【摘要】：目的探討調(diào)肝解毒方和針刺對(duì)癲癇模型大鼠行為學(xué)和腦內(nèi)GFAP表達(dá)的影響。方法取清潔級(jí)SD大鼠70只,雌雄各半。隨機(jī)分為七組,分別為空白組、模型組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、針刺組、丙戊酸鈉組,每組10只。用化學(xué)點(diǎn)燃方法制作癲癇模型,藥品選用戊四氮(Pentetrazol,PTZ)。用Lado分級(jí)方法判斷癲癇模型是否制備成功。通過調(diào)肝解毒方和調(diào)肝通督針刺方法進(jìn)行干預(yù)治療。動(dòng)物飼養(yǎng)并結(jié)束治療后進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè),觀測(cè)中藥和針刺對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶和情感的影響。行為學(xué)通過癲癇發(fā)作潛伏期與發(fā)作等級(jí)、Y-迷宮實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。后參照Paxinos《大鼠腦立體定位圖譜》進(jìn)行腦組織的解剖。解剖的腦組織采用免疫組化方法測(cè)定腦內(nèi)GFAP的表達(dá),從每組大鼠的切片中隨機(jī)選取10張,每張切片選取相同部位在光鏡下進(jìn)行觀察并計(jì)算陽性細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果1一般生長(zhǎng)狀況與體重比較空白組正常飼養(yǎng),沒有癇性發(fā)作,被毛光澤,無脫毛現(xiàn)象,體重正常增長(zhǎng)。治療前除空白組其余各組癲癇發(fā)作模型大鼠出現(xiàn)體重下降,掉毛,被毛光澤度變差,食欲下降等。經(jīng)過治療后,模型組體重為192.14±8.51、中藥高劑量組體重為291.67±18.73、針刺組體重為294.50±16.91,與模型組相比,中藥高劑量組和針刺組大鼠的體重增長(zhǎng)比較明顯(P0.01),飲食飲水增加,大鼠被毛光澤度有所恢復(fù),脫毛得到減輕。2癲癇發(fā)作等級(jí)比較實(shí)驗(yàn)過程中空白組沒有癇性發(fā)作。經(jīng)過治療后,觀察每組大鼠癲癇發(fā)作等級(jí),經(jīng)過治療后各組大鼠之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),模型組秩均值為42.29、中藥高劑量組為11.83、針刺組為12.44,中藥高劑量組和針刺組癲癇發(fā)作等級(jí)明顯低于模型組(P0.01)。3癲癇發(fā)作潛伏期比較實(shí)驗(yàn)過程中空白組沒有癇性發(fā)作。治療21天后,模型組癲癇發(fā)作潛伏時(shí)間為252.71±32.75、中藥高劑量組為646.56±52.88、針刺組為622.75±47.56、丙戊酸鈉組為629.44±29.02,與模型組比較,中藥高劑量組、針刺組和丙戊酸鈉組均能明顯延長(zhǎng)癲癇發(fā)作的時(shí)間(P0.01)。4 Y-迷宮學(xué)習(xí)記憶比較治療21天后測(cè)得兩天Y-迷宮回避錯(cuò)誤數(shù)據(jù),第一天Y-迷宮回避錯(cuò)誤比較:模型組回避錯(cuò)誤為10.14±1.77、空白組為6.40±1.58、中藥高劑量組為7.11±1.86、中藥中劑量組為8.89±1.27、針刺組為6.88±1.81。與空白組、中藥高劑量組、針刺組比較,模型組回避錯(cuò)誤有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01);與中藥高劑量組比較,中藥中劑量組回避錯(cuò)誤有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。第二天Y-迷宮回避錯(cuò)誤比較:空白組回避錯(cuò)誤為5.70±1.49、中藥高劑量組為7.00±1.73、針刺組為6.63±1.69,模型組為9.43±1.72,與空白組和針刺組比較,模型組回避錯(cuò)誤有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01);與模型組比較,中藥高劑量組回避錯(cuò)誤有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)比較治療21天后,模型組的曠場(chǎng)得分為11.14±2.41、中藥高劑量組為23.33±3.61、中藥中劑量組為17.56±2.70、針刺組為21.88±3.56、丙戊酸鈉組為19.11±2.93。與模型組比較,中藥高劑量組、針刺組、丙戊酸鈉組曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分明顯高于模型組(P0.01);中藥中劑量組大鼠的曠場(chǎng)得分則明顯低于高劑量組(P0.01)。6免疫組化結(jié)果比較治療結(jié)束后每組大鼠腦內(nèi)GFAP陽性細(xì)胞數(shù)比較,空白組為24.10±7.08、模型組為62.71±4.15、中藥高劑量組為29.00±3.57、中藥中劑量組為35.67±3.77、針刺組為29.25±5.01、丙戊酸鈉組為34.33±4.66,空白組、中藥高劑量組、針刺組的GFAP陽性細(xì)胞數(shù)量明顯低于模型組(P0.01);中藥高劑量組的GFAP表達(dá)數(shù)量明顯低于中藥中劑量組(P0.01)。結(jié)論1戊四氮化學(xué)點(diǎn)燃法可以誘發(fā)大鼠出現(xiàn)癲癇發(fā)作癥狀,并使大鼠腦內(nèi)GFAP表達(dá)增多、行為學(xué)測(cè)試表現(xiàn)變差。2調(diào)肝解毒方和針刺均能降低癲癇大鼠癲癇發(fā)作等級(jí)并且能延長(zhǎng)癲癇發(fā)作潛伏期。3調(diào)肝解毒方和針刺均能提升癲癇大鼠的行為學(xué)表現(xiàn),提升大鼠的記憶和學(xué)習(xí)能力,并且改善大鼠焦慮、抑郁等情緒,可能是通過降低腦內(nèi)GFAP的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。圖2幅;表8個(gè);參120篇。
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R245;R-332
【圖文】：

圖 1 Y-迷宮測(cè)定結(jié)果Fig.1 Y-maze test results注：A ：空白組；B ：模型組；C ：中藥高劑量組；D ：中藥中劑量組；E ：中藥低劑量組；F ：針刺組；G ：丙戊酸鈉組。

圖 2 腦組織 IHC 染色結(jié)果Fig.2 Results of IHC staining in brain tissue：A ：空白組；B ：模型組；C ：中藥高劑量組；D ：中藥中劑量組；E ：中藥低劑量組；F ： ：丙戊酸鈉組。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2715116