【摘要】：特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一種慢性不可逆,具有較高發(fā)病率和死亡率的呼吸系統(tǒng)疾病,目前尚缺乏有效的治療途徑和方法。近年來中醫(yī)藥治療IPF不斷顯現(xiàn)出一定的優(yōu)勢和特色,但仍需要更多的理論研究、臨床及實驗研究數(shù)據(jù)的支撐。右歸飲出自《景岳全書》,是溫補(bǔ)腎陽的代表方劑,在既往的臨床實踐中,發(fā)現(xiàn)該方能在緩解IPF患者臨床癥狀及提高生活質(zhì)量等方面取得良好的療效,但其療效作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。故本課題擬通過分析IPF中醫(yī)證候分布特點,明確“腎虛”在肺纖維化發(fā)病中發(fā)揮的作用,進(jìn)一步設(shè)計動物實驗對右歸飲治療肺纖維化的療效進(jìn)行評價,并探討其作用機(jī)制,為臨床診治提供參考依據(jù)。研究目的1、探析特發(fā)性肺纖維化的證候分布特點用橫斷面研究方法,對137例IPF患者的臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計分析,探析IPF患者中醫(yī)證候分布特點,并進(jìn)一步對“肺腎兩虛”相關(guān)證型患者中醫(yī)證候類型與相關(guān)影響因素、理化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析,明確“肺腎相關(guān)”理論與肺纖維化發(fā)病的重要關(guān)聯(lián),同時為下一步基礎(chǔ)實驗研究提供辨證遣方啟示。2、研究右歸飲對特發(fā)性肺纖維化的療效機(jī)制基于“肺腎相關(guān)”理論,探究右歸飲對博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化模型大鼠的干預(yù)作用,并從PGE2受體調(diào)控炎癥反應(yīng)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)細(xì)胞凋亡兩個角度探討右歸飲治療肺纖維化的作用機(jī)制。研究方法1、臨床研究選取符合納排標(biāo)準(zhǔn)的IPF患者,采用SPSS 24.0統(tǒng)計分析軟件對患者臨床資料進(jìn)行分析,統(tǒng)計患者中醫(yī)證型分布特征;將與肺腎虧虛相關(guān)證型合并為“肺腎兩虛證”,以Logistic回歸分析方法,探究肺腎兩虛型IPF患者證候與臨床特征、理化指標(biāo)之間的相關(guān)性。2、實驗研究通過氣管插管并給予博萊霉素霧化建立實驗性肺纖維化大鼠模型,在模型建立后,隨機(jī)分為模型組、吡非尼酮組、右歸飲低劑量組(右低組)、右歸飲高劑量組(右高組),并取同數(shù)量正常大鼠作為正常對照,于造模后第14天開始,正常組、模型組給予等量飲用水灌胃,吡非尼酮組、右高組、右低組分別予相應(yīng)藥物灌胃,共干預(yù)20天。干預(yù)結(jié)束后,對大鼠進(jìn)行肺功能檢查,取動脈血進(jìn)行血氣分析,留取肺臟組織。HE染色及Masson染色法觀察肺組織病理變化;酸水解法檢測羥脯氨酸含量;ELISA法檢測大鼠血清及肺組織PGE2水平;免疫組織化學(xué)染色法觀察肺組織中EP2、EP3的分布及表達(dá)情況;Western Blot法檢測肺組織CHOP、GRP78、Caspase-3蛋白表達(dá)情況;實時熒光定量PCR法檢測肺組織CHOP、GRP78mRNA表達(dá)情況。研究結(jié)果1、臨床研究本研究共納入137例IPF患者,其中肺腎氣虛證所占比例最高(29.93%),其次為肺腎氣陰兩虛證、痰熱蘊肺證、痰濁阻肺證、肺氣虛證、陰虛內(nèi)熱證;肺腎氣虛、肺腎氣陰兩虛患者年齡分布偏大;肺腎氣陰兩虛證患者FVC%顯著低于痰熱蘊肺證、痰濁阻肺證、陰虛內(nèi)熱證(p0.05),肺腎氣虛證患者DLCO%水平低于痰熱蘊肺證、痰濁阻肺證、陰虛內(nèi)熱證(p0.05);肺腎氣虛證Pa02水平低于肺氣虛證、痰熱蘊肺證、痰濁阻肺證(p0.05);Logistic回歸分析結(jié)果得出年齡50歲、男性與肺腎兩虛證型具有顯著相關(guān)性(p0.05),FVC%、Pa02與肺腎兩虛證呈負(fù)相關(guān),FVC%、PaI2越低,診斷為肺腎兩虛的可能性越大。2、實驗研究(1)肺組織形態(tài)學(xué):正常組大鼠肺臟組織結(jié)構(gòu)正常,模型組肺泡結(jié)構(gòu)紊亂,間質(zhì)中伴有大量炎性細(xì)胞浸潤,可見大量膠原纖維沉積,右歸飲治療組能不同程度抑制肺組織實變區(qū)向非實變區(qū)的炎性浸潤,并減少膠原沉積。(2)肺臟HYP含量:與正常組大鼠比較,模型組HYP水平顯著升高(p0.05);與模型組比較,右高組、吡非尼酮組HYP水平下降(p0.05)。(3)肺功能及血氣分析:與正常組大鼠比較,模型組大鼠FVC、FEF25%、FEF50%、FEF75%、MMF 水平顯著降低(p0.05),FEV0.4/FVC%水平明顯升高(p0.05);與模型組比較,吡非尼酮組、右低組、右高組FVC水平均明顯升高(p0.05);右低組能提高模型大鼠的FEF25%、FEF50%、FEF75%、MMF水平(p0.05);各組大鼠血氣分析指標(biāo)均未見顯著性差異(p0.05),但右歸飲高組與模型組相比,P02與S02均呈現(xiàn)升高趨勢。(4)肺臟質(zhì)量及肺臟系數(shù):與正常組比較,模型大鼠肺臟質(zhì)量、肺臟系數(shù)病理性升高(p0.05)。右低組與模型組相比,肺臟質(zhì)量、肺臟系數(shù)下降(p0.05)。(5)血清和肺組織中PGE2水平:與正常組大鼠相比,模型組大鼠血清和肺組織中的PGE2水平均升高(p0.05);與模型組大鼠相比,右低組大鼠血清和肺組織的PGE2水平均降低(p0.05),右高組大鼠血清中的PGE2水平降低(p0.05)。(6)EP2、EP3分布及表達(dá)情況:正常組大鼠肺組織中僅有極少數(shù)著色的EP2陽性細(xì)胞,未見表達(dá)EP3陽性的細(xì)胞;模型組大鼠實變區(qū)肺組織中AECIIs呈EP2強(qiáng)陽性表達(dá),肺泡管和肺泡腔內(nèi)則可見大量聚集的呈EP3陽性染色的巨噬細(xì)胞,與正常組比較,模型組EP2陽性和EP3陽性的細(xì)胞數(shù)均顯著增加(p0.05);右低組大鼠實變區(qū)的肺組織中EP2呈弱陽性表達(dá),EP3陽性的巨噬細(xì)胞比例明顯增加,右高組EP2陽性程度有所增強(qiáng),EP3陽性程度與模型組接近;與模型組比較,右低組EP2陽性的細(xì)胞數(shù)減少(p0.05),EP3陽性的細(xì)胞數(shù)增加(p0.05),而右高組未見統(tǒng)計學(xué)差異。(7)CHOP、GRP78蛋白表達(dá)及mRNA轉(zhuǎn)錄:與正常組比較,模型組大鼠肺組織中CHOP、GRP78蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(p0.05);與模型組相比,右高組CHOP、GRP78蛋白表達(dá)明顯降低(p0.05);模型組大鼠肺組織中CHOP、GRP78mRNA表達(dá)較正常組有升高趨勢。與模型組相比,右高組CHOP mRNA表達(dá)下調(diào),但無統(tǒng)計學(xué)差異,各治療組GRP78mRNA表達(dá)有下降趨勢。(8)Caspase-3蛋白表達(dá):與正常組相比,模型組大鼠肺組織中Caspase-3蛋白表達(dá)升高(p0.05);與模型組相比,右高組大鼠肺組織Caspase-3蛋白表達(dá)下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。研究結(jié)論1、肺腎氣虛是特發(fā)性肺纖維化主要證候,且該病常伴腎陽虛癥狀肺腎氣虛是IPF最常見的中醫(yī)證型,且肺腎氣虛證患者中多伴有腎陽虛癥狀,此外各證型中多兼夾瘀血證,該病關(guān)鍵病機(jī)可以概括為“虛、痰、瘀”,虛則主要責(zé)之肺腎,肺腎虛損是IPF發(fā)病的重要基礎(chǔ),IPF證候特點提示從補(bǔ)腎溫陽治療IPF將取得良好療效。2、肺腎兩虛多伴肺功能下降肺腎氣虛及肺腎氣陰兩虛患者多存在于老齡患者。肺腎氣陰兩虛患者多存在FVC下降,肺腎氣虛證患者多存在DLCO%與PaO2下降。年齡50歲、男性的IPF患者更容易出現(xiàn)肺腎兩虛證型,FVC%、PaO2降低與肺腎兩虛證具有顯著的相關(guān)性。3、右歸飲可通過調(diào)節(jié)前列腺素E2及改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡而延緩病程右歸飲可一定程度改善肺纖維化模型大鼠通氣功能障礙,改善肺泡氣體交換功能,降低肺組織炎性浸潤及膠原沉積情況,其機(jī)制可能與降低肺組織中PGE2的水平,抑制AECIIs中EP2的表達(dá),減少EP2陽性的AECIIs數(shù)量,增加EP3陽性的肺泡巨噬細(xì)胞數(shù)量,減輕肺臟炎性損傷,調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白GRP78、CHOP的表達(dá),改善ERS,減少細(xì)胞凋亡相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R259;R285.5
【圖文】：

圖１右歸飲對大鼠肺組織ＨＥ染色的影響（ｘｌ00）逡逑注：Ａ正常組、Ｂ模型組、Ｃ吡非尼酮組、Ｄ右歸飲低劑量組、Ｅ右歸飲高劑量組標(biāo)尺＝５０邋ｐｍ逡逑３．１．２各組大鼠月市組織Ｍａｓｓｏｎ染色逡逑Ｍａｓｓｏｎ染色結(jié)果顯示，除外氣道和血管的管壁，正常組肺間質(zhì)中幾乎未見亮藍(lán)染色逡逑的膠原纖維沉積；模型組氣道周圍的肺實變區(qū)和增厚的肺泡間隔，內(nèi)可見大量亮藍(lán)著色逡逑

的膠原纖維沉積；吡非尼酮組可見實變區(qū)內(nèi)亮藍(lán)著色的膠原區(qū)域明顯減少；右歸飲低劑逡逑量組膠原著色的實變區(qū)占比有所減少；右歸飲高劑量組膠原著色的實變區(qū)占比明顯減少，逡逑且實變區(qū)和肺泡隔中藍(lán)染的膠原沉積也顯著改善，見圖２。逡逑？壚逡逑ｍｍ逡逑７１逡逑

膠原纖維沉積明顯增多；吡非尼酮、右高組與正常組比較。ＨＹＰ含量均未見顯著差異（／＞逡逑＞０．０５）。與模型組比較，右低組ＨＹＰ改變不明顯（ｐ＞０．０５），而右高組、吡非尼酮逡逑ＨＹＰ水平明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（／？＜０．０５），見表１５，圖３。逡逑表１５右歸飲對肺組織ＨＹＰ含量的影響（ｆ±‘ｓ＇）逡逑Ｍ邐劑量（ｇ／ｋｇ）邐Ｎ邐ＨＹＰ邋含量（ｕｇ／ｍｌ）逡逑正常組邐－邐８邐５．５７±２．３２逡逑模型組邐０．０５邐７邐８．９９±１．８５＊逡逑吡非尼酮組邐５邐８邐７．０１±１．４９＃逡逑右低組邐１０邐８邐７．５５±１．８８’逡逑右高組邐８邐６．７４±１．５０＃逡逑Ｆ邋值邐３．４４８逡逑尸值邐０．０１８逡逑注：與正常組相比，＞＜０．０５；與模型組相比，＃ｐ＜０．０５。逡逑７２逡逑

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王粉利;付偉;李健;李彥斌;;吡非尼酮治療特發(fā)性肺纖維化的臨床效果[J];臨床醫(yī)學(xué)研究與實踐;2019年09期

2 王海琳;余學(xué)慶;;從肺腎論老年特發(fā)性肺纖維化的治療[J];中醫(yī)研究;2019年05期

3 曹孟淑;蔡后榮;;2018年特發(fā)性肺纖維化臨床診斷指南解讀[J];中國實用內(nèi)科雜志;2019年05期

4 何浪濤;何亦濤;宋衛(wèi)東;;支氣管肺泡灌洗液和血清中細(xì)胞介素-17和白細(xì)胞介素-6在老年特發(fā)性肺纖維化中的應(yīng)用價值[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2017年60期

5 楊鳳;金藝鳳;;特發(fā)性肺纖維化治療的研究進(jìn)展[J];沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2018年01期

6 王淼;;特發(fā)性肺纖維化 比肺癌致命[J];江蘇衛(wèi)生保健;2018年09期

7 楊丹丹;張杰;;特發(fā)性肺纖維化中西治療藥物研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2016年34期

8 蘇衛(wèi);;特發(fā)性肺纖維化 老人的索命殺手——訪南京鼓樓醫(yī)院呼吸科副主任醫(yī)師、副教授 代靜泓[J];江蘇衛(wèi)生保健;2017年03期

9 沈凌;夏俊波;祁明浩;王利民;;特發(fā)性肺纖維化合并肺癌8例臨床分析[J];浙江醫(yī)學(xué);2014年20期

10 盛立新;;特發(fā)性肺纖維化疾病的中醫(yī)臨床診治[J];中醫(yī)臨床研究;2015年17期

相關(guān)會議論文 前10條

1 羅瓊;孫洋;徐強(qiáng);;艾拉莫德改善小鼠特發(fā)性肺纖維化的免疫學(xué)機(jī)制研究[A];第十屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會匯編[C];2015年

2 張紓難;;特發(fā)性肺纖維化患者生存質(zhì)量評價研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會內(nèi)科第十二次肺系病學(xué)術(shù)交流大會論文集[C];2006年

3 張穎;楊春燕;陳安寶;;特發(fā)性肺纖維化藥物治療研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第十三次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會大會論文集[C];2010年

4 丁輝;周鳳秋;蔡后榮;孟凡青;;特發(fā)性肺纖維化患者肺組織的窖蛋白-1、膠原-Ⅰ、α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)變化及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 李振華;彭守春;康健;于潤江;;特發(fā)性肺纖維化患者死亡預(yù)后因素的回顧性隊列研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 李振華;康健;侯顯明;于潤江;;特發(fā)性肺纖維化患者生存相關(guān)因素分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

7 康健;;特發(fā)性肺纖維化診斷和治療的最新動態(tài)[A];呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)（2010-2011）[C];2011年

8 鄭洪;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與特發(fā)性肺纖維化治療[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2011（第十二次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

9 張柳春;;特發(fā)性肺纖維化的治療進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

10 曹黛茵;陳靜瑜;高霏;李智;羅益鋒;郭禹標(biāo);;巨噬細(xì)胞移動抑制因子及轉(zhuǎn)化生長因子-β1在特發(fā)性肺纖維化患者中的表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 南方日報記者 嚴(yán)慧芳;特發(fā)性肺纖維化尚缺“特效藥”[N];南方日報;2018年

2 本報記者 白毅;特發(fā)性肺纖維化診療盼提速[N];中國醫(yī)藥報;2016年

3 本報記者 白毅;特發(fā)性肺纖維化診治有可喜進(jìn)展[N];中國醫(yī)藥報;2015年

4 本報記者 陳青;特發(fā)性肺纖維化誤診率高達(dá)50%[N];文匯報;2015年

5 本報記者 趙玲;讓吹肥皂泡不再成為挑戰(zhàn)[N];中國醫(yī)藥報;2014年

6 本報記者 魏平;特發(fā)性肺纖維化,診斷標(biāo)準(zhǔn)廢舊立新[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

7 春光;什么是“特發(fā)性肺纖維化”[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2009年

8 閆辛;特發(fā)性肺纖維化應(yīng)早診治[N];中國中醫(yī)藥報;2007年

9 代華平;特發(fā)性肺纖維化尚不能根治[N];健康報;2006年

10 ;特發(fā)性肺纖維化的臨床特點及治療[N];人民日報海外版;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 邱岳;特發(fā)性肺纖維化中醫(yī)證候研究及右歸飲干預(yù)肺纖維化大鼠的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 徐昌君;基于特發(fā)性肺纖維化miRNA-21、let-7d和自噬調(diào)控關(guān)系研究黃芪組分的干預(yù)作用[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

3 任延毅;基于文獻(xiàn)分析和病例回顧的特發(fā)性肺纖維化病機(jī)、證候與方藥規(guī)律研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2017年

4 周瑋;中國人ABCA3和MUTYH基因變異與特發(fā)性肺纖維化的遺傳基礎(chǔ)研究[D];南京大學(xué);2017年

5 臧建華;周兆山教授臨床經(jīng)驗總結(jié)暨和解清利飲治療特發(fā)性肺纖維化的臨床觀察與實驗研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 郝小燕;長鏈非編碼RNA AP003419.16調(diào)控RPS6KB2對衰老相關(guān)特發(fā)性肺纖維化的機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

7 張紓難;特發(fā)性肺纖維化患者生存質(zhì)量評價研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

8 彭守春;特發(fā)性肺纖維化預(yù)后相關(guān)因素的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

9 劉波;長期抗反流治療可改善特發(fā)性肺纖維化患者的生存期[D];山東大學(xué);2017年

10 劉佳;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 卞園園;肺纖湯治療特發(fā)性肺纖維化（氣陰兩虛，痰熱郁肺證）的臨床觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2018年

2 馬泉;補(bǔ)肺活血化濁法對特發(fā)性肺纖維化肺功能的影響[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2018年

3 王明杰;補(bǔ)陽還五湯對大鼠特發(fā)性肺纖維化的改善機(jī)制與凋亡因子BCL2和自噬的關(guān)系[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 陳響;miR-497在特發(fā)性肺纖維化發(fā)生過程中的作用及機(jī)制探討[D];南京大學(xué);2016年

5 王玉潔;通過肺/主動脈直徑比值預(yù)測特發(fā)性肺纖維化預(yù)后的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2018年

6 劉會金;特發(fā)性肺纖維化疾病中氧化應(yīng)激反應(yīng)對肺泡干細(xì)胞功能的調(diào)控[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

7 張月薪;特發(fā)性肺纖維化合并肺炎患者的臨床特征及其住院不良預(yù)后的危險因素分析[D];西南醫(yī)科大學(xué);2018年

8 雷凱春;吡非尼酮治療特發(fā)性肺纖維化的臨床療效及不良反應(yīng)[D];蘭州大學(xué);2018年

9 王桂;丹貝益肺顆粒對特發(fā)性肺纖維化大鼠CD31和CD34蛋白表達(dá)水平的影響[D];黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院;2018年

10 李剛;血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑對特發(fā)性肺纖維化患者療效影響的Meta分析[D];川北醫(yī)學(xué)院;2018年

本文編號：2791846