目的觀察火針針刺犢鼻、內(nèi)膝眼兩穴對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型血清中MMP-3、MMP-13及關(guān)節(jié)軟骨中β-catenin表達(dá)的影響,以此初步探討火針治療KOA的療效和作用機(jī)理,以及Wnt/β-catenin信號通路與其下游相關(guān)因子MMP-3、MMP-13之間的關(guān)系。方法40只日本大耳白兔隨機(jī)分為空白組、模型組、毫針對照組和火針治療組,每組10只。除空白組外,其余3組均運(yùn)用Videman法建立兔KOA模型。造模成功后,毫針對照組每日予常規(guī)毫針針刺犢鼻、內(nèi)膝眼、梁丘、血海治療,火針治療組隔1日予火針刺激犢鼻、內(nèi)膝眼治療,空白組和模型組不干預(yù)。治療2周后,用酶聯(lián)免疫法檢測血清中MMP-3、MMP-13的濃度,處死實(shí)驗(yàn)兔,觀察右膝關(guān)節(jié)軟骨情況,切取膝關(guān)節(jié)軟骨做標(biāo)本,用于HE染色和免疫組化檢測軟骨中β-catenin的濃度。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用IBM SPSS Statistics 22.0和Graph Pad Prism 6.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果1.觀察膝關(guān)節(jié)情況:(1)空白組兔膝關(guān)節(jié)正常,無腫脹、粘連,軟骨光滑明亮完整。(2)模型組兔膝關(guān)節(jié)腫脹明顯、多處粘連,軟骨粗糙無光澤,部分軟骨變薄,嚴(yán)重者有明顯缺損和裂隙。(3)毫針對照組和火針治療組,兩組之間肉眼觀察無明顯差異,但情況均優(yōu)于模型組,膝關(guān)節(jié)腫脹及粘連者較少,軟骨呈淺白色,表面完整程度明顯較模型組好,關(guān)節(jié)邊緣較整齊。2.關(guān)節(jié)軟骨HE染色結(jié)果及光鏡下Mankin’s評分:(1)空白組軟骨細(xì)胞排列均勻,形態(tài)呈正常的圓形,細(xì)胞核染色均勻,基質(zhì)無失染。(2)模型組軟骨細(xì)胞數(shù)目明顯減少、排列紊亂、分布不均,可見細(xì)胞成簇出現(xiàn),軟骨細(xì)胞固縮壞死嚴(yán)重,空泡多。(3)毫針對照組和火針治療組軟骨細(xì)胞分布較模型組均勻、排列尚整齊,偶可見細(xì)胞成簇出現(xiàn),軟骨細(xì)胞基本正常,偶有軟骨細(xì)胞固縮壞死或空泡,整體情況較模型組好。(4)Mankin’s評分顯示模型組評分較空白組顯著升高(P0.01),毫針對照組、火針治療組評分較空白組高(P0.01),但顯著低于模型組(P0.01),毫針對照組和火針治療組相較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.血清中MMP-3、MMP-13的濃度:模型組濃度較空白組顯著升高(P0.01),毫針對照組、火針治療組濃度較空白組高(P0.01),但顯著低于模型組(P0.01),火針治療組相較于毫針對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.關(guān)節(jié)軟骨中β-catenin的表達(dá)情況:模型組陽性表達(dá)率較空白組顯著升高(P0.01),毫針對照組、火針治療組陽性表達(dá)率較空白組高(P0.05),但顯著低于模型組(P0.01),火針治療組相較于毫針對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.火針針刺治療膝骨性關(guān)節(jié)炎效果明確,相較于毫針治療火針治療取穴少、治療次數(shù)少,在患者的依存性和連續(xù)治療性上相對更有優(yōu)勢,這也為火針治療KOA的臨床運(yùn)用提供了依據(jù)。2.火針治療可以降低血清中MMP-3、MMP-13的濃度且降低軟骨中β-catenin的表達(dá),其機(jī)制可能是通過抑制Wnt/β-catenin信號通路,減少其下游MMP-3、MMP-13的表達(dá),從而解緩膝關(guān)節(jié)退行性病變的進(jìn)程。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R245.316
【部分圖文】：

細(xì)胞形態(tài)正常，呈圓形，胞質(zhì)均勻，細(xì)胞核清晰染色均勻，基質(zhì)染色無失②模型組：兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞數(shù)目明顯減少、排列紊亂、分布不均，可出現(xiàn)，軟骨細(xì)胞固縮壞死嚴(yán)重，空泡多。③毫針對照組和火針治療組：兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分布較模型組均勻、排列可見細(xì)胞成簇出現(xiàn)，軟骨細(xì)胞基本正常，偶有軟骨細(xì)胞固縮壞死，偶見空況較模型組好很多。（見圖 1）2.2 根據(jù) Mankin’s 評分表評分結(jié)果根據(jù) Mankin’s 評分表對各組實(shí)驗(yàn)兔膝關(guān)節(jié)軟骨進(jìn)行評分，結(jié)果顯示：評分相比較，模型組評分顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；毫針針治療組評分升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。②與模型組評分相比照組評分顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；火針治療組的評分顯異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。③與毫針對照組評分相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)0.05）。（見表 1，圖 2）

表 1 各組實(shí)驗(yàn)兔膝關(guān)節(jié)軟骨 Mankin's 評分結(jié)果（ x±S）組別 樣本數(shù)（n） Mankin's 評分空白組 8 0.75±0.25模型組 8 8.25±0.45*毫針對照組 8 3.13±0.35*#火針治療組 8 3.38±0.38*#注：“*”表示與空白組相較 P＜0.01；“#”表示與模型組相較 P＜0.01

MP-3、MMP-13 的濃度相比較，模型組濃度顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）針對照組和火針治療組濃度升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。②與模型組兔血中 MMP-3、MMP-13 的濃度相比較，毫針對照組濃度顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（0.01）�；疳樦委熃M的濃度顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。③毫針對照與火針治療組兔血清中 MMP-3、MMP-13 的濃度相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）見表 2，圖 3、4）表 2 各組實(shí)驗(yàn)兔血清中 MMP-3、MMP-13 濃度（ x±S）分組 n MMP-3(ng/ml) MMP-13(ng/ml)空白組 8 7.03±0.53 22.06±1.49模型組 8 10.38±0.62*35.98±0.63*毫針對照組 8 8.27±0.47*#27.02±0.97*#火針治療組 8 8.00±0.25*#26.94±1.43*#：“*”表示與空白組相較 P＜0.01；“#”表示與模型組相較 P＜0.01
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本文編號：2840555