(P0.05,P0.01),24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮顯著上升(P0.01),腎臟病理加重,腎組織的GRP78,ATF6,FN和α-SMA的mRAN及蛋白表達明顯升高(P0.05,P0.01);經(jīng)過右旋糖酐法制備血瘀證模型后,糖尿病+血瘀證組大鼠死亡率增加,體征變化較糖尿病組更加明顯,全血黏度、血漿黏度,24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮等較糖尿病組顯著升高(P0.01),同時病理改變較糖尿病組加重,腎組織的GRP78,ATF6,FN,α-SMA的mRNA及蛋白表達較糖尿病組明顯升高(P0.05,P0.01)。結論:在病證結合模型下,血瘀證可能明顯加重糖尿病腎病大鼠腎臟病理損害,且與增強糖尿病腎病大鼠腎臟組織的ERS有關。
【部分圖文】：

對大鼠腎組織切片進行HE,Masson,PAS染色。其中正常組大鼠腎小管、腎小球無病理變化，腎臟組織正常。HE染色中，與正常組比較，糖尿病組大鼠出現(xiàn)系膜基質增生、基底膜增厚和腎小球萎縮，細胞外基質可見大量炎性細胞浸潤；糖尿病+血瘀證組較糖尿病組整體加重，見圖1。Masson染色中，與正常組比較，糖尿病組可見藍色膠原物沉積，腎小球中可見細胞增生及膠原纖維，腎間質纖維化，腎小球毛細血管管壁顯著增厚，腎小球系膜、基底膜可見紫紅色物質沉積；與糖尿病組比較，糖尿病+血瘀證組則顏色沉積更為明顯，纖維化表現(xiàn)更重，見圖2。PAS染色中，與正常組比較，糖尿病組大鼠腎小球系膜、基底膜以及腎小管均可見淋巴細胞浸潤，呈紫紅色，病變程度較為嚴重；與糖尿病組比較，糖尿病+血瘀證組大鼠腎小球系膜、基底膜以及腎小管均可見大量淋巴細胞浸潤，紫紅色分布較多，同時近曲小管擴張，管腔變大，表明有大量糖原物質積累，見圖3。圖2 血瘀證對大鼠腎組織病理的影響（Masson，×400)

血瘀證對大鼠腎組織病理的影響（Masson，×400)

血瘀證對大鼠腎組織病理的影響（PAS，×400)
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