發(fā)布時(shí)間：2020-05-31 10:04

【摘要】：目的:本研究從TRAIL、IL-10免疫因子入手,觀察它們參與損傷大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制,對(duì)比凋亡過(guò)程中血液與骨骼肌中TRAIL與IL-10表達(dá)水平的變化趨勢(shì),探尋其中的變化規(guī)律,并結(jié)合中醫(yī)的氣血理論分析變化原理。通過(guò)數(shù)據(jù)分析和討論,從新的視野揭示TRAIL和IL-10參與急性閉合性軟組織損傷修復(fù)過(guò)程中細(xì)胞凋亡的機(jī)制以及在血液和骨骼肌中的對(duì)比變化;同時(shí),創(chuàng)新性地運(yùn)用中醫(yī)氣血理論分析不同時(shí)相點(diǎn)細(xì)胞凋亡和免疫因子波動(dòng)變化規(guī)律,從變化規(guī)律中探尋損傷修復(fù)過(guò)程中可能存在的新的影響因素,為臨床傷科治療中更加準(zhǔn)確地把握治療的介入時(shí)機(jī)和中醫(yī)氣血理論的運(yùn)用提供基礎(chǔ)性研究依據(jù)。方法:選用80只SPF級(jí)SD大鼠,用抽簽法對(duì)大鼠隨機(jī)分組,分組包括:空白組、1H組、12H組、24H組、2D組、3D組、7D組、14D組。每10只大鼠編入一組,雌、雄各半。使用定量打擊法進(jìn)行造模,按照相應(yīng)的時(shí)相點(diǎn)處死造模大鼠,最后處死空白組,并取血液和骨骼肌組織,用TUNEL法測(cè)試骨骼肌細(xì)胞凋亡情況,并作病理切片鏡下觀察,用ELISA檢測(cè)血液和骨骼肌組織中TRAIL和IL-10的表達(dá)水平。利用統(tǒng)計(jì)學(xué)手段分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),結(jié)合中醫(yī)氣血理論進(jìn)行分析討論。結(jié)果:1)損傷后12小時(shí),細(xì)胞凋亡的執(zhí)行階段未被全面激活,血液中TRAIL劇烈增長(zhǎng)出現(xiàn)峰值,同時(shí)IL-10水平下降達(dá)到谷值;2)損傷后12小時(shí)到3天的時(shí)相區(qū)間,損傷細(xì)胞的凋亡劇烈增長(zhǎng),血液和骨骼肌中TRAIL和IL-10的表達(dá)平行發(fā)展,出現(xiàn)病理情況下的臨時(shí)穩(wěn)態(tài);3)損傷后14天時(shí)相區(qū)間,血液中TRAIL和IL-10水平回到正常值,但骨骼肌的指標(biāo)水平和細(xì)胞凋亡率未接近正常值;4)TRAIL和IL-10比值比均值在多個(gè)時(shí)相點(diǎn)呈現(xiàn)共軛變化趨勢(shì)。結(jié)論:損傷后12小時(shí),血液中免疫因子出現(xiàn)劇烈的上下波動(dòng)變化,骨骼肌中的免疫表達(dá)不激烈,可能預(yù)示著整體氣血原有的動(dòng)態(tài)平衡首先遭到破壞;而在細(xì)胞凋亡執(zhí)行程序啟動(dòng)的過(guò)程中,血液和骨骼肌中免疫因子的穩(wěn)態(tài)變化,可能受整體和局部氣血在病理情況下的臨時(shí)穩(wěn)態(tài)調(diào)控;損傷后14天,病理過(guò)程導(dǎo)致的全身免疫反應(yīng)基本結(jié)束,但局部的細(xì)胞凋亡和免疫反應(yīng)還未完全終止,這可能與該時(shí)相點(diǎn)整體和局部的氣血新平衡建立與否有關(guān);整體與局部氣血平衡的破舊立新有可能是免疫因子在不同時(shí)相點(diǎn)呈現(xiàn)共軛變化趨勢(shì)的調(diào)控因素。
【圖文】：

TUNEL凋亡檢測(cè)原理

圖 2 細(xì)胞凋亡檢測(cè)主要流程5.1.3 圖像采集和報(bào)告采用數(shù)碼三目攝像顯微攝像系統(tǒng)對(duì)封片制作完成的切片進(jìn)行圖像采集。驟為：先用 100 倍鏡觀察全部組織情況，，再根據(jù)組織大小及細(xì)胞凋亡表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：成都體育學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R274;R-332

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本文編號(hào)：2689684