本文關(guān)鍵詞：基于伏邪理論清透法對產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥性逆轉(zhuǎn)作用的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景大腸埃希菌對廣譜抗生素的敏感性不斷下降,其耐藥性的傳播亟待控制。大腸埃希菌耐藥菌株往往同時攜帶β內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、喹諾酮類、氯霉素、磺胺類等抗菌藥物耐藥基因,可同時存在多種耐藥機制。尋找除抗生素外有效的感染控制策略,減輕抗生素對大腸埃希菌的選擇壓力,延緩和逆轉(zhuǎn)大腸埃希菌耐藥已成為重要課題。中醫(yī)藥治療感染療效確切,且因其為良性干預(yù)作用不會產(chǎn)生耐藥,在抑制細菌耐藥和恢復(fù)耐藥菌敏感性的研究上已取得不少成果。導(dǎo)師齊文升教授根據(jù)對耐藥菌感染的理論認識和多年的臨床觀察,認為耐藥大腸埃希菌感染契合伏邪致病理論,提出基于伏邪理論的清透法治療耐藥菌感染,避免過用苦寒遏閉伏邪的弊端,整合中醫(yī)傷寒、溫病治療外感熱病的優(yōu)勢,化裁加減制成新加達原散,運用于臨床取得了良好效果。據(jù)此提出假說--基于伏邪理論清透法的新加達原散具有逆轉(zhuǎn)細菌耐藥性的作用。目的 研究基于伏邪理論清透法的新加達原散含藥血清干預(yù)產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌對其耐藥性的作用,并考察不同檢測底物對實驗菌株ESBLs檢測結(jié)果的影響。方法根據(jù)血清藥理學(xué)制備新加達原散含藥血清,模擬中藥復(fù)方口服后在體內(nèi)的實際成分和作用環(huán)境,定性分析檢測含藥血清中預(yù)測有效成分漢黃芩苷和芍藥苷。從臨床標(biāo)本中分離可疑產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌株,利用全自動微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng),進行菌種鑒定和藥敏分析,采用CLSI推薦的紙片擴散法篩選試驗和酶抑制劑增強確認試驗,篩選產(chǎn)ESBLs日性大腸埃希菌作為實驗菌株。進行逆轉(zhuǎn)干預(yù)試驗前,用血清添加量線性遞增混合肉湯培養(yǎng)實驗菌株,觀察血清對菌株的抑菌作用,確認常用血清添加量能排除血清自身抑菌作用的干擾。隨后用新加達原散含藥血清混合肉湯培養(yǎng)實驗菌株,K-B紙片擴散法分別測定頭孢他啶和頭孢噻肟在不同培養(yǎng)時間的抑菌圈直徑,以空白血清作對照組以除外血清自身可能的逆轉(zhuǎn)作用,同時設(shè)立不含血清的空白肉湯組做陰性對照,比較逆轉(zhuǎn)實驗后三組菌株耐藥情況的差異,并計算菌株耐藥性的逆轉(zhuǎn)率。結(jié)果 從中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院臨床微生物實驗室采集獲取一株產(chǎn)ESBLs日性大腸埃希菌作為實驗菌株。測定含藥血清、空白血清的抑菌作用顯示當(dāng)含藥血清添加量大于80%,空白血清大于90%時,實驗菌株表現(xiàn)為被抑制生長。經(jīng)血清干預(yù)逆轉(zhuǎn)實驗后測定的抑菌圈直徑進行統(tǒng)計分析,結(jié)果顯示兩種藥敏紙片所測含藥血清組與空白血清組的抑菌圈直徑比較均有顯著差異(P0.05),而空白血清組和空白肉湯組對比無明顯變化(P0.05),不同培養(yǎng)時間下含藥血清組的抑菌圈直徑變化無顯著差異(P0.05),抑菌圈維持在增大后的水平；頭孢他啶藥敏紙片測得的總逆轉(zhuǎn)率為116%,高于頭孢噻肟的100%。結(jié)論1.新加達原散含藥血清能降低產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對β內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性,且產(chǎn)生的逆轉(zhuǎn)作用能穩(wěn)定維持。2.對比頭孢噻肟和頭孢他啶,針對本實驗該株大腸埃希菌的ESBLs較優(yōu)的檢測底物是頭孢噻肟。
【關(guān)鍵詞】：大腸埃希菌 超廣譜β內(nèi)酰胺酶 伏邪理論 耐藥 清透法
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R242
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 符號說明10-11
• 第一部分 文獻綜述11-24
• 綜述一 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的研究進展11-18
• 綜述二 伏邪理論的歷史源流淺析及研究評述18-24
• 第二部分 實驗研究24-50
• 前言24-26
• 實驗一 實驗血清的制備和檢測26-30
• 材料和方法26-27
• 結(jié)果27-30
• 實驗二 產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的分離鑒定30-35
• 材料和方法30-32
• 結(jié)果32-35
• 實驗三 新加達原散逆轉(zhuǎn)產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥性實驗35-42
• 材料和方法35-38
• 結(jié)果38-42
• 討論42-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻50-57
• 致謝57-58
• 在學(xué)期間主要研究成果58

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