【摘要】：目的:探討(1)“化痰開(kāi)竅”電針?lè)▽?duì)高血脂合并腦缺血模型大鼠血脂、行為學(xué)、腦組織形態(tài)學(xué)和缺血側(cè)室管膜下區(qū)(SVZ區(qū))、腦缺血半暗帶區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神經(jīng)生長(zhǎng)因子(Nerve Growth Factor,NGF)表達(dá)的影響。(2)電針對(duì)單純腦缺血大鼠行為學(xué)、腦梗死體積以及缺血側(cè)SVZ區(qū)GFAP和NGF蛋白表達(dá)的影響。方法:實(shí)驗(yàn)一:將90只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、高血脂合并假手術(shù)組、高血脂合并腦缺血模型組、高血脂合并腦缺血電針1組和2組。除正常組,其余各組大鼠均采用高脂飼料喂養(yǎng)42天,電針1組采用“豐隆”穴兩側(cè)電針,每天1次,連續(xù)7天。第50天,模型組和電針組用50%FeCl3誘導(dǎo)建立高血脂癥合并大腦中動(dòng)脈血栓閉塞模型,術(shù)后電針組采用電針“豐隆”和“百會(huì)”穴,每日1次,連續(xù)14天。采用生物化學(xué)法測(cè)定血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平,采用神經(jīng)功能評(píng)分評(píng)估行為學(xué)改變,HE染色觀察形態(tài)學(xué)改變,免疫組化法檢測(cè)SVZ區(qū)、缺血半暗帶區(qū)GFAP和NGF蛋白的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)二:將72只雄性SD大鼠隨機(jī)分為腦缺血模型組,假手術(shù)組,電針1組和電針2組。普通飼料喂養(yǎng),電針1組電針兩側(cè)“豐隆”穴,每天1次,連續(xù)7天,第8天,用50%FeCl3誘導(dǎo)建立大腦中動(dòng)脈血栓閉塞模型,電針1、2組電針“百會(huì)”、“豐隆”穴,每日1次,連續(xù)7天。采用神經(jīng)功能評(píng)分法評(píng)估行為學(xué)改變,氯化三苯四氮唑(TTC)染色用于檢測(cè)大鼠腦梗塞體積。免疫組化法檢測(cè)大鼠腦缺血后第1,7天SVZ區(qū)的GFAP和NGF蛋白的表達(dá)。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:(1)神經(jīng)行為學(xué):模型組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分較高,出現(xiàn)缺血側(cè)前肢屈曲,后肢無(wú)力,向健側(cè)轉(zhuǎn)圈等神經(jīng)缺損癥狀。電針1組神經(jīng)缺損癥狀明顯輕于模型組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與電針2組比較,電針1組大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀緩解較為明顯。(2)血脂四項(xiàng):模型組大鼠高血脂合并腦缺血術(shù)后TC、LDL升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),HDL降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),證明高血脂癥造模成功。與模型組相比,術(shù)后7天,電針組TG降低具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說(shuō)明電針可能有降血脂的作用,電針1組的減少比電針2組更明顯,表明預(yù)治療降血脂的效果更好。(3)腦組織形態(tài):假手術(shù)組腦神經(jīng)元形態(tài)幾乎正常,整體組織結(jié)構(gòu)正常。模型組可見(jiàn)皺縮神經(jīng)元,整體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)顯腦缺血癥。電針治療后,缺血區(qū)周?chē)[減輕,細(xì)胞核逐漸恢復(fù),整體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常。(4)免疫組化結(jié)果顯示:在大鼠側(cè)腦室背外側(cè)伸展,術(shù)后1天,與假手術(shù)比較,模型組GFAP面密度顯著增加(P0.05)。與模型組比較,電針組GFAP面密度持續(xù)增加至術(shù)后14天。術(shù)后7天,電針1組GFAP面密度和模型組比較,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),電針1組面密度高于電針2組。在大鼠側(cè)腦室外側(cè)壁上段,術(shù)后1天,與假手術(shù)組比較,模型組GFAP面密度明顯增加(P0.01)。術(shù)后7天,與模型組比較,電針1組GFAP面密度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后14天,與模型組比較,電針1組GFAP面密度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);電針2組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與電針1組比較,電針2組GFAP面密度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),電針1組面密度高于電針2組。在大鼠缺血半暗帶區(qū),術(shù)后1天,與假手術(shù)組比較,模型組GFAP面密度明顯增加(P0.01)。與模型組比較,電針1組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后14天,與模型組比較,電針組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與電針1組比較,電針2組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。在大鼠側(cè)腦室背外側(cè)伸展,術(shù)后1天,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠NGF面密度的表達(dá)明顯增加。術(shù)后7天,與模型組比較,電針組NGF面密度表達(dá)升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),電針1組NGF面密度表達(dá)高于電針2組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且持續(xù)升高至術(shù)后14天。在大鼠側(cè)腦室外側(cè)壁上段,術(shù)后1天,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠NGF面密度的表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后7天,與模型組相比,電針組的NGF面密度明顯升高。術(shù)后14天,與模型組比較,電針組NGF面密度持續(xù)升高,電針1組NGF面密度高于電針2組。在大鼠缺血半暗帶區(qū),術(shù)后1天,與假手術(shù)組比較,模型組升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后14天,與模型組比較,電針1組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。實(shí)驗(yàn)二:(1)神經(jīng)行為學(xué):與模型組神經(jīng)功能評(píng)分比較,電針組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),提示缺血導(dǎo)致腦功能?chē)?yán)重喪失,電針組大鼠患肢功能恢復(fù),提示電針對(duì)腦缺血恢復(fù)有一定作用。(2)腦梗死體積:與模型組比較,電針組腦梗死體積減小,電針1組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),電針1組腦梗死體積小于電針2組。(3)免疫組化結(jié)果顯示:在大鼠側(cè)腦室背外側(cè)伸展和側(cè)腦室外側(cè)壁上段,假手術(shù)組GFAP標(biāo)記的面密度略有表達(dá),模型組的表達(dá)明顯高于假手術(shù)組(P0.05),電針組表達(dá)顯著高于模型組,并持續(xù)至缺血后7天。假手術(shù)組NGF表達(dá)含量極少,缺血后第1天增加,術(shù)后7天最明顯的改善在電針1組,假手術(shù)和電針2組也不同程度的增加,腦缺血組顯示最少。結(jié)論:“化痰開(kāi)竅”電針?lè)ú捎迷诟咧Y階段電針“豐隆”穴,腦缺血后電針“豐隆”、“百會(huì)”穴能夠調(diào)節(jié)血脂代謝,促進(jìn)腦缺血大鼠肢體功能康復(fù)、減少腦梗死體積,改善腦組織病理形態(tài)學(xué)變化,上調(diào)缺血側(cè)大鼠SVZ區(qū)、缺血半暗帶區(qū)GFAP和NGF蛋白,促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞活化和神經(jīng)生長(zhǎng)因子的表達(dá),恢復(fù)受損神經(jīng)系統(tǒng),為臨床針灸治療中風(fēng)提供了理論依據(jù)。
【圖文】：

明腦缺血模型造模成功。電針１組和電針２組的神經(jīng)功能評(píng)分均低于模型組，電針１組逡逑評(píng)分又低于電針２組，提示電針１組、電針２組的神經(jīng)功能缺損有所減輕，且電針１組逡逑優(yōu)于電針２組。結(jié)果見(jiàn)表１，圖１。逡逑邐表１各組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分比較（無(wú)土ｓ，邋ｎ＝６）邐逡逑組別邐神經(jīng)功能缺損評(píng)分ＮＤＳ邋（ｓｃｏｒｅ）逡逑假手術(shù)組邐０邋＋邋０逡逑模型組邐２．５０±０．４５”逡逑電針１組邐１．６７±０．邋４廣＂逡逑電針邋２邋組邐１．８３±０．６８＂逡逑Ｆ邐４．２００逡逑邐Ｐ邐０．邋０３６邐逡逑注：與假手術(shù)比較＊＊尺0．邋０１；與模型組比較ｔｔＫＯ．邋０５。逡逑Ｓ邋４］邐■假手術(shù)組逡逑＾３－邐＂邐ＥＥ３模型組逡逑｜２．邐Ｍ邋＾邋Ｔ邋□電針１組逡逑５邐Ｂ邐ｒ＾－ｉ邐＾邐ｓ電針２組逡逑ｊｉ邐■邐１Ｂ逡逑＇邐假手術(shù)鉅模型組電針１組電針２組逡逑圖１各組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分比較逡逑注：與假手術(shù)比較＊＊尺0．邋０１；與模型組比較＃代0．邋０５。逡逑３３逡逑

圖１各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血脂檢測(cè)結(jié)果（ｍｍｏｌ／Ｌ：邋ｊｆ士ｓ；邋ｎ＝６）逡逑Ａ：正常組；Ｂ：模型組；Ｃ：假手術(shù)組；Ｄ：電針１組；Ｅ：電針２組。注：圖卜Ａ總膽固醇（ＴＣ）含逡逑量結(jié)果；圖１－Ｂ甘油三酯（ＴＧ）結(jié)果：圖卜Ｃ高密度脂蛋白（ＨＤＬ）結(jié)果；圖卜Ｄ低密度脂蛋白結(jié)果逡逑（ＬＤＬ）結(jié)果。與正常組比較＊尺０．０５＊＊代０．０１；與模型組比較＃尺０．０５＃＃代０．０１；與假手術(shù)比較逡逑ＡＫＯ．邋０５ＡＡ代０．邋０１逡逑３．邋３腦組織形態(tài)學(xué)變化逡逑高血脂合并腦缺血術(shù)后１天，在腦皮質(zhì)區(qū)，｜￡常組神經(jīng)細(xì)胞核大而圓，淡染，呈均逡逑勻藍(lán)色，核仁明顯，胞質(zhì)粉紅色，神經(jīng)元細(xì)胞相互連接構(gòu)成腦組織，整體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)逡逑正常。假手術(shù)組神經(jīng)元形態(tài)基本接近正常，僅有少量細(xì)胞核淡染，整體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)正逡逑常。模型組可見(jiàn)皺縮神經(jīng)元，細(xì)胞核體積變小固縮，呈淡藍(lán)色，胞體組織稀疏凌亂，整逡逑體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)顯腦缺血癥。電針１組神經(jīng)元形態(tài)基本接近正常，偶見(jiàn)萎縮的神經(jīng)細(xì)胞逡逑核，染色較深，整體組織形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常。電針２組可見(jiàn)固縮神經(jīng)細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)呈逡逑淺粉紅色，，細(xì)胞邊界不清，整體切片顯腦缺血癥（輕型）。結(jié)果見(jiàn)附圖中圖１。逡逑在腦髓質(zhì)區(qū)
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R245.97

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本文編號(hào)：2654671